重组HIV表面抗原gp120的表达纯化及免疫学鉴定

为研制具有流行特点的HIV血清学诊断试剂,采用pET系统表达HIV-1表面糖蛋白gp120。研究发现,全长的gp120在E.coli中不能有效表达;N端半长的gp120可以表达,但表达量很低;仅保留N端1/3的gp120(包含gp120V1/V2抗原决定簇)有效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的18%;Westernblot显示较好的反应原性;通过金属螯合层析,产物得到完全纯化。在这些结果的基础上,我们表达了流行株的gp120片段,为探索gp120在大肠杆菌的高效表达,建立针对中国人群的HIV血清学诊断系统奠定基础。     

恒磁场抑制缺血缺氧条件下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡

目的:研究恒磁场对体外缺血缺氧培养条件下大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs) 凋亡的影响并探讨其作用机制.方法:采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞(MSCs).经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后,将骨髓间充质干细胞(BMSCs)在缺血缺氧条件下培养,通过TUNEL检测比较不同组别细胞的凋亡率和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中特定蛋白质的变化.结果:①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定,提示骨髓间充质干细胞培养成功.②缺血/缺氧组与缺血/缺氧+磁场组比较,缺血缺氧组的凋亡率显著性增加,Akt磷酸化水平显著上升(P＜0.05).提示恒磁场可以使PI3K(Phosphoinositide-3kinase)/Akt(ProteinkinaseB,PKB)信号通路被激活而抑制凋亡的发生.结论:恒磁场通过激活PI3K/Akt信号通路抑制体外缺血缺氧条件下培养的骨髓间充质干细胞的凋亡.     

番茄砧木种子萌芽期与幼苗期耐冷性关系

为了探讨番茄砧木耐冷性鉴定的便捷指标,筛选耐冷砧木材料,研究了不同温度(28、20、15℃)对40份番茄砧木种子萌芽相关指标的影响及低温胁迫(10℃/3℃)下幼苗冷害指数的变化,并分析了幼苗冷害指数与种子萌芽指标的相关性。结果表明:不同砧木材料种子在28℃条件下的发芽率、发芽指数、活力指数等差异不大,但15、20℃条件下的相关指标及其与28℃的相对值差异显著;不同砧木材料幼苗在昼夜温度10℃/3℃低温胁迫下的冷害指数也存在显著差异,且与低温条件下种子萌芽相关指标呈极显著相关关系,但相关系数以20℃处理大于15℃处理;通过多元逐步回归分析建立的幼苗冷害指数回归模型中仅20℃下的相对发芽率及相对发芽指数入选,模型决定系数达0.984(P0.001);通过对幼苗冷害指数进行聚类分析,可将砧木材料分为耐冷、冷敏感和中间型3类,其中耐冷材料6份、冷敏感材料5份;而采用冷害指数回归模型入选的2个因子进行聚类分析的结果,除1个材料由中间型归为冷敏感型之外,其余39份材料的分类地位完全相同,表明可通过测定20℃条件下种子的相对发芽率和相对发芽指数,对番茄砧木的耐冷性进行早期便捷鉴定。     

自身抗体检测对自身免疫性肝炎的临床诊断价值

目的 通过对肝炎患者多种自身抗体检出率的比较,探讨其在自身免疫性肝炎中的临床诊断价值。方法 对75例自身免疫性肝炎（AIH）患者,64例非AIH肝炎患者和78例健康体检者进行自身抗体检测。采用免疫印迹法检测抗线粒体抗体-M2（AMA-M2）、抗肝肾微粒体-1抗体（LKM-1）、抗肝细胞胞质抗原-1抗体（LC-1）、抗可溶性肝抗原/肝‒胰抗原抗体（SLA/LP）;采用间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）,并对各检测指标进行比对分析。结果 AIH组患者ANA、AMA-M2、LKM-1、LC-1、SLA/LP检测阳性率分别为100.0%、28.0%、9.3%、1.3%、10.7%均高于非AIH组患者的56.2%、3.1%、0.0%、0.0%、0.0%,且除LC-1外其余差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 联合检测ANA、AMA-M2、LKM-1、LC-1及SLA/LP对诊断自身免疫性肝炎具有重要的临床意义。     

象山港硅藻赤潮过程中真菌群落演替及互作特征

[背景] 近岸海域赤潮的发生能显著改变包括真菌在内的微生物群落组成,进而影响海洋中碳氮元素循环。真菌是海洋中重要的分解者,但赤潮过程对真菌群落的影响少有报道。[目的] 探明赤潮过程对真菌群落的影响,对进一步阐释赤潮对生态系统中物质循环的影响具有重要意义。[方法] 针对2017年春季象山港硅藻赤潮,对真菌内源转录间隔区1（Internally Transcribed Spacer 1,ITS1）序列进行高通量测序,研究赤潮过程中真菌群落响应及共现性特征。[结果] 真菌群落的α多样性指数在赤潮暴发的各阶段差异显著,而且均与磷酸盐、硝酸盐和亚硝酸盐有显著相关性（P<0.05）。子囊菌门（Ascomycota,90.2%）和担子菌门（Basidiomycota,8.27%）是本次硅藻赤潮的优势菌门,其中子囊菌门遍布赤潮暴发的4个阶段;锤舌菌纲（Leotiomycetes,16.1%）和散囊菌纲（Eurotiomycetes,9.3%）是纲水平上的主要优势类群。赤潮暴发过程中硝酸盐、亚硝酸盐、磷酸盐和温度等环境因素的改变,驱动真菌群落组成及结构发生显著变化。Helotiales、Eurotiales、Xylariales、Sacc haromycetales和Agaricostilbales构成了真菌群落共现网络的主体。[结论] 真菌群落在赤潮的各阶段具有显著的演替特征,赤潮藻生消是引起真菌群落演替的主要因素,但是环境因子也扮演着重要角色。赤潮过程中,真菌群落同类群内的互作要强于不同类群间的互作,这对维持群落的稳定性具有重要意义。     

