红鳍东方鲀3个白介素基因的序列特征及表达分析

本试验分析体质量(190.34±2.13)g的红鳍东方鲀白介素基因IL-1b、IL-8和IL-10的序列特征,检测其在红鳍东方鲀脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏和脾脏中的表达,以及每尾红鳍东方鲀注射密度1×107 cfu/mL的哈维氏弧菌菌液0.1 mL后0、12、24、48 h在肝脏和脾脏中的表达.试验结果表明,IL-1b、...     

不同游泳运动对菊黄东方鲀非特异性免疫的影响

通过水槽实验法,观察了菊黄东方鲀的游泳行为,测量了其爆发游速及临界游速,同时观察了鱼体过氧化氢酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶等的活性变化,分析了游泳对菊黄东方鲀免疫力影响,为菊黄东方鲀的健康养殖及科学的增殖放流提供参考。结果表明:体长在（18.1-19.8）cm的菊黄东方鲀的临界游速在45-62cm/s,体长在（18.8-20.6）cm的菊黄东方鲀的爆发游速为（58.5-78.2）cm/s;与对照组相比,爆发游速实验组菊黄东方鲀肝脏过氧化氢酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶的活性均高于对照实验组菊黄东方鲀（P?0.05）;临界游速实验组菊黄东方鲀溶菌酶高于对照组（P?0.05）,血液中的超氧化物歧化酶和肝脏过氧化氢酶的活性没有显著变化(P>0.05)。研究表明,急性应激反应对超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、溶菌酶的活性影响较大。     

饲料糊精水平对暗纹东方鲀幼鱼生长、消化酶活性和血液生化指标的影响

配制等蛋白质(42%),等脂肪(9%),糊精水平分别为10%、15%、20%、25%、30%的5组饲料,饲养暗纹东方鲀幼鱼[初始体质量为(10.25±0.51)g]60 d,考察饲料中不同糊精水平对其生长、消化酶活性和血液生化指标的影响。结果发现,随着饲料糊精水平的升高,暗纹东方鲀幼鱼的特定生长率和饲料效率先增加后降低,25%组最高,并显著高于10%和15%组。30%组鱼的脏体比和肝体比显著高于10%组,同时其肝脂肪含量也显著高于其他组。10%组的肝糖原和血浆总氨基酸含量显著低于其他组。10%和15%组鱼的肝胰脏和肠道中淀粉酶活性显著低于其他实验组,而其肝胰脏中胰蛋白酶活性显著高于30%组。25%和30%组的血浆总胆固醇和甘油三酯含量显著高于10%和15%组。10%和15%组的血浆尿素氮含量显著高于其他实验组。15%和20%组的血细胞数量显著高于其他实验组。30%组的细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)含量显著高于其他实验组。饲料糊精水平对暗纹东方鲀幼鱼的血糖含量、血浆谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性及肝胰脏和肠道中脂肪酶活性无显著影响。在本实验条件下,暗纹东方鲀幼鱼饲料中糊精的适宜水平为20%～25%。     

暗纹东方鲀几种组织中可培养细菌的组成分析

采用16S rDNA特征序列PCR-DGGE法,分析了不同饵料饲养的暗纹东方鲀的表皮、肠道和河鲀毒素累积组织(肝和卵巢)中可培养细菌的群落组成.根据分子系统发育分析,共鉴定出45种可培养细菌,在这些细菌中,以变形细菌的gamma亚群占多数,其它分别隶属于低GC含量革兰氏阳性菌和高GC含量革兰氏阳性菌.摄食不同饵料的暗纹东方鲀,其肠道、表皮或河鲀毒素累积组织中的细菌菌落组成是不同的,但不管是摄食人工配合饲料或天然饵料,在暗纹东方鲀的肠道、表皮或河鲀毒素累积组织中,均发现已有报道的可产河鲀毒素的细菌类群,表明饵料来源对暗纹东方鲀的河鲀毒素产生不是必需的.     

