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骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)—6属于转化生长因子(transforming growth fac-tor)—β超基因家族,在骨的形成中具有重要作用,并受雌激素选择性上调.本研究利用RT—PCR从人胎盘组织中扩增BMP—6成熟肽的DNA片段,克隆到pGEx—5x—1中,构建GST—BMP6融合蛋白表达载体pGEx—BMP—6,转化E.coli DH5a.克隆质粒转化的工程菌,经IPTG诱导4h后,高效表达GST—BMP6融合蛋白,在SDS—PAGE上出现一新蛋白带,分子量约为42kD,约占总蛋白的25%,表达产物以包涵体形式存在.菌体超声破碎,经0.3%N—十二烷基肌氨酸钠(SKL)溶解包涵体,离心后的上清液加入0.6% Triton x—100整合SKL,然后利用谷胱甘肽Sepharose—4B亲和层析纯化.结合GST—BMP6的介质经洗涤、xa因子酶切得到纯度达95%的rhBMP—6蛋白。 相似文献
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