大菱鲆健康苗种高产培育技术

介绍了在大菱鲆苗种培育过程中,添加微藻、有益复合菌、弧菌疫苗,在稳定的水环境中培育健康苗种,取得较高的成活率。     

一种吻蛭类大鱼蛭在大菱鲆鱼体上的感染

在山东省威海崮山育苗场发现大菱鲆成鱼及幼鱼鱼体感染寄生虫，受感染的鱼由于处于感染初期，并经过及时的处理，所占比例较低。病鱼症状为鱼体体色变黑、瘦弱、离群、不摄食甚至死亡。寄生虫寄生于大菱鲆的体表及鳃部，虫体黑褐色，全长40～50mm。经鉴定，该寄生虫属于环节动物门(Annelida)，蛭纲(Hirudinea)，吻蛭目(Rhynochobdellida Blanchard)，鱼蛭科(Piscicolidae Johnson)，鱼蛭属(Piscicola Blainville)，大鱼蛭(Pisciola magna Yang)。     

复合有益菌剂对工厂化大菱鲆育苗水净化效果研究

On the basis of purifying effect of single strain probiotic bacteria on water of intensive turbot breeding, the purifying effect of multistrain bacteria product was studied. The results of experiments showed that the free multistrain mixed bacteria had better purifying effect on turbot breeding water than that of any singlestrain bacteria. this phenomenon can be explained with the principle of “ biopump”. The immobilized multistrain probiotics product, biofilm, also showed excellent purifying effect on wate r of turbot breeding. The removal rates of COD and ammonia in 5 days were up to 73.1% and 80.0%, respectively. The concentration of nitrite kept low, which indicated most ammonia had been transformed into nitrate and accumulation of harmful intermediate productnitrite was decreased. This paper supplied theoretical and technical foundation for saving sea water through biopurification of wastewater from marine fish culture.     

纯氧充气对大菱鲆生长及水质指标的影响

主要研究了纯氧增氧技术对大菱鲆的生长及养殖水体中几项重要水质因子的影响。本实验中,实验池中的溶氧最低能维持在8.96±0.16mg/L,最高时可达到12.2±0.71mg/L。经过282d的培养,大菱鲆体重由30.43±0.42g达到1103.73±19.00g,日增重率平均为1.24±0.14%,整个实验期间大菱鲆均处于快速生长状态。至实验结束时,养殖密度最终达到33.99±0.59kg/m3。养殖水体中,pH变化范围在7.62～8.03之间,平均pH为7.76±0.05。COD变化范围在0.75～1.85mg/L,平均COD为1.04±0.16mg/L。亚硝酸盐浓度1.27～7.23μg/L之间,平均浓度在3.23±0.21μg/L。氨氮浓度一般维持在0.07～0.28mg/L,平均浓度为0.14±0.02mg/L。硝酸盐浓度在0.39～0.69mg/L之间,平均浓度为0.51±0.02mg/L。COD、pH、亚硝酸盐浓度很低,均在渔业水质标准所规定的范围以内。     

红鱼粉饲料中添加海洋红酵母对大菱鲆生长性能的影响

为研究用红鱼粉替代白鱼粉,并在替代饲料中添加两个不同梯度海洋红酵母对大菱鲆生长性能、体成分以及形体指标的影响。试验用白鱼粉、红鱼粉、海洋红酵母1 g／kg＋红鱼粉、海洋红酵母2 g／kg＋红鱼粉4种等氮等能的试验饲料分别饲喂初始体质量（213．48±0．23） g的大菱鲆,480尾试验鱼随机分为4组,每组设3个重复,每个重复40尾,试验期为6周。试验结果表明,与红鱼粉组相比,海洋红酵母1 g／kg＋红鱼粉组可显著提高大菱鲆的摄食率、相对质量增加率、特定生长率及蛋白质效率（P＜0．05）,效果与白鱼粉组相当,高于海洋红酵母2 g／kg＋红鱼粉组,但差异不显著（P＞0．05）。各试验组大菱鲆的体成分和形体指标差异不显著（ P＞0．05）。据此,添加海洋红酵母1 g／kg即能显著提高大菱鲆对红鱼粉替代白鱼粉饲料的摄食率、蛋白效率和生长性能,使得红鱼粉替代组的饲料性能达到了白鱼粉组的生长水平。     

