几丁糖电纺膜对大鼠皮肤创面的病理学影响

目的观察本课题组自行研制的几丁糖电纺膜对大鼠创面的病理学变化的影响。方法取健康SD大鼠25只,体重240~300g,于脊柱两侧切取直径1.8cm圆形创面,制作皮肤创面模型,左侧为实验组,右侧为对照组。实验组采用几丁糖电纺膜外敷,对照组用无菌纱布外敷,每日进行大体观察并记录创面愈合时间;术后3、5、7、9、12天切取包括创面在内直径为2.0cm的皮肤标本,行HE染色观察创面的组织学改变,计算实验组及对照组组织病理学评分。结果实验组创面无红、肿、热等局部炎性征象,从第3天开始观察到明显的创面收缩,残余面积第4天接近55%,第7天时达30%;对照组创面结痂迟,创缘收缩较慢,第4天开始观察到明显的创面收缩,第5天残余面积接近65%,第7天接近40%。实验组创面完全愈合时间为(272.87±11.74)小时,对照组为(303.80±12.15)小时,愈合时间有统计学意义(P0.01)。病理学观察实验组自手术后第3天开始依次出现肉芽组织增生及细胞浸润,胶原组织增生、创面皱缩及上皮化,到术后9天,胶原组织已排列整齐,上皮化过程基本完成,可见皮肤附件;对照组相应时间点观察到细胞浸润出现晚,且部分创面出现肉芽组织伴溃疡,上皮化过程较晚。实验组及对照组组织病理学评分有统计学意义(P0.01)。结论几丁糖电纺膜能减轻创面炎症反应,缩短创面愈合时间,促进创面上皮化,提高创面愈合质量,具有显著的促进愈合作用。     

几丁糖/海藻酸敷料止血性能的实验研究

目的研究一种新型敷料：几丁糖／海藻酸敷料（本项目组自行研制，已申请国家专利）的止血性能。方法取新西兰兔4只，在背部两侧对称性剪5个直径1cm的圆型创口，分别与创面大小相当的几丁糖／海藻酸敷料和明胶海绵止血，观察与创面的粘附情况，记录出血时间：止血停止后，将几丁糖／海藻酸敷料和明胶海绵放入预先配制好的氰化高铁血红蛋白检测试剂中仔细清洗，用分光光度计在540nm波长处光度比色，测出的Hb光度吸收值表示出血量。结果几丁糖／海藻酸敷料与创面粘附较好，几丁糖／海藻酸敷料、明胶海绵组的出血时间分别为87.7±19.1妙、170.7±22.6妙，Hb光度吸收值分别为1.131±0.44、1.733±0.733，经统计学分析，两组数据都有显著性差异（P〈0.01），几丁糖／海藻酸敷料组明显优于明胶海绵组。结论几丁糖／海藻酸敷料具有较好的止血性能。     

温敏性壳聚糖止血膜的止血作用及体内降解吸收

背景：尽管温敏性壳聚糖是壳聚糖的一种,但其止血效果、组织相容性及体内代谢吸收情况还需要验证。目的：探讨温敏性壳聚糖止血膜的止血作用、体内降解和组织相容性。方法：取SD大鼠48只,随机均分为4组,同时进行两种实验：①制作肝脏创面出血模型,其中3组分别采用温敏性壳聚糖止血膜、纤维素止血棉和明胶海绵止血材料贴敷大鼠肝创面止血,以不做任何处理的为空白对照。记录出血时间及出血量。②在上述3组大鼠的股四头肌内分别再植入对应的止血材料,空白对照组不植入任何材料。术后1,2,3,4,6周取两处创面行大体观察,术后4周行苏木精-伊红染色和电镜观察。结果与结论：温敏性壳聚糖组、纤维素组止血时间和出血量少于空白对照组、明胶海绵组(P < 0.05)。温敏性壳聚糖止血膜于术后6周完全降解,纤维素止血棉于术后3周完全降解,明胶海绵于术后2周完全降解。温敏性壳聚糖组肝小叶结构完整,肝细胞结构基本正常,肿胀轻,炎症细胞浸润程度轻,电镜显示整个肝细胞外形结构清楚,细胞核无破损,细胞器良好;肌肉纤维结构完整,炎症细胞浸润程度轻,电镜显示肌纤维走向整齐,肌细胞核形态正常,细胞器良好。可见温敏性壳聚糖止血膜具有较好的止血作用和组织相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

几丁糖和海藻酸在战创伤敷料中的应用现状和研究展望

几丁质（chitin）又名甲壳质（poly-β-N-acetyl-D—glucosamine），是一种广泛存在于自然界虾、蟹外壳中的天然高分子化合物，化学名称为N．已酰氨基葡萄糖多聚体，经脱已酰基后，衍生为氨基葡萄糖，即几丁糖（壳聚糖chitosan）。一般认为脱乙酰度在70％以上时，称为壳聚糖，脱乙酰度在20％以下时称为甲壳质。因此几丁糖实际是一种含有N-acetyl-D-glucosamine单体和D-glucosamine单体的线性盒状共聚物。几丁质及几丁糖具有无毒性、无刺激性、无免疫抗原性、无热源性、不溶血、无致突变及致死性反应，     

