排序方式: 共有71条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1.
2.
3.
含PR启动子的原核高效表达载体的构建及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
组建了一个仅含PR启动子的原核高效表达载体pRC,它同时含有cⅠ调控基因、多酶切位点和两个强的转录终止序列.现已成功地用于表达重组人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)、重组人白细胞介素-3(hIL-3)和抗溶菌酶(HEL)抗体Fd基因,表达量均占菌体总蛋白的36%以上.同时还研究了不同的宿主菌和原核增强子序列等因素对PR启动子载体表达的影响.此外,还比较了分别以PR、PL或PRPL作为启动子时表达hTNF-α的情况,结果表明,单用PR或PL启动子可获得与使用PRPL串联启动子一样的高效表达. 相似文献
4.
5.
龔嶽亭 杜雨蒼 黃惟德 陈常庆 葛麟俊 胡世全 蔣荣庆 朱尚权 鈕經义 徐杰誠 張偉君 陈玲玲 李鴻緒 汪猷 陆德培 季爱雪 李崇熙 施溥濤 叶蕴华 湯卡罗 邢其毅 《Acta biochimica et biophysica Sinica》1966,(2)
結晶的牛胰島素已經合成,它的生物活力,結晶形状都与天然胰島素的相同,因而标志着世界上第一个蛋白质的人工合成。在人工合成的A及B鏈分別都能和其对应的天然鏈組合成功并都得到半合成結晶胰島素的基础上,人工合成的A及B鏈組合所得的具有1.25—2.5%胰島素活力的氧化产物,經过两次酸性仲丁醇抽提,比活力上升到天然胰島素50%左右,在含有丙酮及鋅离子的pH6.2的檸檬酸緩冲液中、即得人工合成的牛胰島素結晶。除了用小白鼠惊厥法和兎血糖降低法所测定的生物活力以及其結晶形状均与天然胰島素完全一致以外,人工合成的結晶牛胰島素的电泳,层析行为都与天然胰島素相同,酶水解物的电泳层析双向图譜也与天然牛胰島素的一致。人工合成的結晶牛胰島素能和抗天然牛胰島素血清产生沉淀反应,其在琼脂双扩散皿上所产生的沉淀条紋与天然結晶牛胰島素和該抗血清所产生的条紋汇合。它与豚鼠抗天然胰島素血清中和后,生物活力即丧失,这說明在免疫化学性质上也和天然胰島素相同。 相似文献
6.
本文报道用化学和酶促相结合的方法合成了d-GGArATTCC和d-GGArATTC。酶促反应结果说明,当受体3′末端为核糖核苷时大大促进RNA连接酶的作用。产物的结构均经蛇毒磷酸二酯酶部分酶解后的电泳-同系层析双向图谱鉴定得到证明。这两种类似物都能被EcoRI限制性内切酶识别并在专一位置上水解,结果说明EcoRI的识别顺序中第四位上d-A变为r-A并不显著影响酶的识别,而且证明了EcoRI的最小底物是含有识别顺序的七聚脱氧核苷酸。 相似文献
7.
重组大肠杆菌高密度发酵研究进展 总被引:32,自引:0,他引:32
重组大肠杆菌的高密度发酵是提高基因工程产品产量的一个非常有铲的手段,是现代发酵工程研究的一个热点。本文就高密度发酵中影响重组大肠杆菌发酵产率的几个因素,包括宿主菌、培养基、培养条件、补料方法以及高密度发酵过程中存在的问题和对策加以讨论,着重探讨了高密度下大肠杆菌产生的有害代副产物--乙酸的产生机制、抑制作用机理,以及控制乙酸机累的技术方法。 相似文献
8.
胰岛素B链N-端八肽衍生物,卽cb·phe·val·asp(NH_2)·glu(NH_2)·(im-Bz)his·leu·(S-Bz)cys·gly·OC_2H_5,曾用cbz·(im-Bz)his·leu·OH与H·(S-Bz)cys·gly·OC_2H_5借DCCI缩合生成cbz·(im-Bz)his·leu·(S-Bz)cys·gly·OC_2H_5,然后经溴化氢的冰醋酸溶液脱去苄氧羰基后,依次与cbz·glu(NH_2)·ONP,cbz·asp(NH_2)·ONP,cbz·val·ONP和cbz·phe·ONP缩合生成。此外,该八肽衍生物还曾用cbz·phe·val·ONP和B_(3—8b)缩合或cbz·phe·val·asp(NH_2)·N_3和B_(4-8b)缩合生成。所得八肽经溴化氢的冰醋酸溶液脱去苄氧羰基后,能为氨肽酶完全消化。 相似文献
9.
利用细小RNA 病毒属脑炎和心肌炎病毒(EMCV)的内核糖体进入位点(IRES)元件构建了人肿瘤坏死因子受体75 基因(hTR75) 和新霉素抗性基因(neoR)的双顺反子表达载体, 通过电脉冲转染BHK21 细胞, 筛选出分别和同时稳定过量表达两种hTNF受体的细胞株。这些细胞在mRNA 和蛋白质水平均可检测到hTR75 的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的hTNFα突变体对这些细胞株进行测定, 发现过量表达的hTR75 可以独立地介导hTNFα对BHK21 细胞的细胞毒性, 而hTR55 的存在并不能显著增强这种作用。上述结果为进一步阐明TR75 的功能以及两种受体间的相互作用提供了一条新的途径。 相似文献
10.
前言 基因决定着生物的性状和遗传,它在生物学中的意义是不言而喻的。从化学上讲,基因是一段特定的具有生物功能的DNA顺序。因此,一旦知道了基因的结构以后,基因的合成也就被提上了日程。1965年,Holley第一个阐明了酵母丙氨酸tRNA的化学结构,第二年,Khrorana立即根据这个结果可能确定出的基因的结构。 相似文献