膀胱肿瘤组织中端粒酶催化亚基和c-myc的表达

目的 研究膀胱肿瘤组织中端粒酶催化亚基(hTERT)和c-myc间的表达及关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对27例膀胱肿瘤组织、16例癌旁组织和16例正常膀胱粘膜同时测定hTERT和c-myc表达,分析两指标在3种组织的表达差异和相关性。结果 TCC组织hTERT和c-myc的表达阳性率分别为100.0％(27/27)和66.7％(18/27);癌旁组织两指标的阳性率均为 37.5％,而正常膀胱粘膜分别为 0和 25.0％;hTERT和c-myc两指标在膀胱肿瘤组织中的阳性表达有相关性(P<0.01)。结论 hTERT较c-myc作为TCC的诊断指标更灵敏和特异;两指标在TCC中的阳性表达具有相关性。     

医用显微图像处理系统的研制和软件开发

目的 建立医用显微图像处理系统。方法 用普通光学显微镜、工业用摄像机、视频卡和计算朵等构成硬件系统,用ＶＣ＋＋５．０和微软基础类库（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｃｌａｓｓ,ＭＦＣ）开发了显微图像处理的专用类ＣＤＩＢ,并结合数据库系统,完成了外周血白细胞分类诊断系统。结果 应用该系统对１３０例病人进行白细胞分类与人工镜检对比,两者结果相符合。结论 该系统具有很好的实用价值和推广价值,可广泛     

阿霉素诱导肝细胞黏附分子基因下调肾癌细胞细胞分裂周期基因2的表达

目的:研究阿霉素联合hepaCAM基因对肾癌细胞786-0生物学的影响。方法：阿霉素处理后,用腺病毒向肾癌786-0导入肝细胞黏附分子（Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM）,以噻唑蓝（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）测抑制率,流式细胞术（Flow cytometer,FCM）测细胞周期,实时荧光定量聚合酶链反应（Real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）、Western blot检测hepaCAM和细胞分裂周期基因2（Cell division cycle 2,cdc2）的mRNA及蛋白水平。结果：MTT显示：与对照组相比,实验组抑制率显著升高（P＜0.01）。FCM证实：实验组出现明显G2/M期阻滞。RT-qPCR及Western blot检测到实验组cdc2 mRNA及蛋白水平显著下调（P＜0.01）。结论：阿霉素处理后,导入hepaCAM基因,可引起细胞抑制率显著升高及G2/M期阻滞,这可能与阿霉素诱导hepaCAM下调cdc2的表达有关。     

肾癌细胞来源的exosomes诱导Jurkat T细胞凋亡

目的 体外研究肾癌786-0细胞来源的exosomes介导肿瘤免疫逃逸的机制.方法 采用CCK-8法检测肾癌786-0细胞来源的exosomes对Jurkat T细胞生长的影响,瑞氏-姬姆萨染色检测Jurkat T细胞形态变化,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测Jurkat T细胞凋亡率,ELISA法检测Jurkat T细胞分泌功能,可溶性Fas阻断实验检测exosomes 对Jurkat T细胞凋亡率的影响,Western blot检测exosomes中FasL、及Jurkat T细胞caspase、Bax及Bcl-2蛋白的表达.结果 肾癌786-0细胞来源的exosomes可抑制Jurkat T细胞生长,10 μg/mL exosomes作用于Jurkat T细胞24 h,生长抑制率为(19.64 ±0.92)％,72 h为(36.24±1.12)％;400 μg/mL exosomes作用24 h,生长抑制率为(55.96±1.35)％,72 h为(76.51 ±1.37)％.Exosomes诱导Jurkat T细胞凋亡,10 μg/mL exosomes作用于Jurkat T细胞8h,凋亡率为(7.31±1.32)％,24h为(20.19±1.47)％;400 μg/mL exosomes作用8h,凋亡率为(27.28±1.29)％,24h为(41.72±0.88)％.Exosomes还明显抑制JurkatT细胞IL-2、IFN-γ、IL-6、IL-10的分泌水平;exosomes高表达FasL,可溶性Fas阻断实验能逆转Jurkat T细胞的凋亡;凋亡诱导过程中caspase-3、caspase-8、caspase-9被激活,Bax/Bcl-2上调.结论 肾癌786-0细胞分泌的exosomes能诱导JurkatT细胞凋亡,介导肿瘤免疫逃逸.     

