孕早期子宫颈管脱落滋养细胞的收集与影响因素探讨

目的:探讨孕早期子宫颈管脱落滋养细胞的收集与影响因素,为进一步的孕早期无创性产前诊断奠定基础。方法:从早孕妇女的宫颈管获取脱落的滋养细胞并探讨影响因素。结果:双取器宫颈管毛刷法获取的阳性率最高;孕5~7周是取材较适宜的时间;妊娠囊下缘至宫颈内口的距离对获取的滋养细胞影响较小。结论:孕早期获取宫颈管脱落滋养细胞是可行的;取材工具,取材孕周对获取孕早期脱落滋养细胞有一定的影响。     

控制院内感染巩固爱婴医院成果

医院获得性感染自从有医院起即已存在。1974年美国疾病控制中心在医院感染控制的效益研究报告中指出,1972～1973年间美国有4.5％～5.7％的住院病人发生院内感染。每年近10万人因此死亡。我国卫生部1983年对21所大型医院11295例住院病人统计,院内感染发生率平均为8.4％。1990年3月～1991年2月全国28省(市)自治区103所医院参加的医院感染监控系统报告,其医院感染发病     

乙肝病毒宫内感染新生儿联合免疫效果观察

目的:了解乙肝病毒宫内感染新生儿主被动联合免疫的免疫成功率和失败率,评价主被动联合免疫的效果。方法:选取乙肝病毒携带孕妇分娩的宫内感染新生儿54例,乙肝病毒携带孕妇分娩的非宫内感染新生儿134例和正常孕妇分娩的新生儿164例,观察各组的免疫成功率和免疫失败率。结果:乙肝病毒携带孕妇分娩的非宫内感染的婴幼儿,免疫成功率为77.05%,免疫失败率为22.95%;正常孕妇分娩的婴幼儿,免疫成功率为88.67%,免疫失败率为11.33%;乙肝病毒携带孕妇分娩的婴幼儿,免疫成功率为59.18%,免疫失败率为40.82%。结论:主被动联合免疫对乙肝病毒宫内感染新生儿起到了积极的保护作用,但仍存在较高的失败率。     

胎盘HBV感染病理形态学研究

目的探讨胎盘HBV感染组织形态学／超微形态学变化。方法选择344例HBV标志物阳性的孕妇足月分娩后的胎盘,进行FQ—PCRHBV—DNA测定后,胎盘常规HE染色,病理组织形态学观察。选择HBV标志物阳性及阴性孕妇胎盘各15例及5例正常胎盘进行扫描电镜和透射电镜观察。结果HBV感染可引起胎盘炎症性改变,98.8％肉眼可见胎膜污浊,变脆等变化。60％以上的发生胎盘绒毛炎及蜕膜炎。扫描电镜下随感染程度加重依次出现绒毛间质合体细胞增生,微绒毛减少、粘连坏死,基底膜增厚等改变。透射电镜下可见到凋亡前体及多种形态的病毒颗粒。结论HBV及HBV抗原可以损害胎盘引起形态学的改变,从而影响胎盘的功能。电镜下观察到HBV颗粒及不同形态病毒包涵体是病毒复制最直接的证据。     

HBV宫内感染的传播途径及其机理的研究

目的 探讨HBV宫内感染的传播途径及其机理。方法 应用PCR技术检测HBV感染孕妇羊水、阴道分泌物、乳汁、脐血中HBV DNA；免疫组织化学技术检测胎盘组织中HBsAg和HBcAg的表达。结果 HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性孕妇的羊水、阴道分泌物、乳汁、脐血中均检测到了HBVDNA，阳性率分别为48．28％（14／29）、27．59％（8／29）、37．93％（11／29）和24．14％（7／29）；健康对照组孕妇的上述样品中均未检出HBVDNA；HBV感染孕妇胎盘组织各层细胞均可表达两种抗原，但阳性细胞数目从母体面到胎儿面逐渐减少，阳性细胞的着色强度逐渐减弱。健康对照组孕妇胎盘组织中未发现HBsAg和HBcAg阳性染色细胞。结论 孕妇感染HBV后可通过多种途径传播，而羊水感染是导致胎儿感染的重要传播途径。     

细胞免疫对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响

目的通过检测宫内感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）婴幼儿外周血T细胞亚群的变化,进一步探讨乙型肝炎疫苗免疫失败的机制。方法选择HBV宫内感染免疫失败婴幼儿20例和免疫成功者29例,采用流式细胞术及荧光染色法,检测外周血T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋的变化。结果免疫成功组婴幼儿外周血CD3^＋为64.17%±8.01%,CD4^＋为39.55%±8.80%,CD8^＋为24.62%±7.23%;CD4^＋/CD8^＋比值为1.66±0.51。免疫失败组婴幼儿外周血CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋分别为62.55%±7.32%、32.94%±7.58%和29.61%±7.08%;CD4^＋/CD8^＋比值为1.13±0.50。统计分析显示,CD3^＋T淋巴细胞百分数组间差异无显著性意义（P〉0.05）,CD4^＋T和CD8^＋T细胞在免疫失败组和免疫成功组有显著性差异（P〈0.05）。结论婴幼儿外周血CD4＋和CD8＋T细胞的数量变化可能是乙肝疫苗免疫接种失败的机制之一。     

