腺病毒介导的p27mt基因转移对肝癌细胞生长的影响

目的 :研究突变型p2 7基因 (p2 7mt)对肝癌细胞生长的影响。方法 :采用重组腺病毒载体Ad p2 7mt将p2 7mt全长cDNA转入到肝癌细胞系SMMC 772 1中。3H TdR掺入法及软琼脂集落形成实验检测p2 7mt对肝癌细胞增殖的作用。结果 :转染p2 7mt基因的SMMC 772 1细胞在蛋白质水平有高水平的基因表达。其3H TdR掺入量及集落形成率明显低于对照组 (P <0 .0 5)。结论 :p2 7mt基因能抑制肝癌细胞增殖。p2 7mt可作为目的基因用于基因治疗。     

运动三通道动态心电图对冠状动脉病变的预测价值

动态心电图对心律失常、ＳＴ段变化及起搏器功能等方面有着独特的作用 ,但通道数目少或伪差等原因对ＳＴ段下移变化反映不全面。本文通过冠状动脉造影评价动态心电图对冠状动脉病变的诊断价值。1　资料与方法1.1　病例资料所有病人均为我院 1996年 9月～ 1999年 5月住院病人 ,共 171例 ,男 10 9例 ,女 62例 ,最小 2 6岁 ,最大 78岁 ,平均 52 .2± 4 .8岁。 2 2例糖尿病 ,2 7例高血压病 ,2 5例高脂血症 ,14例糖尿病和高血压 ,所有病人均在冠状动脉造影前或造影后或经皮冠状动脉球囊成型术前 1月内配带动态心电图。1.2　方法冠状动脉造影采用 …     

单纯冠状动脉受累的大动脉炎一例

１病例资料患者女性,２９岁,间断胸痛二十年,从９岁起活动后胸骨后疼痛,呈压榨样痛,持断时间５～１０ｍｉｎ,休息后缓解,间断发作,不伴大汗、心悸、呼吸困难、黑蒙,近两月发作频繁,轻微活动后诱发,特点相同。既往无高血压、糖尿病、吸烟史。体检：体温３６．８...     

人突变p27基因对大肠癌细胞SW480生长的影响

目的：观察人突变p27基因（p27mt）对人大肠癌细胞生长的影响，探讨p27mt基因在大肠癌基因治疗中的作用机制。方法：以携带突变p27基因复制缺陷型腺病毒（Ad—p27mt）为载体，转染大肠癌细胞SW480；用Western blot方法检测p27mt蛋白的表达；细胞计数法检测p27mt对SW480细胞生长的抑制作用；用流式细胞仪检测细胞周期：用DNA片段分析法检测细胞凋亡。结果：通过免疫印迹分析Ad—p27mt转染SW480细胞后，p27在细胞中出现了蛋白高表达。PI染色流式细胞仪检测77．96％的细胞阻滞于G0/G1期，而Ad—LacZ组及空白对照组分别为27．57％和25．29％；生长曲线显示Ad—p27mt对细胞生长就有明显的抑制作用；DNA片段分析示p27mt基因可诱导细胞的凋亡。结论：p27mt对细胞周期有明显的阻滞作用，主要阻滞于G0／G1期；p27mt基因对细胞的生长抑制机制与诱导细胞凋亡和细胞周期的阻滞有关。     

Intrastriatal Gene Transfer of Vascular Endothelial Growth Factor Rescues Dopaminergic Neurons in a Rat Parkinson＇s Disease Model

To examine the ability of intrastriatal gene transfer of vascular endothelial growth factor 165 mediated by adenoviral vector to rescue dopaminergic neurons in a rat model of Parkinson＇s disease （PD）, we constructed recombinant replication-deficent adenoviral vectors carrying the gene of VEGF165 （Ad-VEGF）, and injected Ad-VEGF （or Ad-LacZ and PBS as controls） into the striatum of rats 7 days after the lesion by 6-hydroxydopamine. The rat rotational behavior analysis and tyrosine hydroxylase （TH） immunohistochemistry were performed to assess the change of dopaminergic neurons. Our results showed that the rats receiving Ad-VEGF injection displayed a significant improvement in apomorphine-induced rotational behavior and a significant preservation of TH-positive neurons and fibers compared with control animals, It is concluded that intrastriatal gene transfer by Ad-VEGF may rescue the dopaminergic neurons from degeneration in a rat model of PD.     

