正十六烷微生物降解酶的定域和酶促降解性

以正十六烷为研究对象,通过室内实验,利用细胞静息技术提取了2株菌种的胞外酶、膜周酶及膜内酶对石油烃类污染物质的微生物降解酶定域,并研究了菌株受环境影响的产酶条件和酶的一般性质. 结果发现:蜡状芽孢杆菌DQ01能降解正十六烷的关键酶位于膜周和膜内,芽孢杆菌DQ02降解正十六烷的关键酶是胞外酶和膜内酶. 通过GC-MS对代谢产物进行测定发现,关键酶对十六烷的代谢途径是常见的单末端氧化. 2株菌种产酶的最佳环境条件:ρ(正十六烷)为100 mg/L,c(鼠李糖脂)为2 mmol/L. 另外,关键酶在pH为6.5～8.0的环境中活性较高,在pH为7.0左右时的活性最高. 酶促降解性的最适温度为30 ℃.      

正十六烷微生物吸附降解的荧光显微研究

使用激光扫描共聚焦显微镜（CLSM）系统,以罗丹明123（Rhodamine123）为荧光探针,定量研究了石油组分正十六烷在石油降解菌（大庆油田石油污染土壤中的优势菌种,革兰氏阴性G^-、黄杆菌属Flavobacterium）细胞膜上的吸附降解动态变化过程。研究发现：微生物培养体系加入正十六烷120s后,正十六烷在菌株膜上的浓度变化在不断增大,呈现出不规则的锯齿状攀升;在攀升过程中,峰谷之间出现明显有“节奏”的振荡传递;在0～508内,正十六烷处于吸附运输的加速阶段;在50—120s内,正十六烷不断被吸附并累积于细胞膜表面,处于吸附积累阶段,使用幂指数定律建立该微生物膜上的正十六烷的动力学方程,确定其动力学级数为2级,微生物降解正十六烷的速率常数为6×e^-5。