嗅神经鞘细胞在体外培养时对GABA能神经元的作用

目的　研究嗅神经鞘细胞 (OECs)在培养状态下对GABA能神经元的存活及突起生长的影响 .方法　用原代培养的方法 ,分别进行OECs和脊髓神经元的培养 ,培养 6d后 ,将OECs接种在Millipore细胞培养板的内嵌培养皿中 ,然后置入脊髓神经元的培养板中 ,使两者进行不接触的联合培养 ,培养进行至 6d ,分别作GABA免疫细胞化学染色 ,观察突起生长情况以及GABA阳性细胞计数 .结果　与OECs联合培养组 (实验组 )GABA能神经元存活为 3 9.7± 6.3 ,对照组为 2 7.6± 2 .7(P <0 .0 5 ) ,并且实验组GA BA能神经元染色较对照组深 ,突起长度 (63 0± 112 ) μm较对照组长 (2 70± 97) μm(P <0 .0 1) .结论　在体外培养状态下 ,OECs对GABA能神经元有明显的促进作用     

白细胞介素—1对大鼠下丘脑室旁核Fos癌蛋白和CRF的诱导作用

将白细胞介素-1(IL)注入大鼠侧脑室,用Fos癌蛋白抗体免疫组化法检测了下丘脑室旁核的激活神经元:大量位于含促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)相应区域的室旁核小细胞部神经元呈Fos免疫强阳性。Fos和CRF的免疫双染色显示了许多Fos免疫阳性神经元也呈CRF免疫阳性。此外,在IL-1注射动物中,CRF的免疫阳性显著加强,提示CRF合成增加。     

大鼠下丘脑及邻近区域催产素免疫阳性神经元与垂体后叶的关系

本文运用免疫细胞化学PAP及ABC法,显示大白鼠下丘脑内OXT免疫阳性神经元,并于垂体后叶注射WGA-HRP,显示下丘脑中逆行标记细胞,结合免疫细胞化学方法,观察下丘脑及其邻近区域内HRP与OXT双标记细胞,证实下丘脑视上核、室旁核、穹窿前核和后核、血管周细胞群、下丘脑视前区、下丘脑前区及外侧区、背侧副细胞群内、室周部、第三脑室侧壁室管膜细胞下及室间孔部室管膜细胞下,均有OXT免疫阳性神经元,其中至少部分神经元可发出向垂体后叶的投射纤维。位于第三脑室侧壁室管膜下及室间孔部室管膜下的神经元,可能监测脑脊液中各种因素的变化,调节垂体后叶OXT的分泌,也可能直接通过共树突向脑脊液内释放OXT。     

P物质对大鼠下丘脑催产素及加压素免疫反应性神经元Fos癌蛋白 …

为研究Ｐ物质激活的下丘脑大细胞神经分泌神经元及其分布，将Ｐ物质注入大鼠侧脑室，用Ｆｏｓ癌蛋白免疫组织化学结合催产素或加压素抗血清免疫组织化学的双标记法，检测了下丘脑各大细胞神经分泌核区域激活的催产素及加压素免疫反应性神经元。结果表明：Ｆｏｓ免疫强化反应性的神经元主要见于第三脑室周围区及室旁核，在视上核及其他下丘脑大细胞神经分泌核区仅见到少数至少数Ｆｏｓ免疫反应性神经元。     

大鼠垂体前叶内SP—免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的神经纤维？…

用周围组织结构完整的大鼠垂体的连续切片，结合免疫组织化学方法，分析大鼠体前叶内ＳＰ－免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的ＳＰ－免疫阳性神经纤维的关系。结果显示：垂体前叶的周围脑膜中有着大量的ＳＰ－免疫阳神经纤维和纤维束，并发出分支，进入垂体前叶内部。同时在垂体两侧的动、静脉壁上亦有着大量的ＳＰ－免疫阳性神经纤维及纤维束，与走行在前叶表面的ＳＰ－免疫阳性神经纤维相连。此外，在垂体柄腹侧的门静脉壁上有     

人Nanog基因的克隆及其在COS-7L细胞中的表达

目的 :克隆人Nanog基因 ,构建其真核表达载体 ,并观察其在哺乳动物细胞COS 7L中的表达。方法 :利用HE2 93细胞的人基因组DNA为模板 ,以LA PCR技术 ,扩增Nango的基因 ,定向克隆到带Flag标签的pCMV载体中 ,测序后 ,挑选序列正确的真核表达质粒pFlag Nanog转染COS 7L细胞。用抗Flag标签的抗体 ,进行Westernblot和间接免疫荧光染色法检测Nango蛋白的表达。结果 :从人基因组DNA中克隆到序列正确的Nanog全长编码序列。所构建的Nanog质粒在COS 7L细胞中获得高效表达。结论 :人Nanog基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS 7L中的表达均获得成功 ,为进一步研究其功能 ,尤其是探讨其在神经干细胞中的作用奠定了基础。     

音猬因子的功能受体斑片在培养神经干细胞中的表达

目的　观察在培养的神经干细胞内是否有发育调控分子———音猬因子 (sonichedgehog)功能受体———斑片 (patched)表达。　方法　神经干细胞克隆在体外培养传代后 ,用patched的特异性引物对培养的神经干细胞进行RT PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记克隆的探针 ,对神经干细胞进行原位杂交分析。　结果　神经干细胞克隆内大量的细胞均可表达sonichedgehog的功能受体patched ,patched阳性细胞间未见明显差别 ,克隆边缘与中央的patched分布也未见明显差别。　结论　sonichedgehog信号传导路可能在神经干细胞的增殖与分化过程中起重要作用。     

胚胎小鼠下丘脑培养状态SRIF神经元的发生免疫细胞化学研究

目的　研究胚胎小鼠下丘脑培养状态下SRIF神经元的发生. 方法　采用原代分离培养的方法 ,将胚胎小鼠下丘脑进行体外分散细胞培养,观察了下丘脑细胞的生长分化过程,并且对培 养不同时间的细胞作生长抑素(SRIF)免疫细胞化学染色,阳性神经元记数,各种形态神经元 所占的百分比统计. 结果　胚胎小鼠下丘脑SRIF阳性神经元在体外生长发 育不同时间细胞指 数不同：7 d时为24±2, 10 d时为34±2, 12 d时为34±3, 14 d时为104±6, 16 d时为68±5, 20 d时为29±1,其中在培养14 d时,SRIF阳性神经元达到高峰,以后 出现下降趋势. 而且神经元的形态、单极、双极、多极神经元的数目以及突起呈色深浅 在 发育过程中也有较大的变化,各种占比例较大神经元出现的时期也不一样,其中,单极在培 养 10,14,16 d时分别占52.3%, 60.0%, 43.3%. 双极在培养10, 14, 16 d时分别占30.7%, 20 .7%, 30.1%. 多极神经元 在培养7,12,20 d时分别占81.5%, 90.1%, 67.3%. 结论　①在培养状态 下,下丘脑不同核 区的细胞发育速度不同,并且随时间点的变化呈现规律性变化;②不同类型的SRIF神经元的 发育随着不同的时间点呈现出不同比例很可能反映一些SRIF神经元的功能发生了转化;③体 外培养状态下SRIF神经元的发育可能反映在体SRIF神经元的情况.