高钙状态对人晶状体上皮细胞株SRA01/04氧化应激水平的影响

目的 探讨高钙培养对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)株SRA01/04氧化应激水平的影响.方法 选取处于对数生长期的HLEC均匀接种96孔板(每孔2×103个细胞),对照组:正常培养的HLEC,实验组:正常培养的HLEC+CaCl2(3 mmol·L-1、5 mmol· L-1、7 mmol· L-1、9 mmol· L-1、11 mmol·L-I、13 mmol·L-1、15 mmol· L-1、17 mmol·L-1、19 mmol·L-1)培养0h、12 h、24 h、36 h,采用CCK-8法检测各组细胞存活率.利用定量检测试剂盒测量细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总谷胱甘肽(total-glutathione,T-GSH)含量及氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/T-GSH比值的变化.结果 3 mmol·L-1、5 mmol·L-1、7 unol·L-1 CaCl2处理SRA01/04细胞24h,细胞存活率随CaCl2浓度增高先呈显著下降趋势,当浓度增高到9 mmol·L-1后细胞存活率又逐渐恢复,各实验组HLEC活力差异有统计学意义(P＜0.05).对照组细胞活力(0.592±0.055)与15 mmol·L-1CaCl2组(0.293±0.020)细胞活力相比差异有统计学意义(t=7.811,P＜0.05).CaCl2引起HLEC凋亡的最合适浓度和作用时间为15 mmol·L-1处理24h.与对照组相比,15 mmol·L-1CaCl2处理24h后,细胞核碎裂、溶解,细胞内SOD活力增高(t=-6.417,P＜0.05),T-GSH含量下降(t=13.816,P＜0.05),GSSG/T-GSH比值增高(t=-4.396,P＜0.05).结论 CaCl2诱导的高钙状态抑制HLEC的活力,引起细胞内SOD活力和GSSG含量增加,诱发并加剧细胞内氧化应激反应.