低温诱导红鳍东方鲀雄性化及性腺分化的组织学观察

为探索无需紫外线照射、无需投喂性激素、操作简单的低温诱导红鳍东方鲀Takifugu rubripes雄性化的新方法,分别在孵化后15、45、75d将鱼苗进行15℃和17℃低温处理65d,以正常培育温度21℃为对照组,设置平行试验组,并对其性比及性别分化的组织学进行了观察。结果表明:(1)在15℃条件下,试验组雄性率最高可达(74.70±2.79)%;在17℃条件下,试验组雄性率最高为(59.60±3.49)%;在21℃条件下,对照组雄性率为(51.57±0.06)%;温度与雄性率呈负相关(R=-0.827),与雌性率呈正相关(R=0.823)。(2)在21℃条件下,对照组孵化后48d时出现卵巢腔,标志着卵巢分化的开始,68d时生殖腺柄部出现裂缝状的输精管原基,标志着精巢开始分化;在17℃条件下,试验组孵化后63d时观察到明显的卵巢腔,83d时出现输精管原基性腺;而在15℃条件下,试验组孵化后73d时出现明显卵巢腔,93d时出现精小叶,标志组织学上的分化。研究表明,随着处理温度的升高,性腺中细胞分裂速度呈线性关系,在一定范围内升温有助于性腺的发育。     

红鳍东方鲀生长性状的遗传力估计及性状间相关关系的初步研究

为估计红鳍东方鲀Takifugu rubripes生长性状的遗传力及生长性状间的相关关系,构建了5个全同胞家系,测定了210日龄(504尾)和360日龄(500尾)红鳍东方鲀的体质量、体长和体全长等生长性状的表型值,构建固定模型,用全同胞法估计了210日龄和360日龄红鳍东方鲀的体质量、体长和体全长3个生长性状的遗传力。结果表明:红鳍东方鲀的体质量、体长和体全长3个生长性状的遗传力估计值在210日龄时分别为0.54、0.38、0.52,在360日龄时分别为0.46、0.37、0.44,这3个性状的遗传力属于中等和高等遗传力;体质量与体长,体质量与体全长,以及体长与体全长的遗传相关系数在210日龄时分别为0.99、0.99、0.98,在360日龄时分别为0.97、0.97、0.96,这3个性状之间的遗传相关呈高度正相关;测定了102日龄(296尾)红鳍东方鲀的体质量、体长和体高3个生长性状,利用回归模型建立了体质量(W)与体长(L)和体全高(H)的数学模型为W=e-8.513L2.046H0.742(R2=0.903)。本研究结果可为红鳍东方鲀的遗传育种研究提供参考。     

盐度对暗纹东方鲀胚胎发育的影响

研究了不同盐度对暗纹东方鲀胚胎发育的影响，盐度为4和8的试验组中受精卵的发育历期、孵化率及初孵仔鱼24小时的存活能力和淡水相比均无显著差异。在盐度12及以上，绝大部分受精卵死亡，仅有极少数个体孵化出膜，且全为畸形并都在24小时内死亡；发育速度随着盐度的升高而变慢。因此，暗纹东方鲀胚胎正常发育所能耐受的盐度范围是0～8。     

