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1.
目的:构建霍乱毒素B亚单位(CtB)和幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreⅠ)融合的原核表达质粒pET32a(+)ctB/ure Ⅰ,并初步研究融合蛋白Ct B/Ure Ⅰ的表达特性和免疫特性.方法:PCR从pUC18 ctB中克隆ctB基因,定向在pET32a(+)/ureⅠ的ureⅠ基因5'端插入ctB基因,构建ctB和ure Ⅰ双基因原核表达质粒pET32a(+)ctB/ure Ⅰ,转该质粒于E.coli BL-21(DE3),经酶切和序列分析鉴定工程菌.IPTG诱导表达,HP-His亲和层析纯化,SDS-PAGE和Gel-Pro Analizer4分析,重组蛋白免疫BALB/c小鼠.用Western blot和ELISA分析重组蛋白的免疫特性.结果:工程菌含完整的ctB和ure Ⅰ基因,与相对应基因的序列同源性分别为100%.在22℃,1 mmol/L IPTG诱导4 h后,重组蛋白的表达占菌体总蛋白12%,亲和层析纯化后蛋白纯度为94.3%.Western blot表明重组蛋白分别能与相应的抗体反应,该蛋白免疫小鼠后能产生相应的IgG抗体.结论:成功构建了能表达CtB/Ure Ⅰ蛋白的大肠杆菌表达菌株.对融合蛋白表达和纯化后,初步证明了该重组蛋白有CtB和Ure Ⅰ的双特异反应原性和免疫原性,为研究新型幽门螺杆菌疫苗奠定了坚实的基础. 相似文献
2.
根据Jerne的免疫网络理论,具有抗原内影像的抗独特型抗体(Ab2或Ab2β)可以模拟抗原诱发机体产生免疫应答,而这种模拟作用多属分子构象上的模拟。本研究选择鸡卵清溶菌酶(HBL)作为研究模型进行了这方面的探索。通过对制备的鼠抗HEL的单克隆抗体(McAb1)分析,发现B7、B10是针对HEL活性中心的,B8是远离活性中心的。用这三株McAb1作免疫原分别免疫同系BALB/c小鼠,按常规方法进行融合、筛选,共获得71株稳定分泌Ab2的单克隆抗体(McAb2)细胞株,每组选二株McAb2进行鉴定。… 相似文献
3.
一种针对兔抗聚合人血清白蛋白抗体(anti-PHSA,Ab_1)的抗独特型抗体(anti-anti-PHSA,Ab_2),已通过免疫同种动物制成。该Ab_2具有以下特性:(1)它既可与兔anti-PHSA反应,也可与鼠的单克隆的anti-PHSA反应。(2)它与鼠的单克隆的anti-PHSA的反应,可受到PHSA和乙型肝炎病毒(HBV)上的聚合人血清白蛋白受体(PHSA-R)的抑制。(3)它可在异种动物体内诱导产生具有anti-PHSA活性的抗-抗独特型抗体(anti-anti-anti-PHSA,Ab_3),而且在收获的Ab_2血清中也查见了Ab_3。本研究不仅表明了针对PHSA的免疫应答中独特型网络调节的客观存在,而且在其抗独特型抗体(anti-Id)中,的确存在具有PHSA内映像的成分。 相似文献
4.
为研究CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤作用,作者采集正常人外周血分离单个核细胞(PBMC),先用抗CD3的单克隆抗体(CD3McAb)的rIL-2诱导和激活,使之成为CD3McAb激活的杀伤细胞(CD3AK),再制备CD3AK的冻融提取液,然后进行体内,外抗肿瘤实验。结果;低剂量的CD3McAb和rIL-2能明显诱导PBMC的活化和增殖;激活后的CD3AK细胞冻融提取液可抑制小鼠肝癌实体瘤细胞H2 相似文献
5.
6.
7.
8.
巯基嘌呤甲基转移酶 (TPMT)是一种专门催化芳香族和杂环化合物的巯基甲基化反应的胞内酶 ,与临床上使用的巯基嘌呤类药物的代谢有重要关系。而巯基嘌呤类药物在临床上已使用多年 ,常用的药物为 6 -巯基嘌呤(MP)、6 -硫鸟嘌呤 (TG)和咪唑硫嘌呤 (AT) ,主要用于白血病和肿瘤的化疗、器官移植受者的免疫抑制治疗以及自身免疫性疾病的治疗〔1 ,2〕。随着对这类药物的作用机制和代谢过程的深化研究 ,已经发现TPMT在人群中分布的多样性 ,特别是发现TPMP的基因突变与酶缺陷的关系后 ,使本领域的研究更加活跃。本文就TPMT活性… 相似文献
9.
为了将华西医学基础实验教学中心提出的“以学生为中心、以质量为核心、以能力为导向”的实验教学理念更好融合到医学实践教学环节中,我们针对口腔医学的专业特点对医学微生物学实验课进行了大胆改革。在改革后的课程中设置了名为“认识你所不知道的自己”的全新教学单元,让学生在生动的自我探索过程中,全面了解口腔微生物的特点及其与口腔常见疾病的关系,掌握口腔微生物学研究的常用技术手段、科研思路,也培养了同学们良好的团队合作意识。医学微生物实验课个性化、专业化的巧妙课程设计,大大提高了学生们的学习兴趣,也收获了更加优秀的教学成效。 相似文献
10.