全文获取类型
收费全文 | 157篇 |
免费 | 0篇 |
国内免费 | 98篇 |
学科分类
生物科学 | 255篇 |
出版年
2019年 | 1篇 |
2017年 | 1篇 |
2014年 | 1篇 |
2012年 | 5篇 |
2011年 | 4篇 |
2010年 | 5篇 |
2009年 | 8篇 |
2008年 | 11篇 |
2007年 | 11篇 |
2006年 | 10篇 |
2005年 | 11篇 |
2004年 | 16篇 |
2003年 | 17篇 |
2002年 | 13篇 |
2001年 | 15篇 |
2000年 | 15篇 |
1999年 | 16篇 |
1998年 | 10篇 |
1997年 | 21篇 |
1996年 | 14篇 |
1995年 | 9篇 |
1994年 | 13篇 |
1993年 | 3篇 |
1992年 | 3篇 |
1991年 | 2篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 2篇 |
1988年 | 1篇 |
1987年 | 5篇 |
1985年 | 3篇 |
1984年 | 1篇 |
1982年 | 2篇 |
1980年 | 3篇 |
1977年 | 2篇 |
排序方式: 共有255条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
霍乱弧菌肠毒素基因在大肠杆菌的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
霍乱毒素基因在大肠杆菌获得了表达,在大肠杆菌中产生的毒素,具有霍乱毒素同样的生物活性、抗原性和免疫原性。但它产生的霍乱毒索,90%是保持在胞内的,其毒性可被胰酶激活。 相似文献
2.
采用基因工程方法制取人胸腺素α原获得成功。用20ug/ml植物血球凝集素(PHA)和500U/ml重组人白细胞介素2(IL-2)联合刺激人胎儿胸腺细胞,从中提取总RNA,经反转录PCR获得了人胸腺素α原cDNA;将之克隆入pUC19中,序列测定表明与已报道序列一致,进一步将之亚克隆入原核表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5a.观察到在不改变氨基酸编码的前提下,增加胸腺素a原上游引物中A、T含量,可以明显提高胸腺素α原的表达量,同时,不同培养基对它的表达也有影响。胸腺素α原在大肠杆菌中以可溶形式表达,不需复性。初步活性测定显示,它可明显刺激人外周血淋巴细胞E-玫瑰花结形成率。重组人胸腺素α原在大肠杆菌中表达,为其临床应用及基础研究奠定了基础。 相似文献
3.
生技霉素稳定型基因工程菌的构建* 总被引:5,自引:0,他引:5
运用同源重组技术将异戊酰基转移酶基因整合至螺旋霉素产生菌(Streptomyces spiramyceticus F21) 的染色体上,构建了稳定的生技霉素基因工程菌。在不加压的情况下传代,菌种携带选择性遗传标记情况、生长、发酵效价及发酵产物的TLC分析均表明此基因工程菌有较好的遗传稳定性,且发酵效价及产物的组分均得到改善。Southern杂交证明外源基因在螺旋霉素产生菌染色体上的整合情况。 相似文献
4.
序列特异的三锌指多肽的构建及其在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
在获得单一锌指突变体的基础上,以小鼠转录因子Zif268的三锌指DNA结合区为模板,利用重叠(Over-lap)PCR技术,获得了关键氨基酸位点同时突变的三锌指突变体ZF123、2ZF123。ZF123、2ZF123分别克隆进pUC-18质粒,序列测定正确后,以pGEX-2T为表达质粒,在大肠杆菌JM109中实现了功能性的表达。经SDS-PAGE分析,表达出了分子量34.0kD的融合蛋白,扫描分析其含量在20%左右。菌体经超声波破碎后,对可溶性融合蛋白进行了纯化得到了游离的目的蛋白,为进一步的DNA结合特性分析、杂交转录因子的构建等奠定了基础。 相似文献
5.
肿瘤免疫治疗的一种新技术--肽脉冲曲殿波刘传暄综述马清钧审校(军事医学科学院生物工程研究所北京100850)前言利用疫苗来治疗肿瘤的想法由来以久,甚至可以追溯到200年前[1]。本世纪50年代,研究人员发现移植过肿瘤组织的动物在进行肿瘤移植时就可以产生排斥反应[1]引起这种反应的抗原被称之为肿瘤特异性移植抗原(Tumorspecifictransplantationantigen,TSTA)... 相似文献
6.
人甲状旁腺激素在大肠杆菌中的表达及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
化学合成人甲状旁腺激素(hPTH)全长基因,克隆到大肠杆菌表达载体pBV220和pET22b中,获得了高表达。经破菌、阳离子交换层析、反相层析纯化获得了纯度大于95%的纯品。N端测序、质谱分析结果表明重组hPTH 结果完整,N端无Met或fMet。生物活性试验证明重组hPTH具有激活腺苷酸环化酶、增加骨质量和骨密度等作用。 相似文献
7.
8.
人脐静脉血管内皮细胞的分离、培养、鉴定及试验研究 总被引:7,自引:0,他引:7
血管内皮细胞体外培养,在血管再生、新血管生成机理、内皮细胞在心血管系统疾病中的作用、内皮细胞与造血的关系等方面的研究中有很高的应用价值。本研究借鉴了前人的工作,建立了胶原酶灌流消化获得人脐静脉血管内皮细胞并进行体外培养的方法,探讨了影响人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分离培养的影响因素。同时应用建立的HUVEC体外培养进行了内皮抑素的抑制活性检测,证明了内皮抑素对于激活增殖的HUVEC的抑制作用,为今后的试验研究打下了基础。 相似文献
9.
10.
大环内酯类抗生素基因工程是近年来生物工程领域研究的一个热点 ,利用基因工程改造大环内酯类抗生素合成基因 ,已经合成了 10 0多种“非天然”的天然化合物 ,为筛选新抗生素开辟了新的途径。本研究以糖多孢红霉菌A2 2 6基因组DNA为模板 ,先用PCR扩增出红霉素合成基因eryKR6两侧片段 ,再用重叠PCR将其拼接成去除KR6的约 3.2kbDNA片段 ,并克隆于pWHM3载体 ,构建了同源重组质粒pWHM2 2 0 1。用PEG介导将pWHM2 2 0 1转入糖多孢红霉菌A2 2 6原生质体。PCR鉴定和生物活性检测均显示pWHM2 2 0 1已重… 相似文献