菊黄东方鲀当年鱼种养殖阶段消化酶活性研究

为了研究池塘养殖菊黄东方鲀（Takifugu flavidus）鱼种生长及肠组织中消化酶活性随生长的变化,2012年5－11月进行室外养殖试验,池塘面积0.2 hm2,水深1.5～2.0 m,鱼苗体长1.2~1.5 cm,放养密度为22.5 万尾/hm2,试验用海水盐度5~15,水温为15~35℃,pH 8~9;测定当年鱼种不同生长阶段的体长、体质量、肝重、肠长等生长指标,通过生物化学方法测定了其肠组织主要消化酶活性。结果表明,菊黄东方鲀幼鱼体长、体质量与养殖天数均呈指数相关（L=27.07e0.0088t, W=1.0982e0.0262t）;体长与体质量呈幂函数增长相关（W=3×10-5L3.1070）,且为异速生长。不同生长阶段菊黄东方鲀肝体比、比肠长、肥满度的变化显著（P<0.05）;肝体比随生长呈显著上升趋势（P<0.05）,变化范围为4.15%~20.23%;比肠长则呈显著下降趋势（P<0.05）,变化范围为0.97%～2.33%,不同生长阶段肥满度变化为3.99%～5.11%。菊黄东方鲀肠组织碱性蛋白酶和淀粉酶活性均随生长呈显著降低趋势（P<0.05）,最大值均出现在养殖40 d（83.11 U/mg与3.13 U/mg）;酸性蛋白酶活性呈先下降、后上升趋势（P<0.05）,最小值（0.34 U/mg）与最大值（0.86 U/mg）分别出现在113 d和166 d;脂肪酶活性随生长变化不显著（P>0.05）。研究表明,菊黄东方鲀鱼种的生长与养殖条件的改变存在密切关系;肝体比、比肠长等与鱼的发育及营养摄入存在一定关系;肠组织不是生成蛋白酶和淀粉酶的主要器官。     

水解单宁对暗纹东方鲀摄食偏好、消化代谢和抗氧化能力的效应

为了解菜粕替代鱼粉后单宁的作用,配制4组等氮等能饲料饲喂初重(39.84±3.09) g的暗纹东方鲀8周。以含43%鱼粉的实用基础饲料T0为对照;另设置3个不同的鱼粉用量组,用酪蛋白平衡蛋白质含量,并添加0.25%(T1)、0.75%(T2)和1.25%(T3)的水解单宁,使酪蛋白:水解单宁≈菜粕中蛋白含量:菜粕中单宁含量=16.8∶1。结果显示,随饲料中水解单宁添加量的增加,增重率呈上升趋势,饲料系数显著下降;肌肉粗脂肪含量T2组显著高于T0及T1组,对照组氨基酸水平显著高于其他组。肝脏抗氧化指标中,T0组过氧化氢酶(CAT)活力显著低于其他组,总抗氧化能力(T-AOC)则显著高于其他组,T3组丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于其他组。血清抗氧化指标中,3个单宁组MDA含量均显著高于对照组,过氧化氢酶(CAT)活力显著下降。随饲料中水解单宁添加量的增加,血清谷丙转氨酶(ALT)活性先升后降,与肝脏中趋势一致;T1组白蛋白(ALB)含量高于T0及T3组,显著高于T2组,T1组总蛋白(TP)含量高于T0组,显著高于T2及T3组。T1及T2组肠道淀粉酶活性显著高于T0组,胃和肠道中的蛋白酶活性随水解单宁添加量的增加显著上升,胃脂肪酶活性显著下降。T3组苦味受体T2R1表达量在舌尖和肠道均显著高于对照组;肝脏热休克蛋白HSP70表达量T0组显著高于T3;摄食偏好实验中,驯化前暗纹东方鲀摄食偏好随水解单宁添加量的增加显著下降,驯化8周后,4组实验鱼对T2饲料的偏好程度均显著高于T0,T0饲料高于T1和T3组。研究表明,添加1.25%及以下水解单宁对暗纹东方鲀生长无负面影响,一定程度上对饲料有节约作用;添加水解单宁会改变鱼体对蛋白质、脂肪和糖类的消化及蛋白质合成代谢,添加量在1.25%时会损伤抗氧化能力和抗应激能力;用含有水解单宁的饲料驯化暗纹东方鲀可显著提高其对水解单宁添加量为0.75%的饲料的偏好程度,并提高对苦味的接受能力。     

暗纹东方鲀不同养殖模式下的微生物群落结构

为探究暗纹东方鲀不同养殖模式下环境及肠道的细菌群落结构特征,实验采用Illumina Miseq高通量测序方法对传统养殖与立体种养2种模式下水体、底泥及暗纹东方鲀肠道细菌的16S rRNA的2个高变区(V3～V4)进行测序分析,利用冗余分析(redundancy analysis,RDA)方法来分析水体菌群与环境因子的...