HBV-DNA的含量与宫内感染的关联性

目的：探讨孕妇血清中HBV—DNA含量与胎儿宫内感染及造成宫内感染的相关因素．方法：用ELISA方法筛选HBsAg阳性孕妇228例,并用定量PCR技术检测HBsAg阳性孕妇血清以及脐血中HBV—DNA．新生儿根据有无HBV感染分为胎儿感染组及非感染组（对照组）,调查宫内感染的相关因素,结果：HBsAg,HBeAg、抗HBc阳性孕妇的新生儿脐血HBV—DNA捡出率21％（14／68）;HBsAg．抗HBe,抗HBc阳性者为1．7％（2／117）;HBsAg和HBeAg双阳性者为20％（3／15）;HBsAg和抗HBc阳性者为11％（2／19）;HBsAg单一抗原阳性者脐血中未捡出HBV—DNA．胎儿总感染率为9,2％（21／228）．胎儿宫内感染率随孕妇血清中HBV—DNA含量增加而升高,宫内感染的危险性越大．胎儿感染组与非感染组在多种临床相关因素中先兆早产孕妇胎儿感染者多于非感染组（P〈0．05）．结论：孕妇不同的感染状态影响宫内HBV感染率,HBeAg与HBV—DNA高滴度是胎儿宫内感染的高危因素．孕妇出现先兆早产使胎儿的感染率增加．     

应用免疫荧光双标记染色技术检测乙型肝炎病毒感染胎盘膜联蛋白V的表达

背景:膜联蛋白V是近年来被作为肝细胞膜上存在的与乙型肝炎病毒感染相关受体研究的热点之一,并在胎盘组织中也有表达。目的:探讨膜联蛋白V在HBV宫内感染中的作用;揭示HBV进入胎盘组织细胞的方式,为HBV的宫内感染的机理提供理论依据。设计:随机对照实验。单位:泰山医学院。对象:选择2003-01/2004-12济南市妇幼保健院、泰安市中心医院、泰安市妇幼保健院收集的30例HBsAg阳性孕妇足月分娩的胎盘组织,同时收集母血分离血清。实验经过孕妇知情同意及医院伦理委员会批准。兔抗人膜联蛋白V亲和纯化抗体(第一抗体)、鼠抗人HBs mAb(第一抗体)、生物素化羊抗小鼠IgG(第二抗体)均购自武汉博士德生物工程有限公司。方法:用即用型SABC免疫组织化学染色试剂,检测30例HBsAg阳性的足月胎盘组织中,有18例检测到HBsAg,随机选取10例进行荧光双标染色,其染色主要过程为将待测石蜡切片标本常规脱蜡至水;抗原微波热修复;加入第一种一抗(兔抗人AnV亲和纯化抗体1:60,为单克隆抗体)置湿盒中,4℃冰箱过夜;第二种一抗(鼠抗人HBs mAb1:50),置湿盒中,4℃冰箱过夜;加入与第二种一抗相应的二抗(如生物素化的羊抗鼠IgG1:100):加入以PBS作适当稀释的第一种荧光抗体(如FITC-羊抗兔IgG1:50);加入第二种荧光抗体(Avidin-Cy3);缓冲甘油封固;激光共聚焦显微镜下观察并进行图像分析。用IPP4.5图像分析法,先进入IPP4.5系统的Image Analysis程序,然后调入分析文件进行分析。主要观察指标:乙型肝炎病毒感染的胎盘组织中HBsAg/膜联蛋白V的存在与分布情况。结果:选取10例进行荧光双标染色结合激光共聚焦显微镜检测胎盘组织上滋养层细胞乙型肝炎病毒/膜联蛋白V的存在与分布模式。胎盘组织中存在着丰富的膜联蛋白V,位于绒毛合体滋养层细胞,在基质细胞和血管内皮细胞都有膜联蛋白V的表达。并发现在同一细胞中存在着乙型肝炎病毒和膜联蛋白V的共存现象。结论:乙型肝炎病毒感染胎盘细胞可能是通过与细胞上的受体膜联蛋白V结合,促使病毒进入胎盘细胞,导致宫内感染。     

P16在子宫颈病变中的应用研究进展

宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤。在全世界导致妇女死亡的恶性肿瘤中排第二位[1]。分子流行病学调查证实,宫颈癌中99%以上由高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染所致。     

乙型肝炎病毒感染孕妇胎盘细胞因子的表达与胎盘细胞凋亡的研究

目的 探讨乙型肝炎病毒感染孕妇胎盘中细胞因子的笔表达以及与胎盘细胞凋亡的关系,阐明乙型肝炎病毒感染孕妇致异常妊娠的机理。方法 选择30例HBV感染孕妇死胎胎盘作为研究组,正常分娩后的胎盘20例作为对照组,应用免疫组织化学法测定各组胎盘组织中TNF和IL-18的表达,应用TUNEL法检测胎盘细胞凋亡指数。结果 在正常胎盘组织中有一定量的TNF和IL-18的表达,但在HBV感染孕妇死胎胎盘组织中TNF和IL-18的阳性细胞数显著高于对照组（P〈0.01）;研究组胎盘细胞凋亡指数显著高于对照组（P〈0.01）,合体滋养细胞的凋亡指数高于滋养细胞,在正常对照组两种细胞的凋亡指数差异有显著性（P〈0.05）,而在研究组两种细胞的凋亡指数差异无统计学意义（P〉0.05）。经相关分析发现,胎盘细胞的凋亡指数与TNF、IL-18呈正相关,（A=6.38,B=0.82,r=0.54;A=9.66,B=0.52,r=0.61）。结论 HBV感染孕妇死胎胎盘中TNF和IL-18的表达增加,使胎盘细胞凋亡加速,影响胎盘的正常功能,是导致胎儿异常的原因之一。