发作性运动诱发运动障碍的家系与临床

目的：分析发作性运动诱发运动障碍（PKD）的遗传和临床特点。方法：总结8例PKD患的家系和临床燃料。结果：PKD发作年龄多在10-25岁，以突然运动时发生短暂的随意运动障碍为主要表现，持续时间常小于1min，意识清醒，脑电图、头颅MRI等检查正常，卡马西平治疗有效。有家族史的患呈现常显性遗传特点。结论：PKD呈良性病程，但频繁发作对患仍具有危险性，需要鉴别治疗。     

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠海马CA1区胆碱乙酰转移酶的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对血管性痴呆(VaD)大鼠海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的影响。方法将经行为学筛选合格的Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、VaD组、EPO侧脑室注射+VaD组(E1组)和EPO腹部皮下注射+VaD组(E2组),采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法建立VaD模型。通过免疫组织化学和RT-PCR方法检测VaD大鼠海马CA1区ChAT蛋白含量以及ChAT mRNA表达水平的变化。结果 EPO能明显改善VaD大鼠认知功能障碍,上调海马CA1区ChAT表达。结论 EPO可能通过增加VaD大鼠海马区ChAT表达改善其认知功能障碍。     

PCR扩增抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因

目的：获得抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因。方法：从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,逆转录形成cDNA,用扩增小鼠K轻链可变区基因的引物,通过RT－PCR方法,扩增基因,1．5％琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果：用轻链引物扩增获得340bp的基因片段。结论;从三株杂交瘤细胞中获得高纯度的总RNA;用RT－PCR方法从一株杂交瘤细胞成功克隆了抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因,为基因工程抗体研究奠定了良好基础。     

小血管病性血管性认知障碍非痴呆型患者神经心理学特征的研究

目的通过系列神经心理学测试对小血管病性血管性认知障碍非痴呆型(VCIND-SVD)患者的神经心理学特征进行分析,寻找适用于VCIND-SVD患者的敏感且简捷的神经心理评估工具。方法VCIND-SVD患者33例,正常对照组40例,进行MMSE及多个包括5个认知域在内的神经心理学测试,确定VCIND-SVD患者受损的认知域,筛选出识别能力较好的单项测试,检测其敏感度和特异度,以便临床使用。结果VCIND-SVD患者为多个认知域损害,包括记忆力、注意力、语言功能、视空间结构技能及执行功能均有损害;即刻逻辑记忆测试、积木测试、伦敦塔完成时间及计划时间等检测项目能敏感反映这些损害。结论各单项测试的综合对VCIND-SVD具有较强的识别能力,有重要的应用价值。     

肢带型肌营养不良症一家系10例报告

肢带型肌营养不良 (ＬＧＭＤ)又称Ｅｒｂ型肌营养不良 ,是一种少见的常染色体隐性遗传性肌病 ,而常染色体显性遗传更少见 ,现报道一家系 10例呈常染色体显性遗传患者如下。1　临床资料1.1　先证者　女 ,2 8岁 ,农民。四肢先后进行性无力 10多年而于 2 0 0 1年 4月 2 7日入院。患者 12岁始感觉右上肢上举无力 ,14岁时出现左上肢上举无力 ,梳头困难。症状缓慢加重 ,4年后感双下肢无力 ,双大腿明显变细。查体 :血压18/ 10ｋＰａ ,智能正常 ,颅神经无异常 ,前臂、上臂和手部肌肉无明显萎缩 ,肌张力低 ,双上肢上举不能过肩。岗上肌和肩胛肌群萎缩…     

抗鸡蛋黄IgY单克隆抗体的制备和初步鉴定

以纯化的鸡蛋黄IgG(IgY)为免疫原,免疫BACB/c小鼠.取其脾细胞与小鼠Sp/o骨髓瘤细胞融合,经间接EIISA筛选,3次克隆化后,获得2株能稳定分泌抗IgY单克隆抗体的杂交瘤细胞IGII和3A6.用琼脂双扩散法鉴定,两者均为IgG_1亚类.特异性鉴定表明,IGII和3A6两株单克隆抗体均与鸡血清IgG及鸡蛋黄IgG起强反应,而不与鸭蛋黄、鹌鹑蛋黄、小鼠血清、大鼠血清、兔血清、羊血清、马血清,以及人血清的IgG起反应.IGII与3A6的腹水效价分别为3.1×10~(-6)和6.4×10~(-6).     

三种染色方法用于检测聚丙酰胺凝胶中蛋白质的比较

用考马斯亮蓝染色、银染色、铜染色三种方法对同一种蛋白质的灵敏度、快速性进行比较,得出三种蛋白质染色方法的优缺点,为蛋白质电泳染色合理选用不同方法提供依据。     

牛碱性成纤维细胞生长因子cDNA的克隆及其酵母重组表达质粒的构建

根据已有资料设计并合成引物，利用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到牛ｂＦＧＦｃＤＮＡ全序列，经过序列分析后，建立其酵母分泌型表达质粒ｐＶＴ１０２Ｕ／ａ－ｂｂＦＧＦ。     

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠模型海马神经细胞凋亡的影响

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对血管性痴呆(VaD)模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法:将经行为学筛选合格的Wistar大鼠分为假手术组、VaD组、EPO组,采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法建立VaD模型。应用TUNEL染色检测大鼠海马的凋亡细胞数;通过免疫组化学和RT-PCR方法,检测大鼠海马Bcl-2和Bax蛋白以及其mRNA表达水平的变化。结果:EPO能明显抑制海马神经细胞凋亡,上调Bcl-2表达,抑制Bax表达。结论:EPO可能通过调控VaD大鼠海马Bcl-2和Bax表达,从而抑制神经细胞凋亡。     

α- 突触核蛋白对内质网应激及细胞凋亡影响

目的：构建α- 突触核蛋白（α-synuclein,SNCA）和SNCA 突变基因（SNCAmu）过表达转染293T 细胞,观察内质网应激及细胞凋亡。方法：应用PCR 技术扩增目的基因并插入慢病毒载体质粒,重组质粒的构建及包装293T 细胞,转染24 h 后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的表达。MTT 法检测未转染的293T 细胞组（CON 组）、转染空质粒的293T 细胞组（NC 组）、转染SNCA 基因质粒的293T 细胞组（OE 组）和转染SNCAmu 基因质粒的293T 细胞组（OEm 组）,观察各组细胞病毒转染后不同时间（1、2、3、4、5 d）细胞增殖的情况。Western blotting 法测定SNCA 和SNCAmu 诱导caspase-12 的蛋白表达。结果：成功构建了pGC-FU-SNCA-GFP 和pGC-FU-SNCAmu-GFP 质粒及转染293T 细胞,CON 组、NC 组、OE 组和OEm 组不同时间的细胞增殖具有统计学意义,SNCA 和SNCAmu 可能诱导293T 细胞caspase-12 的蛋白表达。结论：SNCA诱导caspase-12 的内质网应激凋亡途径,可能是帕金森病致病机制之一。