痹康灵对骨关节炎治疗作用的实验研究

为观察痹康灵对骨关节炎(OA)的治疗效果并探讨其作用机制,将32只中国白兔分为正常对照组(A组)、空白对照组(B组)、西药对照组(C组)、中药治疗组(D组),每组各8只,A组不造模,B、C、D组均采用Hulth法建立兔OA模型.术后3天给予A和B组生理盐水,C组罗非昔布溶液,D组痹康灵,每天各6ml*kg-1,灌胃给药.自术后第1周每天驱赶动物2次,共30分钟,4周后取右侧胫骨平台关节软骨和滑膜进行光镜观察.采用免疫组化检测法分别检测关节软骨和滑膜中的白细胞介素-1β(IL-β)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的水平.结果显示,B组IL-1β,MMP-1、MMP-3的水平均非常显著高于A组(P＜0.01),并均显著高于C组(0.01＜P＜0.05);B组IL-1β、MMP-3水平显著高于D组(0.01＜P＜0.05),而MMP-1水平则非常显著高于D组(P＜0.01);C组与D组间上述3指标水平无显著性差异(P＞0.05).光镜观察,B组退变较其余3组明显;C组与D组间退变不明显;但2组退变均甚于A组.表明痹康灵能抑制IL-1β、MMP-1、MMP-3的产生,具有抗炎、保护和修复关节软骨的作用,从而对OA有一定的治疗作用.     

细胞穿透肽YARA介导增强型绿色荧光蛋白转导入人结直肠癌细胞的实验研究

目的 构建原核表达载体pET15b-YARA EGFP,表达并纯化出融合蛋白YARA-EGFP,观察其穿透人结直肠癌细胞的情况.方法 用分子克隆技术构建出表达型载体pET15b-YARA-EGFP,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白YARA-EGFP,将鉴定和纯化后的融合蛋白加入体外培养的人结直肠癌细胞.结果 得到纯化的融合蛋白YARA-EGFP,能高效地转导入体外培养的人结直肠癌细胞,并表现出剂量和时间依赖性,MTT法检测在其高浓度时仍对细胞无毒性.结论 YARA-EGFP融合蛋白能高效地转导入体外培养的人结直肠癌细胞.     

间充质干细胞成血管因子受体表达特征及其意义

目的:探讨间充质干细胞成血管因子受体表达特征及其意义。方法:采用经典的全骨髓贴壁法培养骨髓源间充质干细胞(MSC),通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞分析其表面标记(CD34、CD90、CD29)等鉴定MSC特征;以P1-P17MSC为实验材料,利用RT-PCR的方法检测PDGFR、VEGFR和NRP1的表达。利用Transwell体外迁移体系初步探索VEGF在MSC迁移中的作用,同时利用MTT法评价VEGF对MSC增值的作用。结果:培养的MSC呈现出CD90、CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;强表达PDGFR-β和NRP1、不表达VEGFR(Flk1和Flt1)和PDGFR-α,VEGF促进了MSC的增殖和迁移。结论:VEGF可能通过PDGFR-NRP1促进了MSC的增值和迁移。     

Intrastriatal Gene Transfer of Vascular Endothelial Growth Factor Rescues Dopaminergic Neurons in a Rat Parkinson's Disease Model

Parkinson's disease (PD) is a chronic progressivegerontic disease, which is characterized by the degeneration of dopaminergic neurons in substantia nigra. Efforhas been made to find effective treatment to arrest oslow down the degeneration of dopaminergic neuronsOnce regarded as an endothelial cell-specific factorvascular endothelial growth factor (VEGF), in recenyears, was unexpectedly found to be a critical player inneurodegeneration, and have direct neurotrophic andneuroprotective effects…     

PEP-1-SOD1融合蛋白转导入大鼠心肌组织的能力及其酶活性

目的:研究PEP-1-SOD1融合蛋白转导进人大鼠心肌组织的能力,并测定转导的目的蛋白酶活性.方法:实验分为SOD1组和PEP-1-SOD1组,分别经大鼠尾静脉注射500 μg纯化后的SOD1及500μg纯化后的PEP-1-SOD1融合蛋白入大鼠体内,于注射后0.5,1,2,4,8,24 h时间点取心脏(n=6,每组,每个时间点),经40 g/L多聚甲醛溶液固定6 h后行冰冻切片,通过免疫组织化学方法检测PEP-1-SOD1进入大鼠心肌组织的能力和分布情况.黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织SOD1活性.结果:PEP-1-SOD1组注射后0.5 h时,大鼠心肌组织中即出现均一的明亮红色荧光信号,分布于细胞浆及细胞核,具有时间依赖性的特点,荧光强度最强点为1 h时间点,而SOD1组未见到红色荧光信号.于注射后0.5 h时SOD1活性开始升高PEP-1-SOD1组为(85.37±1.67),SOD1组为(52.23±0.67),两组相比较,差异具有统计学意义(P<0.01);注射后1 h时SODl活性可达高峰,PEP-1-SOD1组为(119.16±1.37),SOD1组为(53.47±1.02),两组相比较,差异具有统计学意义(P<0.01),2～24 h逐步下降;SOD1组各时间点间相比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:PEP-1-SOD1融合蛋白能以天然活性形式迅速高效的转导人大鼠心肌组织,并保持酶活性达24 h.