虎耳草石油醚提取物的化学成分分析

目的:对虎耳草微波辅助-石油醚提取物的化学成分进行研究。方法:采用气相色谱-质谱-数据系统联用技术对虎耳草微波辅助-石油醚提取物的化学成分进行分析鉴定。结果:石油醚提取物共鉴定出102种成分。结论:采用气相色谱-质谱-数据系统联用技术能够对低极性部位的化学成分快捷、简便、准确分析。     

不同林分类型的油松针叶对两种色型油松毛虫生长发育的影响

通过室内饲养的方法,研究了油松两种林分类型针叶对不同色型油松毛虫生长发育的影响。结果表明:与黄色型幼虫相比,黑色型幼虫体重增长较快,雌蛹较重,怀卵量较大,存活率较高;与纯林油松针叶相比,混交林油松针叶延长了油松毛虫的发育历期、抑制了油松毛虫的生长发育,表明油松混交林针叶内可能含有不利于两种色型的油松毛虫幼虫生长发育的物质。     

妊娠合并甲状腺功能减退症26例妊娠结局分析

目的：对妊娠合并甲状腺功能减退症进行分析,探讨其对母儿的影响,及孕期筛查甲状腺功能有无意义。方法：对我院26例妊娠合并甲减的临床资料进行回顾性统计分析。结果：26例妊娠合并甲减病例中有1例早产（孕33周）,其余25例患者维持至足月妊娠,其中剖宫产17例（65.38%）,合并妊娠期高血压疾病5例（19.23%）,妊娠期糖尿病3例（11.53%）,羊水胎粪污染3例（11.54%）,新生儿无先天性甲减。经过治疗后甲状腺功能减退孕妇的剖宫产率,糖尿病发生率、高血压疾病发生率、羊水粪染的发生率较对照组增加;但两组妊娠结局差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：妊娠合并甲状腺功能减退症孕妇多种妊娠并发症的发病率高于正常孕妇,应加强对妊娠甲减的早期筛查及治疗,可有效降低不良妊娠结局,减少先天性甲低的出生。     

转GmDREB3基因小麦对大鼠免疫系统的影响

目的：研究转GmDREB3基因抗旱小麦长期食用对大鼠免疫系统的影响。 方法：将140只大鼠随机分为7组,分别为AIN93对照组（CN）、转GmDREB3基因小麦低、中、高剂量组（GL、GM、GH）和亲本小麦低、中、高剂量组（nGL、nGM、nGH）,各组大鼠按比例掺入一定量小麦喂养90d后,取外周血进行全血淋巴细胞分型、免疫球蛋白和补体、细胞因子、免疫器官重量及肝肾组织免疫复合物检查。结果：全血淋巴细胞分型结果显示,与CN组相比,nGM组雌性大鼠CD4细胞百分比明显减少（P<0.01）;GM组和nGM组雄性大鼠T淋巴细胞明显降低（P<0.05或P<0.01）;GH、nGL、nGM、nGH组B淋巴细胞明显降低（P<0.05或P<0.01）;nGL组NK细胞明显升高（P<0.05）。转基因小麦与相应亲本小麦组比较,除nGM组雌性大鼠CD4细胞百分比与GM组相比明显减少（P<0.01）外,其他各指标组间均无显著性差异（P>0.05）。脏器重量结果显示,与CN组相比,各剂量组转基因小麦和亲本小麦雄性大鼠胸腺重量明显降低（P<0.01）;但转基因小麦和亲本小麦相应剂量组之间比较无显著性差异（P>0.05）。其他各检测指标各组间均未见显著性差异（P>0.05）。结论：转GmDREB3基因小麦喂养大鼠90d未对大鼠免疫系统产生不良影响。     

IARS2在胃癌预后中的临床应用

为检测IARS2和MYO5B在胃癌组织中的表达并探讨IARS2表达与胃癌患者临床病理特征及预后的关系,本研究使用荧光定量PCR (quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)及Western blotting检测30例胃癌组织和癌旁组织中IARS2和MYO5B的表达,使用线性回归分析两者m RNA表达相关性。使用免疫组化方法检测86对胃癌组织及癌旁组织中IARS2蛋白的表达情况,根据免疫组化IARS2表达情况将胃癌患者分为IARS2阳性组和阴性组,比较两组患者临床病理特征及预后情况。结果发现,较之癌旁组织,IASR2在胃癌组织中显著高表达(p<0.05),而MYO5B在胃癌组织中显著低表达(p<0.05),且两者表达负相关(r=0.5768, p=0.0008)。免疫组化显示IASR2阳性细胞在胃癌组织中的阳性率为70.9%。IASR2高表达提示更高的胃癌淋巴结转移(p=0.041)和TNM分期(p=0.004)及更低的患者术后5年总生存率(p=0.000 6)。研究提示IARS2在胃癌组织中高表达,可作为评估胃癌预后的标志物。