几丁糖/海藻酸敷料对海水浸泡创面作用的实验研究

目的 观察几丁糖(chitosan,CTS)/海藻酸(alginate,ALG)敷料对大鼠海水浸泡创面的作用.方法 取健康SD大鼠25只,体重250～300 g,于脊柱两侧切取直径1.8 cm圆形创面,制作皮肤创面模型,左侧为实验组,右侧为对照组.将创面浸泡于预先配置的人工海水1 h后,实验组采用CTS/ALG敷料外敷创面,对照组用无菌纱布外敷.行大体观察并记录创面愈合时间;术后3、5、7、10、12 d切取包括创面在内的2 cm×2 cm皮肤标本,行HE染色和免疫组织化学Envision法染色,观察创面组织学改变及EGF受体(EGF receptor,EGFR)、bFGF表达情况.结果 实验组创面炎性反应轻,结痂收缩较快;对照组创面结痂收缩较慢.实验组创面完全愈合时间为(11.68±0.57)d,对照组为(12.51±0.54)d,比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组自术后3 d开始出现肉芽组织增生及细胞浸润,胶原组织增生,创面皱缩及上皮化,至术后10 d胶原组织已排列整齐,上皮化过程基本完成,可见皮肤附件出现,术后12 d完全愈合;对照组相应时间点细胞浸润出现晚,且出现肉芽组织伴溃疡,上皮化过程较晚.免疫组织化学观察示实验组术后3、5 dbFGF在血管内皮细胞和间质纤维母细胞内高表达,EGFR在血管内皮细胞内高表达,术后7、10、12 d呈低表达;对照组术后相应时间点bFGF及EGFR呈低表达和无表达.结论 CTS/ALG对海水浸泡创面具有促进愈合作用,但其机制仍有待进一步深入研究.     

新型壳聚糖衍生物预防椎板切除术后硬膜外粘连的实验研究

目的:探讨一种新型壳聚楮衍生物--羟丁基壳聚糖对椎板切除术后硬膜外粘连的预防作用.方法:36只SD大鼠随机分为3组,2%羟丁基壳聚糖组(A组)、3%羟丁基壳聚糖组(B组)及对照组(C组),每组12只.三组大鼠行L2椎板切除术后.A、B组于硬脊膜外分别注入2ml浓度为2%、3%羟丁基壳聚糖溶液,C组旷置,然后缝合切口.术后6周取材,大体观察硬膜外粘连情况,进行Rydell分级;行免疫组织化学检测,计算羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;切片行HE染色,观察硬膜外瘢痕增生情况,并行成纤维细胞计数.结果:术后6周A组及B组硬膜外粘连程度均较C组轻,Rvdell评分差异显著(P＜0.05),而A、B组之间无显著性差异(P＞0.05);三组硬膜外瘢痕组织中Hyp含量分别为0.284±0.065μg/mg、0.302±0.109μg/mg、0.963±0.188μg/mg,A、B组含量均较C组少,差异显著(P＜0.05),而A、B组之间无显著性差异(P＞0.05);组织学观察见A组及B组与C组比较硬脊膜外胶原增生较少,瘢痕组织结构疏松,但三组成纤维细胞计数无显著性差异(P＞0.05).结论:羟丁基壳聚糖能够有效阻隔大鼠硬膜外瘢痕组织,明显减少胶原组织增生,具有良好的预防硬膜外粘连的作用,有望成为一种新型防粘连生物医学材料.     

温敏性壳聚糖止血膜的止血作用及体内降解吸收

背景：尽管温敏性壳聚糖是壳聚糖的一种,但其止血效果、组织相容性及体内代谢吸收情况还需要验证。目的：探讨温敏性壳聚糖止血膜的止血作用、体内降解和组织相容性。方法：取SD大鼠48只,随机均分为4组,同时进行两种实验：①制作肝脏创面出血模型,其中3组分别采用温敏性壳聚糖止血膜、纤维素止血棉和明胶海绵止血材料贴敷大鼠肝创面止血,以不做任何处理的为空白对照。记录出血时间及出血量。②在上述3组大鼠的股四头肌内分别再植入对应的止血材料,空白对照组不植入任何材料。术后1,2,3,4,6周取两处创面行大体观察,术后4周行苏木精-伊红染色和电镜观察。结果与结论：温敏性壳聚糖组、纤维素组止血时间和出血量少于空白对照组、明胶海绵组（P 〈0.05）。温敏性壳聚糖止血膜于术后6周完全降解,纤维素止血棉于术后3周完全降解,明胶海绵于术后2周完全降解。温敏性壳聚糖组肝小叶结构完整,肝细胞结构基本正常,肿胀轻,炎症细胞浸润程度轻,电镜显示整个肝细胞外形结构清楚,细胞核无破损,细胞器良好;肌肉纤维结构完整,炎症细胞浸润程度轻,电镜显示肌纤维走向整齐,肌细胞核形态正常,细胞器良好。可见温敏性壳聚糖止血膜具有较好的止血作用和组织相容性。     

