病原生物学与免疫学实验教学考核评价体系的构建与实践

实验教学是高等医学教学的重要环节,对于培养学生的实践能力、创新精神和创新能力有着理论教学和其它教学环节不可替代的作用.而建立科学合理的实验教学考核体系,对深化实验教学改革、提高实验教学质量具有重要的指导意义.为此,我们根据地方本科院校培养高素质应用型人才的要求,初步构建了病原生物学与免疫学实验全程评价与终结性评价、理论考核与操作考核、学生自评与教师评价相结合的多元化考核评价体系,并在实践中取得了较好的效果.     

胆固醇修饰的小干扰RNA静脉注射可抑制小鼠内源性apoB基因表达[英]／Soutschek J…／／Nature．

小干扰RNA(siRNA)分子可特异性抑制靶基因的表达,常规方法制备的siRNA不稳定,生物利用度低,组织分布范围窄,限制了其在体内的应用。载脂蛋白B(ApoB蛋白)是参与小鼠及人胆固醇代谢的重要蛋白质,主要由肝脏产生。本文针对小鼠及人apoB基因设计siRNA,并对其3’端进行胆固醇修饰,观察修饰的siRNA分子在体内的药物动力学以及在小鼠内抑制apoB基因表达的效率。     

调控肿瘤上皮–间质转化及肿瘤干细胞样特性的信号通路串话

上皮–间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是上皮来源肿瘤细胞获得侵袭和转移能力的重要生物学过程。肿瘤干细胞样细胞（cancer stem-like cells,CSLCs）在肿瘤发生、侵袭、转移和复发中亦起着关键作用。近年发现,EMT与肿瘤干细胞样特性获得存在密切关联,二者通过TGF-β、Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog、FGF、PI3k/Akt等多种信号通路及通路间的信号串话而交互作用,共同影响着肿瘤发生、侵袭及转移,了解调控EMT/CSLCs关键信号分子的功能及相互作用对于肿瘤靶向治疗具有重要意义。     

丙型肝炎病毒F蛋白磷酸化位点突变与细胞内分布

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白磷酸化位点突变对其在细胞内分布位置及功能的影响。方法 应用NetPhos2.0Server软件预测F蛋白的磷酸化位点,据此设计重叠引物,利用引物之间相互延伸获得突变型HCVf基因,该基因第13、14、114、121和124位密码子由野生型f基因的TCT突变为GAT,对应氨基酸由丝氨酸(S)突变为天冬氨酸(D)。将突变型f基因及野生型f基因定向克隆至pEGFP-N1,得到pEGFP-mf和pEGFP-f重组子。采用脂质体法将重组子转染HepG2细胞,再用激光共聚焦显微镜观察突变型F蛋白以及野生型F蛋白在细胞内的分布情况,拍照并进行半定量分析。结果 在HepG2细胞中,突变型F蛋白主要分布在细胞核内(90%),细胞质内有少量分布(10%),平均荧光强度分别为63.70±3.20和7.06±0.34,两者差异有统计学意义(P<0.001,t=99.2);野生型F蛋白主要分布在细胞质内(94.9%),细胞核内有少量分布(5.1%),平均荧光强度分别为83.34±4.07和4.48±0.22,两者差异有统计学意义(P<0.001,t=106.5)。结论 onclick="SelectDisplayDiv('ChDivSummaryMoreSummary','ChDivSummaryMore');DisplaySpanDiv('ChDivSummaryHuanYuan')"> HCVF蛋白在细胞内存在磷酸化和非磷酸化2种形式,其功能也不同。细胞质内以磷酸化F蛋白为主,非磷酸化F蛋白主要位于细胞核内。磷酸化F蛋白可能参与HCV复制调节,非磷酸化F蛋白可能影响细胞核内基因转录。