脑脊液中氨基酸分析与中枢神经系统疾病关系

在生理条件下 ,脑脊液中的氨基酸主要来源于脑组织 ,在某种程度上可以反映中枢氨基酸类递质的生成、释放和分解代谢的状况。中枢神经系统的许多疾病都与兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸两类递质的失平衡有关 ,因此在临床医学研究中可以通过对脑脊液中氨基酸的分析 ,了解中枢神经系统正常及病理状态下氨基酸的变化规律 ,从而为临床对疾病的诊疗提供指导     

完全埋伏阻生智齿致牙痛20例分析

近年来我们诊断了以疼痛为首发症状完全埋伏阻生齿20例,分析报告如下。1.临床资料 本组20例均经口内X线诊断,男12例,女8例,年龄12～59岁,平均31.3岁。完全埋伏阻生的部位及牙位见附表。临床上均以疼痛为首发症状,病程在3天～1年,其中11例为后磨牙区呈持续性隐痛;4例下颌(牙合)牙区为阵发性发作痛;2例为第二磨牙自发性痛,冷热刺激明显;2例头痛明显,1例右颞下颌关节痛。     

人NGAL克隆表达及抗体的制备与鉴定

目的：高效表达人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL）重组蛋白并制备其多克隆及单克隆抗体。方法：人工合成经密码子优化的NGAL基因,构建原核表达重组质粒pW28-NGAL,IPTG诱导表达后分离纯化并分析在溶液中的聚集状态;获得的rhNGAL抗原免疫兔子制备多克隆抗体,免疫小鼠筛选高效价的特异性单克隆抗体并鉴定抗体亚型;Protein G亲合柱纯化,等温滴定量热法及非竞争ELISA法检测抗体的亲和力,SDS-PAGE分析纯度;最后运用Western blot、免疫荧光和免疫组化对抗体进行鉴定。结果：高效获得高纯度NGAL重组蛋白,主要以单体形式存在;成功制备兔多抗,同时筛选获得6株高效价单克隆抗体;其中,25号单抗为IgG1亚型,余者均属IgG2a亚型,且19、35号单抗的亲和常数分别为3.06×109、2.14×109。SDS-PAGE分析表明纯度均大于90%。进一步的鉴定结果表明制备的抗体皆具有良好免疫反应性及特异性,且单抗的特异性明显高于多抗。结论：本研究利用密码子优化技术高效表达制备了NGAL重组蛋白,获得了其高效价多克隆抗体和高特异性单克隆抗体,为NGAL的病理生理作用等功能研究提供了良好的实验材料,为NGAL临床免疫检测诊断试剂的国产化奠定了有力的基础。     

钙激活中性蛋白酶-2对整合素β4水解的影响

目的:观察乳腺癌细胞系MCF7细胞中,钙激活中性蛋白酶2(calpain-2)对整合素(integrin)β4水解的影响。方法:利用"短发夹"RNA(shRNA)和微小RNA(mirRNA)技术结合的calpain-2基因沉默(gene silencing)慢病毒质粒(GIPZ lentiviral shRNAmir)转染乳腺癌细胞株MCF7,嘌呤霉素筛选稳定沉默calpain-2基因的细胞株,细胞株传4代,用荧光显微镜观察转染效率,用蛋白质印迹(Western blot)实验检测calpain-2基因沉默效率及integrinβ4水解的情况。结果:嘌呤霉素筛选、细胞传4代,荧光显微镜下观察显示转染和筛选后,EGFP表达阳性的MCF7细胞的比例分别达到(95.6±2.6)%(空shRNAmir载体)、(97.1±1.7)%(Calpain-2 shRNAmir1)和(97.7±0.2)%(Calpain-2 shRNAmir 2),差异无统计学意义(P>0.05);Western blot结果显示,基因沉默的MCF7细胞中calpain-2的表达被明显抑制,相对于空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,差异有统计学意义(P<0.01),calpain-2的表达下调到21.5%(Calpain-2 shRNAmir 1)和18.8%(Calpain-2 shRNAmir 2),空shRNAmir载体转染的MCF7细胞中calpain-2的表达与未转染的MCF7细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05);比较calpain-2基因沉默和空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,发现integrinβ4均被水解,水解片段的分子量主要有200 k D、130和95 k D;calpain-2基因沉默后,calpain-2基因沉默MCF7细胞中200 k D的水解片段比空shRNAmir载体转染的MCF7细胞减少(P<0.01)。结论:在乳腺癌细胞MCF7中,calpain-2可能参与integrinβ4的200 k D片段的形成,从而参与调整integrinβ4的构象变化。     

益母草碱油包油微乳在小鼠体内组织分布研究

目的 探讨益母草碱油包油微乳剂和益母草碱混悬剂在动物体内药物代谢动力学特征和组织靶向性。方法 采用高效液相色谱法测定小鼠血浆与组织中益母草碱浓度,计算药物代谢动力学参数。结果 与混悬剂比较,益母草碱微乳剂在体内平均滞留时间提高了7 h,其相对生物利用度为550.684%;益母草碱微乳剂AUC(0→∞)在小鼠各组织的分布整体提高到混悬组的3.626~26.265倍;益母草碱微乳剂在心、肺和脑组织的靶向指标分别为1.044、1.335和4.772。结论 益母草碱油包油微乳提高了生物利用度,对脑组织具有较好的趋向性分布。     