几丁糖电纺膜封堵脑脊液漏即刻效果的实验研究

目的研究自行研制的几丁糖电纺膜防脑脊液漏的即刻效果。方法健康成年的新西兰家兔5只,取头部正中切口在双侧颅顶部对称开直径约1.2cm大小的圆形骨窗;剪去0.8mm×0.8mm大小的硬脑膜组织,并将合适大小的几丁糖膜置入实验侧硬膜缺损区;对照侧仅行硬脑膜切除而不行硬脑膜修补以作对照;再于颅骨中线处钻一小孔,透明导管通过小孔置入硬膜膜下,见脑脊液从导管中反流,缓慢推入美蓝溶液,共重复5次实验。结果几丁糖电纺膜与创面粘附良好,能有效地密封创面,注射美蓝后,实验侧无美蓝渗出,即使膜的下方聚集大量美蓝也未见从粘贴边缘漏出,而对照侧美蓝一直处于渗出状态。结论几丁糖电纺膜组明显优于空白对照组,有明确的封堵脑脊液效果。     

几丁糖电纺膜完全修复硬膜后与正常硬膜对比研究

目的研究几丁糖电纺膜完全修复硬脑膜缺损后,其下方新生纤维膜与正常硬脑膜的差异。方法健康成年的新西兰家兔16只,取头部正中切口在双侧颅顶部对称开直径约1.2cm大小的圆形骨窗;剪去0.8mm×0.8mm大小的硬脑膜组织,并将合适大小的几丁糖膜置入实验侧硬膜缺损区;对照侧不进行硬脑膜切除作对照,缝合皮下及皮肤后进行饲养,术后8周(8周后硬膜已完全重建)处死,观察骨窗周围大体情况,通过组织学检验几丁糖膜下方新生纤维膜与正常硬膜差异。结果 1术后见皮肤及皮下无红肿、无渗出、化脓等炎症反应;几丁糖膜被严密包裹;从正中线切开包裹组织,见膜周围无粘连,容易被取出;膜下有新生纤维膜形成,严密封闭脑组织,无脑脊液漏;新生纤维膜与脑组织无粘连;2新生纤维膜组织与正常硬膜对比:HE染色提示实验组术后8周几丁糖膜下新生纤维膜为纤维结缔组织,Masson提示其中大量纤维素及胶原形成,免疫组化提示新生纤维膜已完全成熟,无b FGF表达,未见EGF表达,为完全成熟的纤维结缔组织,与正常硬脑膜无明显差异。结论新型几丁糖膜修补硬脑膜效果确切,且新生纤维膜与正常脑膜无明显差异。     

羟丁基壳聚糖预防大鼠腹腔粘连的实验研究

目的 探讨羟丁基壳聚糖对大鼠术后腹腔粘连的预防作用.方法 清洁级SD大鼠90只,雌雄各半,体重250～280 g,随机分为3组(n=30).采用纱布摩擦盲肠浆膜面制作腹腔粘连动物模型后,A、B组分别于盲肠表面喷涂2 mL浓度为2%的羟丁基壳聚糖溶液及透明质酸钠凝胶,C组旷置30 s后关腹.术后观察大鼠一般情况,术后2、4剧每组各取15只大鼠,行大体观察及组织学观察,双盲法行粘连程度分级.术后4周A、C组透射电镜观察创伤处盲肠壁的超微结构.结果 术后人鼠均存活至实验完成.术后2周,A、B组腹腔粘连程度较轻,纤维结缔组织及胶原增生较少,C组腹腔粘连较重,纤维结缔组织大量增生;根据Nair五级分级标准及组织学观察分级A、B组与C组差异有统计学意义(P＜0.05),A、B组间差异无统计学意义(P＞0.05).术后4周,A组粘连程度轻,纤维结缔组织及胶原增生少,C组腹腔粘连严重,纤维结缔组织及胶原大量增生,B组介于两者之间,3组分级差异有统计学意义(P＜0.05).透射电镜观察结果显示:A组成纤维细胞不活跃,胶原纤维较纤细,排列稀疏;C组成纤维细胞活跃,胶原纤维致密、紊乱.结论 羟丁基壳聚糖可显著减少大鼠腹腔术后纤维结缔组织增生,明显抑制成纤维细胞的活性,具有长时间预防腹腔粘连的作用.