B-RAF基因特异的siRNA干扰对胃癌BGC823细胞的影响

为探讨B-RAF基因特异的siRNA干扰对胃癌BGC823细胞的增殖和凋亡的影响, 设计并合成B-RAF小分子干扰RNA(B-RAF-siRNA)和阴性对照siRNA, 用TransMessenger介导转染胃癌BGC823细胞, RT-PCR分析检测胃癌BGC823细胞中B-RAF基因以及Bcl-2基因的表达; MTT检测胃癌BGC823细胞增殖情况; 流式细胞仪检测细胞凋亡情况, 并与对照组进行比较。TransMessenger能够有效介导B-RAF-siRNA和阴性对照siRNA转染胃癌BGC823细胞, TransMessenger介导的B-RAF-siRNA有效地抑制胃癌BGC823细胞B-RAF以及Bcl-2基因的表达, 与对照组相比, 抑制率达90.0%以上, 最高达100%; 同时明显抑制胃癌BGC823细胞增殖; 促进胃癌BGC823细胞的凋亡(P < 0.01)。B-RAF基因特异的siRNA干扰能有效地抑制胃癌BGC823细胞中B-RAF基因以及Bcl-2基因的表达, 同时促进胃癌细胞凋亡和抑制胃癌细胞增殖。     

胃癌发展相关阶段中E-cadherin基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

为了研究E cadherin基因启动子甲基化在胃癌发生及发展阶段中的作用 ,我们采用甲基化特异性PCR和免疫组化的方法对异型增生 (2 3例 )、早期胃癌 (2 0例 )和进展期胃癌 (2 0例 )石蜡标本进行启动子甲基化状态及蛋白表达的分析。结果表明E cadherin基因启动子在异型增生、早期胃癌和进展期胃癌中均有甲基化 ,其阳性率分别为78 3% ,80 %和 90 % ,经χ2 检验各病例组与正常组 (30 % )比较均有差异 (P <0 0 5 ) ,但各病例组间没有差异 (P >0 0 5 ) ;进展期胃癌E cadherin蛋白表达全部阴性 ,早期胃癌 70 %阴性 ,异型增生中无蛋白阴性 ,在早期胃癌和进展期胃癌 34例蛋白表达阴性的标本中 31例有启动子甲基化 (91 2 % ) ,蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关 (P <0 0 1)。表明E cadherin启动子甲基化是胃癌发生的早期事件 ,也是胃癌发生、进展的重要事件     

胃癌中APC基因I1307K突变及蛋白质表达

为探讨肿瘤抑制基因APC结构及表达异常与胃癌发生、发展的关系,采用ARMS PCR检测胃癌中APC基因I1307K突变存在与否,免疫组织化学方法分析胃癌中APC蛋白表达水平。结果表明,在 62例胃癌高发区易感人群血液标本及45例胃癌中未检测到I1307K突变;胃癌（早期、进展期）中APC蛋白表达阳性率显著低于正常黏膜,进展期胃癌中APC蛋白表达阳性率显著低于早期胃癌,淋巴结转移阳性的胃癌中APC蛋白表达阳性率显著低于淋巴结转移阴性者。因此认为I1307K突变可能与国人胃癌发生无明显相关;APC蛋白低表达与胃癌发生、进展及淋巴结转移密切相关。 Abstract:In order to explore the correlation of the abnormalities of tumor suppressor gene APC with the carcinogenesis and progression of gastric cancer.The I1307K mutation of APC gene in gastric cancer was analysed using Amplification Refractory Mutation System PCR(ARMS ,PCR),also the expression of APC protein in gastric cancer of different stages was detected by immunohistochemical method.We found that there wasn't I1307K mutation of APC gene in 62 cases of blood samples of susceptible population in high incidence areas of gastric cancer and 45 cases of gastric cancer tissues.The positive rates of APC protein in gastric cancer (both early and progressive gastric cancer) were significantly lower than that in normal mucosa,the positive rates of APC protein in progressive gastric cancer were significantly lower than that in early gastric cancer,the positive rates of APC protein in gastric cancer with lymph node metastasis were significantly lower than that in gastric cancer without lymph node metastasis.So it was thought that there might be no correlation between the I1307K mutation of APC gene and carcinogenesis of gastric cancer in China,but the decreased expression of APC protein was closely related to the carcinogenesis,progression and lymph node metastasisof gastric cancer.     

低氧模拟剂氯化钴对胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达的影响

摘要: S100A4基因是肿瘤侵袭转移相关的重要基因, 该基因高表达与胃癌浸润、淋巴结转移及胃癌细胞体外侵袭力密切相关。为探讨S100A4基因高表达的机制, 文章应用低氧模拟剂氯化钴处理胃癌细胞BGC823, RT-PCR、免疫组化、免疫荧光及Western blotting方法分别检测BGC823细胞中S100A4 mRNA及蛋白表达情况。结果显示, 氯化钴处理胃癌BGC823细胞后, S100A4 mRNA及蛋白表达明显增加。提示低氧模拟剂氯化钴可促进胃癌细胞BGC823中S100A4 基因表达。     

PD-L1 Ig在缓解肾移植急性排斥反应中的免疫调节作用

目的:探讨PD-L1 Ig(Programmed death ligand-1 immunoglobulin,程序性死亡配体-1免疫球蛋白)在缓解肾移植急性排斥反应中的免疫调节作用。方法:选择健康成年雄性Lewis大鼠24只作为供体,另取24只健康雄性Wistar大鼠作为受体。所选大鼠3个月龄,体重300 g±30 g,创建肾移植大鼠模型,并将其随机分为三组,空白对照组,对照组,和PD-L1 Ig组。空白对照组:灌注液,肾动脉灌注3分钟。PD-L1 Ig组:含1 m L的PD-L1 Ig的灌注液,肾动脉灌注3分钟。对照组不进行额外灌注操作。术后观察三组大鼠食欲、精神状态及生存情况。7天后取血标本观察肌酐、尿素氮、γ-干扰素(Interferon-γ, IFN-γ),白细胞介素-2(Interleukin-2, IL-2),白细胞介素-10 (Interleukin-10, IL-10)水平,同时三组各处死3只大鼠行肾脏病理学检查。结果:1.病理:对照组及空白对照组大鼠较模型大鼠有改善,仍有较多的炎细胞浸润,间质水肿,红细胞管型,肾小管上皮细胞脱落。而PD-L1 Ig组大鼠较模型大鼠、对照组及空白对照组有显著改善。2.生存状态和肾功能:PD-L1 Ig组大鼠生存时间最长50天,平均存活时间和体重均显著高于对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05);血肌酐、尿素氮水平显著低于对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。3.细胞因子变化:PD-L1 Ig组IFN-γ、IL-2水平显著低于空白对照组、对照组,差异均有统计学意义(P0.05);PD-L1 Ig组IL-10水平显著高于空白对照组、对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:PD-L1 Ig可降低IL-2和IFN-γ,提升IL-10,调节移植肾急性排斥反应的细胞因子平衡,改善肾功能,延长移植肾存活时间。