《临床检验基础》多维教学模式的构建

建构主义理论的核心是“以学生为中心,强调学生对知识的主动探索、主动发现和对所学知识意义的主动建构”。以此理论为指导,在《临床检验基础》课程中构建基于课堂教学、网络平台和创新实验的三维立体教学模式,使学生在教学活动中不再是被动接受者,而是积极主动的参与者。实践表明,这种模式培养了学生的学习兴趣,同时也提高了学生的自主学习和创新能力以及综合素质。     

PLCε特异性shRNA对人膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨人源磷脂酶Cε(PLCε)特异性短发夹RNA(shRNA)对人膀胱癌增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染BIU-87细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞PLCεmRNA和蛋白的变化。分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术和免疫组化检测BIU-87细胞及裸鼠移植瘤增殖情况和细胞周期的变化;采用RT-PCR检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA的变化;采用Transwell小室体外侵袭法及明胶酶谱分析细胞的侵袭能力。结果转染pGenesil-PLCε质粒的细胞可明显抑制PLCε基因和蛋白表达水平(P<0.05);MTT、流式细胞术与免疫组化检测结果表明转染pGenesil-PLCε质粒的细胞生长明显受抑制(P<0.05),且细胞周期阻滞于G0/G1期;转染pGenesil-PLCε质粒的细胞Bcl-2/Bax mRNA明显降低(P<0.05);明胶酶谱及侵袭实验显示转染pGenesil-PLCε质粒的细胞侵袭、转移能力明显下降(P<0.05)。结论特异性shRNA干扰PLCε基因可抑制...     

膀胱移行细胞癌尿脱落细胞VEGF表达的研究

目的：研究尿脱落细胞ＶＥＧＦ表达与膀胱癌的关系，探讨其作为膀胱肿瘤诊断标记物的临床意义。方法：应用免疫组化技术检测４０例膀胱癌患者和２０例非肿瘤患者尿脱落细胞ＶＥＧＦ的表达。结果：ＶＥＧＦ在非肿瘤组尿脱落细胞无表达，而在肿瘤组尿脱落细胞表达率为４０％，联合常规ＨＥ染色检测可提高肿瘤检出率达８６．２％。复发组膀胱癌尿脱落细胞ＶＥＧＦ表达率７０％，明显高于初发组的３０％（Ｐ＜０．０５）。ＶＥＧＦ在膀胱癌的表达率与肿瘤分期有相关性，而与肿瘤分级程度无相关性。结论：检测尿脱落细胞ＶＥＧＦ表达，可作为膀胱肿瘤诊断、监测复发的良好指标，可提高尿脱落细胞检测膀胱癌的阳性率。     

HepaCAM基因转染对膀胱癌BIU-87细胞株生长及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨外源性肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)转染对人膀胱癌BIU-87细胞株生长及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors,VEGF)表达的影响。方法使用脂质体2000转染法将携带野生型hepaCAM基因的质粒(pEGFPN2-hepaCAM)及空载质粒(pEGFPN2)转染人膀胱癌BIU-87细胞,建立稳定过表达hepaCAM基因的BIU-87细胞株。以转染空载质粒及未转染的BIU-87细胞株作为对照,采用MTT法检测各组细胞生长能力,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hepaCAM、VEGF mRNA水平的变化,Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。结果MTT实验示:hepaCAM基因转染(实验组)BIU-87细胞生长与空载体组和未处理组细胞比较明显受到抑制(P<0.05);hepaCAM基因在膀胱癌BIU-87细胞不表达,转染后hepaCAM mRNA明显增强(P<0.05);实验组VEGF mRNA表达(0.527±0.031)与未处理组(0.803±0.042)、空...     

肝细胞黏附分子对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响

目的利用Affymetrix基因表达谱芯片探讨肝细胞黏附分子(hepaCAM)对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响及作用的分子机制。方法运用Affymetrix Human plus 2.0全基因组芯片检测膀胱移行癌细胞株EJ细胞腺病毒-绿色荧光蛋白-hepaCAM感染组与腺病毒-绿色荧光蛋白感染组的基因表达谱,用SAM法进行差异基因分析、DAVID软件进行基因本体论分析及wikiPathway分析,并用RT-PCR和Western blot验证芯片结果。结果 hepaCAM能引起EJ细胞系基因表达谱的广泛变化,表达差异超过2倍以上的基因共2469个,其中上调基因1602个、下调基因867个。这些差异表达的基因功能主要涉及细胞周期、细胞增殖调节等方面。用RT-PCR对差异基因DNA修复蛋白,肝脏激酶B1和细胞周期蛋白D1进行验证,结果与基因芯片相符;进一步在3细胞株中用Western blot佐证DNA修复蛋白、肝脏激酶B1变化与芯片结果一致。结论 hepaCAM能够诱导EJ细胞基因表达谱的广泛变化,在基因水平通过多条通路作用于膀胱癌细胞。     

乳腺癌预后标志物的研究进展

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤.为了提高存活率,临床借助于预后标志物,判断病人的预后,以给予适当的治疗.本文对与乳腺癌预后有关的一些蛋白质分子生物学标志物进行综述.