细胞松弛素B浓度对小鼠卵母细胞去核效果的影响

目的　探讨细胞松弛素 B浓度对小鼠卵母细胞去核效果的影响。方法　常规超排 KM小鼠获卵母细胞 ,将有明显第一极体的卵母细胞放入含有 5× 10 - 3、1× 10 - 2 、2× 10 - 2 g/ L CB的成熟培养液中孵育 15 min,采用盲吸法去核 ,去核后的卵母细胞放入含 5× 10 - 3g/ L Hoechst33342的成熟培养液中染色 15 min,在荧光显微镜下检查去核的效率。结果　 CB组去核率可达 88.2 % ,而对照组去核成功率仅达 2 9.7% ,两者的去核效果统计学上有显著差异 ;同时 CB的浓度过高会影响去核的效果 ,使卵母细胞的破溃率升高。结论　 CB有利于去核 ,同时卵胞膜可以借助磷脂双层的游动性而很快得到修复 ;高浓度的 CB对卵胞膜作用过于强烈 ,细胞骨架严重破坏 ,磷脂双层结构的弹性和粘性减弱 ,修复能力降低 ,影响胚胎的构建。     

Optimal chemical triploid induction in geoduck clams, Panopea abrupta, by 6-dimethylaminopurine

The development of geoduck culture techniques coupled with increased market demand during the past decade led to cultured intertidal geoduck beds, over which concerns have arisen regarding the potential genetic risk posed by the reproductive contribution of hatchery outplants to wild stocks. Although an ongoing study to determine the genetic stock structure of Puget Sound geoducks has yet to yield definitive results, sterile triploids would enable geoduck culture to proceed irrespective of any genetic differences found, and may increase rate of growth. At 15 °C and salinity of 30‰, we evaluated the suitability of cytochalasin B (CB) and 6-dimethylaminopurine (6-DMAP) for triploid induction in geoducks. Parallel tests of induction agent, start time, duration, and concentration were conducted on the same gamete pool. We found optimal triploid induction (92%) and suitable survivorship (30%) resulted from a 600 μM 6-DMAP treatment. This work enables the future examination of the efficacy of triploid induction for conferring sterility and increasing growth rate in this commercially valuable species.     

雀鹰耳蜗核的定位及形态学的研究

向非鸣禽雀鹰（Ａｃｃｉｐｉｔｅｒｎｉｓｕｓ）的耳蜗内注入ＣＢ—ＨＲＰ溶液，结果发现在同侧的听神经内有许多的标记纤维；同侧的角状核及巨细胞核内有较密集的标记终末。表明由耳蜗神经元发出的纤维组成听神经后，分别投射到耳蜗核的两对亚核，即角状核和巨细胞核。尼氏染色法表明，角状核和巨细胞核有不同的核团形态和细胞组成。提示这两对耳蜗亚核可能具有不同的听觉和定向功能。     

CB·氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养中的作用

[目的]研究CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中的作用,为优化相关技术体系提供依据。[方法]卵母细胞经体外成熟培养,采用不同孤雌激活方法(Ele.+CB组、CB组、Ele.组、对照组),研究CB在激活中的作用。激活后采用PZM3培养液,并去除氨基酸成分,探索氨基酸对体外培养胚胎的作用。[结果]CB+Ele.组的卵裂率显著地高于其他3组(P<0.05),囊胚率为32.7%,囊胚细胞数为61.4,而其他3组均未出现囊胚。电激活(脉冲电压100 V/mm,脉冲时程100μs,脉冲次数1次)联合CB处理,可激活卵母细胞体外发育至囊胚,CB有助于提高卵裂率、囊胚率。添加氨基酸的培养液中的卵母细胞的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数显著提高(P<0.05),表明氨基酸能提高猪孤雌激活胚胎培养效果。[结论]添加CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中能提高胚胎的培养效果。     

钙结合蛋白(CaBP)对牛黄成核时间与核生长的影响

为了解钙结合蛋白(CaBP)在牛黄形成中的作用,将正常牛胆汁分为6组,Ⅰ组为对照组,不加入CaBP,其余5组为试验组,均加入CaBP(CaBP提自健康牛胆汁);试验组额外加入CaBP的浓度分别为5%、10%、15%、20%、25%.然后,进行成黄试验,观察不同浓度的CaBP对牛黄核形成时间、形成数量及其可视表面积的变化.与此同时,检测胆汁中主要成黄物质的含量变化.结果表明,CaBP对牛黄成核时间有较明显的促进作用,而对牛黄核的数量和可视表面积无明显影响;当添加CaBP浓度大于10%时,使胆汁中总蛋白和Ca~(2+)浓度降低,但对总胆红素含量无明显影响.     

