涎腺疾病

20062419脂质体介导nm23-h1质粒体内转染腺样囊性癌可行性；20062420腮腺切除改良术式治疗腮腺良性肿瘤；20062421内镜辅助下慢性阻塞性腮腺炎的病因分析；20062422核因子KB与涎腺腺样囊性癌微血管密度、临床病理及预后的关系；20062423唾液腺腺样囊性癌FAK和PTEN蛋白的表达及意义；20062424CT灌注诊断腮腺肿瘤的临床价值评价。[编者按]     

转化生长因子β1对坐骨神经移植后免疫耐受的影响

背景：转化生长因子β1是一种强效细胞生长增殖调节蛋白,在移植免疫的抗排斥反应、移植物血管病发展中扮演重要角色。 目的：观察经冷冻处理异体神经移植后，局部注射转化生长因子β1对移植免疫排斥反应的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-06/2008-06在哈尔滨医科大学动物实验中心完成。 材料：受体为清洁级SD大鼠60只，分为3组：自体神经移植组、异体神经移植组、转化生长因子β1质粒+异体神经移植组，每组20只。供体为40只Wistar雄性大鼠。pAdTrack-CMV-TGF-β1质粒、pAdEasy-1-Bj51833细胞由哈尔滨医科大学附属四院骨科实验室惠赠。 方法：取供体大鼠40只作双侧股后外侧纵切口,分离显露坐骨神经,切取双侧整段坐骨神经,置于无菌冷冻管中保存1周,备用。手术显微镜下将受体鼠自骨二头肌与半腱肌和半膜肌间隙剪开结缔组织，显露坐骨神经，从犁状肌孔下0.5 cm处整齐剪下长约1 cm的坐骨神经。自体神经移植组、异体神经移植组选择粗细相等、已预制冷冻的自体及异体神经移植；转化生长因子β1质粒+异体神经移植组异体神经移植后于大鼠局部肌肉及神经两断端内注射pAdTrack-CMV-TGF-β1质粒40 μg/只。 主要观察指标：术后3，6，9周各组大鼠运动神经传导速度、病理学和轴突计数检查。 结果：转化生长因子β1质粒+异体神经移植组运动神经传导速度高于新鲜异体神经移植组(P < 0.01)，与自体神经移植组比较差异无显著性意义。自体神经移植组、转化生长因子β1质粒+异体神经移植组术后9周轴突计数较新鲜异体神经移植组高(P < 0.01)。转化生长因子β1质粒+异体神经移植组光镜及电镜可见神经纤维走行正常，排列完好，神经纤维可见血管增生，髓鞘结构较好，神经纤维内见有大量再生髓鞘，许旺细胞明显增多，胞质较发达，大量粗面内质网，线粒体结构清晰，再生的轴突内微丝密集排列，与自体神经移植组接近。异体神经移植组光镜及电镜可见神经纤维数量少、排列紊乱，髓鞘轴突变性明显，大部分神经纤维脱髓鞘崩解，轴突消失，未见再生的神经纤维。 结论：局部注射转化生长因子β1质粒联合冷冻处理的冷藏异体神经移植可以协同减轻移植后产生的免疫排斥反应。     

应用质粒分析探讨医院内细菌感染的流行病学特点

为探讨医院内细菌感染的流行病学特点，作者借助临床分离的６４株肺为克雷伯菌，４５株阴沟肠杆菌和６３株醋酸钙不动杆菌，进行质粒图谱分３种细菌分别有５８株，３５株和４１株含有质粒，且分别构成４６个，２１个和２３个质粒图谱型。结果表明：质粒分析为查明医院内细菌感染源和感染途径提供了较为直接，准确的客观依据，同时也看到了质粒分析的局限性。     