出血型烟雾病特征及出血危险因素分析

目的:分析出血型烟雾病特征及出血危险因素,为临床预防以及治疗提供理论基础。方法:研究阶段为2010年1月～2017年12月,共纳入研究对象103例开展回顾性分析,均为出血型烟雾病患者,分析其临床特征、出血危险因素以及临床治疗效果。结果:经过治疗,跟踪随访3个月,A组MRS评分改善优于B组,差异显著,有统计学意义(P0.05);A组再出血率明显低于B组,差异显著,有统计学意义(P0.05)。结论:针对出血型烟雾病采取手术治疗可降低再出血率。     

肺癌脑转移患者脑转移灶体积与患者预后的关系研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移患者脑转移灶体积与预后的关系。方法 2012年1月至2016年6月接受全脑放疗的64例NSCLC脑转移患者进行回顾性分析,根据放疗前脑转移灶体积,将患者划分为大体积组和小体积组,对比两组基本特征、放疗结束3个月时脑转移灶局部控制情况及总生存情况。采用Cox回归模型,评估患者预后的影响因素。结果小体积组(体积7.4 cm~3)、大体积组(体积≥7.4 cm~3)各32例患者,两组患者总体缓解率、疾病控制率对比,差异均无统计学意义(P0.05)。大体积组中位生存时间7.5个月,明显短于小体积组11.2个月,差异有统计学意义(P0.05)。卡氏体能状态评分是总生存时间的独立保护因素,年龄、脑转移灶体积,是总生存时间的独立危险因素。结论对NSCLC脑转移接受全脑放疗的患者,放疗前脑转移灶体积虽然不影响肿瘤近期控制效果,但较大的肿瘤体积可能与较短的生存时间有关。     

松果菊苷对db/db糖尿病小鼠心肌细胞脂质代谢紊乱的改善作用

目的 探究肉苁蓉提取物松果菊苷(echinacoside)对糖尿病心肌病db/db小鼠模型心肌细胞糖脂代谢紊乱是否具有保护作用及可能作用机制。方法 将29只SPF级6周龄雄性db/db小鼠和db/m小鼠,适应性饲养1周后,按照数字表法随机取9只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组,n=9),将db/db小鼠分为糖尿病心肌病组(db/db组,n=10)和松果菊苷干预组(db/db+ECH组,n=10)。其中db/db组和db/m组每天按照0.05ml/10g标准进行0.9%NaCl溶液灌胃10周。db/db+ECH组小鼠按松果菊苷300mg/(kg·d)灌胃干预10周。每周监测各组小鼠体质量,观察小鼠摄食、饮水及活动情况。于小鼠第18周龄用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠并处死,取尾静脉血测定空腹血糖(FBG);分离血清检测各组小鼠血清脂质水平变化;采用HE染色观察心肌组织病理改变;苏丹红Ⅱ染色观察心肌细胞脂质蓄积情况;免疫印迹(Western blot)法检测糖脂代谢相关蛋白PPAR-α、CPT -Ⅰ、CD36和GLUT-4的表达水平;real-time PCR测定心肌细胞PPAR-α、CPT -Ⅰ、CD36和GLUT-4 mRNA的表达水平。结果 与db/m组比较,db/db组小鼠体质量、血糖和血脂水平显著升高(P＜0.05);同时HE染色切片显示,与db/m组比较,db/db组小鼠心肌细胞可见明显的肥大、坏死,心肌细胞排列结构紊乱;而db/db+ECH组小鼠心肌细胞形态有所缓解,细胞间隙减少,排列较规则。苏丹红Ⅱ染色观测心肌细胞脂质蓄积结果提示相较于db/m组,db/db组小鼠心肌细胞发生严重的脂质变性,可见不同大小的脂质液泡,同时伴有PPAR-α、CPT -Ⅰ和GLUT-4蛋白表达量显著降低(P＜0.01),CD36蛋白表达量显著增加(P＜0.01),且PPAR-α、CPT -Ⅰ、GLUT-4 mRNA表达量明显降低,CD36 mRNA水平上调(P＜0.01)。与db/db组比较,db/db+ECH组上述指标均有明显逆转,且切片观察小鼠心肌细胞脂质沉积显著减少。结论 松果菊苷能够明显改善db/db小鼠心肌细胞糖脂代谢紊乱,其机制可能与通过调控PPAR-α/CPT -Ⅰ信号转导途径有关。     

湖北某县中学生性侵犯发生情况及影响因素分析

目的分析湖北省某县中学生性侵犯发生情况及其影响因素,为制定儿童性侵犯预防策略提供科学依据。方法于2016年3月采用分层整群抽样方法抽取某县1 476名中学生进行问卷调查,收集学生对儿童性侵犯的认知以及性侵犯发生情况,应用χ~2检验和多因素logistic回归进行统计分析。结果在1 476名应答者中遭受本研究所提及的6种形式中的任意一种性侵犯的比例为20.7%,其中男生和女生报告的比例分别为27.4%和13.7%,差异有统计学意义(χ~2=42.008,P=0.000)。多因素logistic回归分析显示,女性(OR=0.421)是儿童遭受性侵犯的保护因素;父亲外出半年以上(OR=1.510)、高中生(OR=1.961)、对儿童性侵犯有足够认知的学生(OR=1.332)是儿童遭受性侵犯的危险因素。结论该县中学生性侵犯发生率较高,男生遭受性侵犯的比例高于女生;父亲外出半年以上、高中生、对儿童性侵犯知识有足够认知是儿童遭受性侵犯的危险因素。