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目的:克隆B19病毒XA株VP1u基因,构建真核重组表达载体.方法:从已构建好的B19病毒XA株原核表达载体中获得VP1u基因,将其克隆入真核表达载体plRES2-EGFP中,经酶切鉴定并测序验证后,获得真核表达载体plRES2-EGFP-VP1u.将其转染至HeLa细胞,提取细胞总蛋白,用Western blot技术检测VP1u蛋白的表达.结果:成功构建了携带人B19病毒VP1u基因的真核表达载体plRES2-EGFP-VP1u,荧光显微镜下可见pIRES2-EGFP-VP1u转染HeLa细胞后表达EGFP蛋白而发出绿色荧光,Western blot证明VP1u蛋白在HeLa细胞中表达.结论:成功构建了携带人B19病毒VP1u基因的真核表达载体plRES2-EGFP-VP1u并在HeLa细胞中正确表达,为今后B19病毒VP1u基因疫苗的研究奠定基础. 相似文献
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PBL教学以问题为核心,以启发的方式和讨论的方式进行教学,该教学方法可以充分调动学生学习的主动性,比传统的教学方法更能有效完成儿科学实习教学,且有利于早期培养医学生良好的临床问题处理能力。本文论述如何将PBL教学模式引入儿科学实习教学,以及PBL教学法在儿科学实习教学中需注意的问题:问题设计合理、根据病人的不同调整教学方法、根据实习同学的不同调整教学内容和带教老师正确掌握角色任务。 相似文献
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