人酪氨酸羟化酶基因真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

用限制性内切酶EcoRI从pKS(-)HTH_1切下全长为1.9 kb的人酪氨酸羟化酶基因,在T_4DNA连接酶的作用下连接在真核表达载体pCDNA_3的EcoR Ⅰ位点,构建成重组质粒pcD-NA_3HTH_1,该质粒转染COS-7细胞,免疫荧光组织化学染色证实酪氨酸羟化酶在其中的表达。     

简便快速微量提取鼠疫菌质粒DNA方法的研究

检查鼠疫菌有多种方法,用检查鼠疫菌所含质粒鉴定鼠疫菌也是一种较好的方法,尤其对非典型鼠疫菌最为适用。简单快速微量提取质粒的方法可应用于现场。此外,在遗传工程实验中,常常在配合生物学鉴定时,尚须对大量的转化接合等菌落作质粒抽提鉴定,以及从细菌中快速提取小     

金黄色葡萄球菌耐药性（R）质粒的鉴定

金黄色葡萄球菌是重要的化脓菌之一。该菌引起的感染涉及临床许多领域；细菌易形成耐药性是该菌的另一重要特性，从基因水平分析，金黄色葡萄球菌的耐药怀可能是由细菌染色体基因决定的，也可能是南粒基因所编码。因此，对耐药性（Ｒ）质粒的检测是研究金区区２耐药基因的常用方法。但是，由于金葡菌细胞壁厚而坚固，抽提Ｒ质粒通常使用溶葡萄球菌素。该试剂需进口且昂贵。本文使用一种经过改进的ｋａｄｏ和Ｌｉｕ质粒抽提法对耐药悸     

赖型钩体flaB2与VR1012中的CpG基序分析

目的：对问号赖型钩端螺旋体（赖型钩体）DNA疫苗[包括内鞭毛蛋白基因（flaB2)和质粒DNA表达载体（VR1012）]的CpG基序（CpG motifs)进行分析，为DNA疫苗免疫机制的阐明和提高DNA疫苗的效能奠定基础。方法：以flaB2与VR1012构建重组DNA的免疫原，对flaB2及VR1012全核苷酸序列进行计算机分析（分类、计数和定位）。结果：CpG的“C”的侧翼为两个嘌呤，“G”的侧翼为两个嘧啶，在flaB2中共3个，分别为GACGCT，GACGTC和GACGCC；在VR1012中共11个，分别为GACGTC1个，GACGCT2个，GACGCC1个，GACGTT1个，GGCGTT2个，GGCGCT2个，GGCGCC1个，AACGCT1个，其中特别重要的TGACGTCA4个和TAACGCCA有1个，位于5'端456－463；509－516；592－599；778－785和486－493；4个TGACGTCA和1个TAACGCCA均位于5'端且相对集中。结论：赖型钩体flaB2与VR1012构成的DNA疫苗含有TGACGTCA等CpG，这些基序又称免疫刺激序列，构成了DNA疫苗中的佐剂。     

大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白真核表达质粒的构建

在人类哮喘及其他过敏反应性疾病中 ,肥大细胞始终处于重要地位。IgE的Fc段与肥大细胞上高亲和力受体FcεRⅠ相连接触发过敏反应。单独的Fc段能封闭其高亲和力受体 ,阻断过敏反应 ,且将关键结合位点定位于Fc段的CH3[1 3 ] 。国外研究发现 ,肥大细胞表面表达Fas,抗Fas抗体能够诱     

结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

目的 构建结核分枝杆菌Ag85B／GSF融合蛋白表达质粒，并在大肠杆菌(E．coli)中诱导表达。方法 以质粒pUC18／Ag85B为模板，用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因，扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点，下游含有SalⅠ酶切位点；将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中，构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E．coli B121，筛选阳性重组子，限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，SDS-PAGE和Westem blot鉴定结果。结果 成功构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并表达出Mr约56000大小的Ag85B／GSY融合蛋白，表达量占总菌体的30％。结论 为进一步进行纯化Ag85B蛋白和研究其在膀胱肿瘤治疗中的作用奠定了基础。