大菱鲆抗菌肽基因酵母表达载体的构建及表达

将大菱鲆（Scophthalmus maxinus）hepcidin基因成熟肽序列经过部分改造后采用PCR方法克隆到毕赤酵母胞内表达载体pGAPZB中,构建了重组胞内表达载体pGAPZB—tbhep6his。用BlnI线性化重组质粒后,电击转化毕赤酵母SMD1168。经过Zeocin筛选和PCR扩增转化子基因组筛选,得到了数株基因工程酵母菌。通过SDS—PAGE和Western blot鉴定,发现目的蛋白与预期蛋白的分子量相吻合,并能与特异抗体antihis特异性结合,表明大菱鲆抗菌肽hepcidin基因在酵母菌中进行了表达。大菱鲆抗菌肽酵母表达载体的构建和表达为进一步研究该抗菌肽的功能并开发新型鱼类饵料奠定了理论基础。     

神经型一氧化氮合酶在大菱鲆脑组织中的分布及定位

[目的]探明神经型一氧化氮合酶(nNOS)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)脑组织中的分布情况,为揭示大菱鲆脑组织中一氧化氮(N0)的生理功能提供形态学资料.[方法]分别采用NADPH-d组织化学染色法和免疫组织化学法对大菱鲆脑组织中的nNOS进行定位研究.[结果]NADPH-d组织化学染色结果显示,大菱鲆大脑皮质中有蓝色的神经元和神经纤维存在.神经元呈梭形、锥形等形状,神经纤维呈串珠状且无序交织;小脑中NOS阳性神经元在分子层分布稀疏,在颗粒层分布密集,浦肯野细胞胞核淡染.经免疫组织化学法染色后,可观察到大脑皮质中nNOS免疫组化反应阳性物质呈深棕色;小脑皮质的分子层、颗粒层及浦肯野细胞层均有nNOS阳性神经元分布,浦肯野细胞呈免疫组织化学阳性反应.[结论]大菱鲆脑组织中的NOS类型主要限于nNOS,且nNOS在神经活动中发挥重要作用,也进一步证实N0在不同物种中具有一些共同的作用,但不同物种或相同物种不同组织中NO分布及含量存在差异.     

12种中草药对大菱鲆幼鱼的诱食效果研究

[目的]研究12种中草药对大菱鲆幼鱼的诱食效果,为斑马鱼人工配合饲料的研制提供参考。[方法]以200尾平均体长为3cm,体重为1 g,60日龄的大菱鲆幼鱼为试验对象,选用丁香、肉桂、八角、山萘、薄荷、黄连、黄柏、黄岑、栀子、苦参、乌梅、诃子肉等12种中草药,以2‰添加量分别加入到基础饵料中,进行单方筛选试验,并根据单方试验结果选取诱食效果较好的中草药进行梯度试验和两两组合试验,分析不同中草药对大菱鲆幼鱼的诱食效果。[结果]苦参、栀子、黄岑和山萘的诱食效果较好;4种中草药梯度试验结果表明,2‰栀子、5‰苦参、5‰黄岑和2‰山萘对大菱鲆幼鱼诱食效果最好;在复方试验中,2‰栀子与苦参混合物对大菱鲆幼鱼的诱食效果最好。[结论]对大菱鲆幼鱼的诱食效果与中草药种类和浓度相关。     

