結晶胰島素的全合成

結晶的牛胰島素已經合成,它的生物活力,結晶形状都与天然胰島素的相同,因而标志着世界上第一个蛋白质的人工合成。在人工合成的A及B鏈分別都能和其对应的天然鏈組合成功并都得到半合成結晶胰島素的基础上,人工合成的A及B鏈組合所得的具有1.25—2.5%胰島素活力的氧化产物,經过两次酸性仲丁醇抽提,比活力上升到天然胰島素50%左右,在含有丙酮及鋅离子的pH6.2的檸檬酸緩冲液中、即得人工合成的牛胰島素結晶。除了用小白鼠惊厥法和兎血糖降低法所测定的生物活力以及其結晶形状均与天然胰島素完全一致以外,人工合成的結晶牛胰島素的电泳,层析行为都与天然胰島素相同,酶水解物的电泳层析双向图譜也与天然牛胰島素的一致。人工合成的結晶牛胰島素能和抗天然牛胰島素血清产生沉淀反应,其在琼脂双扩散皿上所产生的沉淀条紋与天然結晶牛胰島素和該抗血清所产生的条紋汇合。它与豚鼠抗天然胰島素血清中和后,生物活力即丧失,这說明在免疫化学性质上也和天然胰島素相同。     

胰岛素B鏈中肽段的合成 Ⅸ.胰岛素B鏈的合成及其与天然A鏈重组合后胰岛素活力的恢复

有关胰岛素A及B鏈中肽段的合成工作已在好几家实验室进行。最近,Katsoyannis等用简报方式报导了A及B链的合成,并分别和天然的B及A组合后所得的产物能表现出约0.5—1.0%的胰岛素活力。Meienhofer等也报导了A及B链的合成并指出了两条肽链衍生物的混合物经钠-液     

胰岛素B链中肽段的合成 Ⅶ.胰岛素B链C-端十四肽衍生物的合成

胰岛素B链中C-端十四肽的衍生物,即Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·(γ-OCH_3)·Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3(B_(17-30))分别从Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·ONP(B_(17-20)ONP)和H·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3(B_(21-30b))直接缩合或Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH(B_(17-23a))和H·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lyg·Ala·OCH_3(B_(24-30b))借DCCI法缩合而得。B_(21-30b)由Cbz·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3(B_(21-30))经溴化氢的三氟醋酸溶液处理后获得;B_(17-20)ONP系由Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·OH和对硝基苯酚用碳二亚胺法缩合而成。按新的方案(3+7)将Cbz·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH(B_(21-23a))和B_(24-30b)用DCCI法缩合生成B_(21-30),其物理常数与以前用(2+8)方案合成的十肽衍生物的数据相同。B_(21-23a)由Cbz·(γ-OCH_3)·Glu·ONP和(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH缩合生成;B_(24-30b)系由Cbz·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3经催化氢化而得。该七肽衍生物又由Cbz·Phe·Phe·Tyr·Thr·OH(B_(24-27a))和H·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3以DCCI法缩合而得。B_(17-23a)则由B_(17-20)ONP和H·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH 缩合而成。     

胃泌素类似物的人工合成和泌酸活性研究

本文采用液相合成法合成了九种胃泌素类似物,并用大白鼠胃灌流技术测定其泌酸活性。若以五肽胃泌素(Boc-β-Ala-Trp-Met-Asp-phe-NH_2,Boc-五肽)的泌酸活性为100％,则胃泌其它类似物的活性分别为:Boc-四肽(Boc-Trp-Met-Asp-Phe-NH_2)30.32％,Boc-三肽(Boc-Met-Asp-phe-NH_2)0.13％;Fmoc-五肽(Fmoc-β-Ala-Trp-Met-ASP-Phe-NH_2)171％,Fmoc-四肽(Fmco-Trp-Met-Asp-Phe-NH_2)32.88％,Fmoc-三肽·(Fmoc-Met-Asp-Phe-NH_2)0.17％,五肽·TFA(β-Ala-Trp-Met-Asp-Phe-NH_2·TFA)17.45％,四肽·TFA(Trp-Met-Asp-phe-NH_2·TFA)5.58％。 实验结果显示四肽胃泌素类似物的活性这比三肽的高,表明胃泌素C-端片段中色氨酸残基对泌酸活性十分重要。在胃泌素类似物的N-端导入保护基同样提高它们的生物学活性,而Fmoc-保护基的作用还强于Boc-保护性。推测其主要原因是在N-式加上一个疏水性强的基团后有利于形成一个与受体相结合的活性构象。     

板栗花粉发芽的影响因子及发芽动态的研究

本试验以25年生实生板栗为试材,研究了蔗糖、硼、温度及琼脂等因子对板栗花粉发芽的影响,并对发芽动态作了仔细观察。结果表明:板栗花粉在34-36℃条件下,以5-7.5%的蔗糖,700-1100 ppm的硼酸水溶液培养最好;普通蔗糖水溶液亦可使花粉达到一定的发芽率和花粉管生长到一定的长度,但加硼可使其提前发芽。