超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D（25-OH-VD2 、25-OH-VD3 ）、维生素E（α-、β-和γ-生育酚）的方法。方法 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈（50:50, v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取,以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱,2.5 mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离（ESI+ ）、多反应监测（MRM）模式下检测,同位素内标法定量。结果 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好,相关系数 r >0.995;6种脂溶性维生素的检测限为0.20~1.25 ng/ml,定量限为0.39~3.88 ng/ml;加标回收率为86.6%~107.7%,日内精密度<9.6%,日间精密度<9.3%。NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度,结果偏差均在5%以内。结论 本方法准确度高、重现性好、用血量少,适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测。     

石墨炉原子吸收光谱直接测定全血锰的方法研究

目的建立石墨炉原子吸收光谱仪直接测定全血中锰操作简便、结果稳定的方法。方法通过优化石墨炉升温程序,选用不同基体改进剂,采取标准加入法直接检测血锰含量。结果在适宜的测定条件下,该方法的检出限为0.5μg/L,在1.0~20.0μg/L范围,标准曲线相关系数可达0.9990,RSD1.8%~5.8%,加标回收率为90.0%~104.0%。结论该方法操作简单,具有较高的灵敏度和准确度,快速简便,适用于血中锰的检测。     

NOX4、NF-κB在氟化钠诱导HepG2细胞氧化应激中的作用

  目的  研究NOX4、NF-κB在氟化钠诱导HepG2细胞氧化应激中的作用。
  方法  分别用浓度为0、10、20、40、80 mg/L的氟化钠处理细胞24 h,采用硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,羟胺法测定细胞内总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力。免疫印迹法检测细胞内细胞核因子p65磷酸化水平和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4）蛋白表达水平;用NOX4抑制剂夹竹桃麻素（apocynin）预处理30 min后,再用40 mg/L氟化钠处理24 h,免疫印迹法检测细胞内p65磷酸化水平和NOX4蛋白表达水平反映HepG2细胞内的氧化应激状况。
  结果  经氟化钠处理后,20、40、80 mg/L剂量组HepG2细胞内的MDA含量较对照组相比明显升高（P < 0.01）,各剂量组细胞内总SOD活力均较对照组明显降低（P < 0.01）,40、80 mg/L剂量组NOX4蛋白表达水平和20、40、80 mg/L剂量组p65蛋白磷酸化水平均较对照组升高（P < 0.01或0.05）,存在着剂量效应;与单纯使用氟化钠处理组相比,用apocynin预处理细胞后,40 mg/L氟化钠诱导细胞内p65磷酸化水平和NOX4蛋白表达水平皆降低（P < 0.05或0.01）。
  结论  氟化钠诱导HepG2细胞产生氧化应激可能与激活NF-κB/NOX4途径有关。
     

高效液相色谱测定工作场所空气中丙烯酰胺

正丙烯酰胺(Acrylamide)为白色结晶状固体,具有神经毒性和生殖发育毒性[1],可经皮肤、黏膜、呼吸道和消化道吸收[2],引起以周围神经损害为主的慢性中毒[3],国际癌症研究机构将丙烯酰胺列为2A类致癌物[4]。由于丙烯酰胺在工业上的普遍应用,我国2002年制定的职业接触限值[5]中规定,工作场所空气中丙烯酰胺8h时间加权容许浓度(PC-TWA)为0.3 mg·ml-1。目前工作场所中的丙烯