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蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide somerase,PDI)在体内或体外均可以非特异地催化其它蛋白质的二硫键的形成、还原和异构化,进而辅助蛋白的折叠和复性。近来发现PDI还具有非ATP依赖的分子伴侣的功能。鉴于PDI具有的重要功能,拟利用PDI来辅助基因工程产品的复性,如包含体蛋白(尤其是含有二硫键的蛋白),这将为基因工程产品的下游纯化复性,开拓新的思路。PDI含有两个硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)同源区a区和a′区,各含有一个CGHC活性位点,与TRX的CGPC位点同源。a区和a′区各具有50%的二硫键异构 相似文献
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1988年Olins[1]发现T7噬菌体基因10的先导序列(T7g10L)具有明显的促进基因翻译的作用.本文构建了含T7g10L的表达载体pSC34,并尝试表达了几个不同类型的基因.1材料与方法1.1菌株大肠杆菌菌株TAP106为本室储存.TAP10... 相似文献
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新基因Restin的克隆及比较生物学分析 总被引:4,自引:2,他引:4
采用PCR介导的减法杂交技术,从全反式维甲酸诱导的HL-60细胞中克隆得到一新基因,该基因编码219个氨基酸.借助生物信息学分析技术,发现该基因表达蛋白与神经细胞生长抑制因子(Necdin)的功能结构域高度同源(49%),均为碱性蛋白,命名为Restin(细胞静息相关蛋白).更有意义的是,同源搜索发现Restin,Necdin和Mages(黑色素瘤相关抗原家族)为同一蛋白家族,提示Restin和Mages是两类具有某种联系而功能又不同的蛋白质. 对所有这些蛋白进行综合分析发现,它们分别属于两个不同的亚家族,碱性蛋白家族和酸性蛋白家族,其中Restin,Necdin和Mage D1含有碱性同源结构域(理论pI为8.6~10.1), 主要在终末分化细胞中表达,在肿瘤组织极少表达或不表达,实验结果表明,Necdin可以与转录因子(E2F1)及p53相互作用,从而抑制细胞增殖,推测此类蛋白可能与细胞静息状态相关;而Mage A,C等表现为酸性同源结构域(理论pI为4.2~4.9),主要在肿瘤组织和胎儿组织中表达,推测此类蛋白可能与细胞增值有关.这两类蛋白是否构成一对与细胞周期调控相关的正负系统值得进一步深入研究. 相似文献
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溶氧反馈分批补料高密度培养人骨形成蛋白-2工程菌 总被引:2,自引:0,他引:2
对表达人骨形成蛋白-2成熟肽的基因工程大肠杆菌E.coli DH5α/pDH-B2m在500mL摇瓶中进行了培养条件的摸索实验,并在此基础上扩大至NBS Bioflo IV20L发酵罐,利用溶氧反馈-分批补料培养技术:在培养过程中保持适当的溶解氧(40%),以溶氧值在线反馈控制搅拌速度及流加补料培养基,使细菌保持适当的比生长率,成功地进行了工程菌的高密度培养,最终菌体密度达OD600=57,每升干菌量22.8g,目的蛋白的表达量占细菌总蛋白的30%,人骨形成蛋白-2成熟肽的理论产率达到3.59g/L。 相似文献
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对表达人骨形成蛋白2成熟肽的基因工程大肠杆菌E.coli DH5α/pDH-B2m在500mL摇瓶中进行了培养条件的摸索实验,并在此基础上扩大至NBS Bioflo IV 20L发酵罐,利用溶氧反馈-分批补料培养技术:在培养过程中保持适当的溶解氧(40%),以溶氧值在线反馈控制搅拌速度及流加补料培养基,使细菌保持适当的比生长率,成功地进行了工程菌的高密度培养,最终菌体密度达OD600=57,每升干菌量22.8 g,目的蛋白的表达量占细菌总蛋白的30%,人骨形成蛋白2成熟肽的理论产率达到3.59 g/L。
相似文献
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大肠杆菌表达系统表达载体的类型及其研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
柴玉波 《国外医学:分子生物学分册》1997,19(4):160-162
大肠杆菌表达系统是基因工程中不可缺少的工具,近年来,有关大肠杆菌表达载体的研究很多,本就其种类及其进展作一综述。 相似文献
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