鸡腔上囊传出神经元的分布——用CB—HRP法研究

将CB—HRP注入鸡腔上囊壁内,支配腔上囊的神经元被标记。支配腔上囊的长轴突型交感节前神经元在胸7—腰荐3(简称T_7—LS_3)髓节的Terni氏柱内,主要位于LS_1—LS_2髓节。在LS_8—LS_(11)髓节中央管背侧和背外侧区有大量标记细胞,主要集中于LS_8髓节,这些标记细胞是支配腔上囊的副交感节前神经元,其轴突大部分行经同侧盆神经到达腔上囊,少数行经对侧的盆神经到达腔上囊。腔上囊的交感节后神经元位于T_6—L_(13)交感干神经节和肾上腺神经节,交感干的标记细胞集中位于LS_9—LS_(11)和LS_2—LS_3。副交感节后神经元位于盆神经和泄殖腔神经节内。在肠神经内有大量的标记细胞。     

中国荷斯坦牛PIK3CB基因多态性及其与繁殖和产奶性状的关联分析

【目的】 探究磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位β（PIK3CB）基因多态性及其与中国荷斯坦牛繁殖和产奶性状的关系。【方法】 通过混池测序对中国荷斯坦牛PIK3CB基因进行单核苷酸多态性（SNP）位点筛选,采用竞争性等位基因特异性PCR （KASP）技术在1 160头健康泌乳中国荷斯坦牛中进行SNP分型并进行群体遗传学分析,采用线性模型进行SNP与11个繁殖和产奶性状基于单位点和单倍型组合的关联分析。【结果】 在PIK3CB基因中共检测到了17个SNPs,筛选出7个SNPs用于后续分析。关联分析发现,7个SNPs与多个目标性状存在显著或极显著的关联（P<0.05;P<0.01）;位于外显子区域的g.130433743 A>G位点AA基因型个体和位于可变剪接区域的g.130448069 G>A位点GG基因型个体,其经产牛首末次配种间隔、产奶量、乳蛋白量和乳脂量最低,体细胞评分最高,上述基因型个体具有较短的首末次配种间隔,而产奶性能相对较差;g.130387717 G>A位点AA基因型个体,其初配日龄和青年牛首末次配种间隔最低,产奶量、乳蛋白量和乳脂量最高,该基因型个体的繁殖和产奶性能均较好,上述3个SNPs位点可作为中国荷斯坦牛繁殖和产奶性状的候选位点重点关注。单倍型分析发现,PIK3CB基因的g.130387717 G>A、g.130430832 A>－、g.130433743 A>G、g.130433982 C>T、g.130446073 C>T和g.130448069 G>A 6个SNPs紧密连锁形成一个单倍型块,且与多个目标性状存在显著或极显著关联（P<0.05;P<0.01）,其中H2H3和H2H4单倍型组合个体的繁殖和产奶性能较好,为优势单倍型组合。【结论】 中国荷斯坦牛PIK3CB基因存在丰富的遗传变异,其多态性与繁殖和产奶性状存在关联,g.130433743 A>G、g.130448069 G>A和g.130387717 G>A位点可作为潜在分子标记,为中国荷斯坦牛的平衡育种提供理论依据。     

三重测交法在玉米群体改良中的应用研究

据前人所介绍的三重测交法(TTC)的基理与方法,以综合种群体代替原设计中的F_2代,以此检测一玉米优良综合种的21个数量性状的遗传分量,结果表明,在14个性状中,有非等位基因互作存在。其中穗粗行粒数同时存在着只三类互作分量:另外9个性状的上位性分量为i+1类;剩下3个性状则主要为i类上位性分量。在除粒深外的20个性状中,都发现了加性遗传分量(D);而显性分量(H)仅在15个性状中存在;在绝大多数性状的遗传变异中,D的作用较大,H次之、通过对显性基因中的增、减效基因的分布和相对频率的探测,发现多数性状的有利基因呈双方向分布、     

氯苯在人工回灌过程中的迁移规律研究

为控制区域地面沉降,计划开展相应的地下水人工回灌,但在拟采用的回灌水源中监测到氯苯等有机组分,因而确定回灌过程中氯苯的环境行为是十分必要的。室内模拟人工回灌过程中氯苯的迁移及氯离子示踪实验,实验结果表明,从回灌点至模拟柱两侧水流速度和渗透系数降低,阻滞系数变大;距回灌点由近及远氯苯浓度依次升高,稳定峰值逐渐降低,对称取样孔中水流下游的峰值高于上游;模拟回灌中存在氯苯的生物降解作用并伴随着Eh值的降低。     

细胞松弛素B对猪卵母细胞去核的影响

适宜的细胞松弛素B(CB)浓度可提高卵母细胞的成功去核率。将有明显第一极体排出的卵母细胞放入含有3.5×10-3、5×10-3、6.5×10-3、7.5×10-3mg.ml-1CB的NCSU37成熟培养液中孵育30min,采用盲吸法去核,将去核后的卵母细胞置入含5×10-3g.ml-1的Hoechst33342培养液中染色15min,用荧光显微镜检验去核率。结果表明:CB处理组去核率显著高于对照组(P<0.05)。不同浓度梯度处理组中,CB浓度过低(3.5×10-3mg.ml-1)或过高(7.5×10-3mg.ml-1)都使去核成功率(54.44%,51.46%)下降,溃破率(28.21%,34.11%)增高,与5×10-3、6.5×10-3mg.ml-1组的去核成功率(75.83%,73.83%)、溃破率(9.86%,11.62%)差异显著(P<0.05),且5×10-3mg.ml-1组的去核成功率高于6.5×10-3mg.ml-1组,差异不显著(P>0.05)。证明5×10-3mg.ml-1浓度的CB有利于第一极体和核质的吸出,同时可降低细胞膜撕裂,胞质破溃流出,获得较高的去核效率。