大鼠活体肺功能检测方法的建立及环境因素与体质量对其的影响

目的 建立一种稳定可靠、成功率高的大鼠活体肺功能检测方法。方法 校准小动物活体肺功能检测系统后,大鼠气管插管,检测肺功能各项指标,观察检测过程中外界环境变化、大鼠体质量改变对肺功能参数的影响。结果 外界的气流变化、震动因素会影响压力传感器,引起波形波动;体质量较大的大鼠(340～370)g功能残气量(FRC)、动态肺顺应性(Cdyn)、第100毫秒用力呼气容积(FEV100)、用力肺活量(FVC)、最大呼气中期流量(MMEF)均显著高于体质量较小大鼠(280～300)g,体质量对吸气阻力(RI)没有明显影响。结论 成功建立了简便可靠的大鼠活体肺功能检测方法;大鼠活体肺功能检测中要确保环境的稳定以及大鼠体质量的一致性。     

诱导多能干细胞与心脏再生

诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)研究的快速发展为心血管转化医学研究领域提供了新的策略. 诱导多能干细胞不仅具有与胚胎干细胞类似的多能性, 且巧妙地回避了胚胎干细胞面临的伦理学问题和免疫排斥反应. 心肌细胞等成体心血管细胞在发生心血管疾病后增殖能力有限, 而iPSCs 来源的心血管细胞在心脏再生治疗中颇具应用前景,是理想的细胞来源, 因此在基础医学和转化医学研究领域受到广泛关注. 就iPSCs 的发展过程及其在心脏再生中的应用作一综述, 并探讨目前iPSCs 在心脏再生临床转化中亟待解决的问题.     

CRISPR/Cas9技术联合AAV对Rosa-mTmG小鼠的MEF细胞进行编辑

目前,基因编辑技术已被广泛用于生物医学研究,本研究利用AAV(Adeno-Associated Virus)递送CRISPR/Cas9系统,实现高效率的基因编辑,并对特定组织细胞中的基因编辑进行了初步探索.我们首先采用Rosa-mTmG转基因小鼠来研究CRISPR/Cas9在小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblast,MEF)中的编辑效率;接着,我们构建了能够被AAV包装的SaCas9系统,并通过瞬转以及AAV介导递送的方式检测其基因编辑效率;最后,我们还构建了含有心肌特异启动子的cTNT-PX601-sgRNA以备后续研究.结果发现,与瞬转相比,AAV介导CMV-PX601-sgRNA在体外能够极大地提高细胞的基因编辑效率.另外,cTNT-PX601-sgRNA能够在心肌细胞中特异表达.我们的结果表明,利用AAV介导的CRISPR/Cas9系统在体外可以实现高效地基因编辑,为靶向修复基因缺陷疾病,特别是特定组织器官中的基因缺陷,提供了研究工具和实验依据.