用饲料酵母替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长及免疫机能的影响

分别用质量分数为0、15%、30%、45%、60%的饲料酵母替代饲料中0、17%、34%、51%、68%的鱼粉,配制成5种等氮、等能的试验饲料,分别记为Ⅰ（对照组）、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组。将195尾大菱鲆Scophthatmus maximus（9.02 g±0.15 g）随机分为5组,每组设3个重复,每个重复组放养13尾鱼。将试验鱼饲养于设有循环流水系统的水族箱（60 cm×40 cm×50 cm）中,用5种饲料投喂,每天投喂3次,投饲率为鱼体质量的3%～4%,以生长及免疫指标来评价饲料酵母替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长的影响。经过56 d的饲养,结果表明：Ⅱ组的增重率（275.30%）和特定生长率（1.91%/d）最高,但与对照组（235.66%、1.82%/d）无显著差异（P〉0.05）;Ⅱ组的饲料系数（1.34）最低,但与对照组（1.53）无显著差异（P〉0.05）;Ⅱ组（97.44%）和Ⅳ组（94.87%）的成活率均显著高于对照组（84.62%）（P〈0.05）,而Ⅴ组的成活率（74.36%）则显著低于对照组（P〈0.05）;鱼体的粗蛋白含量随着饲料酵母替代比例的增加而逐渐降低（P〈0.05）,粗灰分则逐渐升高（P〈0.05）;溶菌酶、超氧化物歧化酶和血浆中蛋白的含量随着替代比例的增加而减少,且当饲料酵母替代比例超过51%时,与对照组差异显著（P〈0.05）。综合考虑大菱鲆的生长指标、形体指标、鱼体成分和免疫机能等因素,要获得最佳的养殖效益,大菱鲆幼鱼饲料中用饲料酵母替代鱼粉的比例以17%为宜。     

硒对铜胁迫下大菱鲆幼鱼生长、抗氧化能力及相关基因表达的影响

为探讨硒对铜胁迫下大菱鲆幼鱼生长、抗氧化能力及相关基因表达的影响,以初始体质量为(24.85±0.10) g的大菱鲆为研究对象,通过在饲料中添加五水硫酸铜和亚硒酸钠,配制铜、硒含量分别为(0、0,1 000、0,1 000、2,1 000、4 mg/kg) 4种等氮等能的实验饲料,命名为D1、D2、D3和D4组。养殖实验持续84 d。结果显示:①各组间实验鱼成活率无显著差异;增重率、特定生长率和蛋白质效率均在D2组显著低于D1、D3和D4组;摄食率和饲料系数呈相反趋势,在D2组显著高于其他3组。②幼鱼全鱼和肝脏粗脂肪含量呈先下降后上升趋势;而背肌粗蛋白和粗脂肪含量在各组之间无显著性差异。全鱼、脊椎骨和肝脏中Cu含量在D2组达到最高值;Zn含量则在D4组达到最高值;肝脏中铁含量呈下降趋势,在D3和D4组显著低于D1和D2组。③D2组显著降低了幼鱼血清总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;丙二醛(MDA)含量则呈相反趋势,在D2组显著高于D3和D4组;总超氧化物歧化酶(T-SOD)和铜—锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性均在D4组达到最低值。④血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性均在D2组显著高于其他3组;而血糖浓度、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)活性均在D2组达到最低值,显著低于D1组。⑤肝脏金属硫蛋白(MT) mRNA相对表达量在D4组达到最高值,显著高于其他3组;谷胱甘肽转移酶(GST)和溶菌酶(LZM) mRNA相对表达量均在D2组显著低于其他3组;热休克蛋白70 (HSP70) mRNA相对表达量则在D2组显著高于其他3组。综上所述,在本实验条件下,饲料中添加硒(2～4 mg/kg)可缓解高铜(1 000 mg/kg)胁迫导致的鱼体生长缓慢等症状,并可调控鱼体的抗氧化能力、生理代谢及相关基因表达量,进而对鱼体在高铜胁迫下的内环境稳态恢复具有一定的促进作用。