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一组具有MADS-box结构域的转录因子在控制花器官的诱导与发育中起着重要作用.以水稻广陆矮4号(Oryza sativa L.Guang-Lu—Ai No.4)幼穗总RNA为模板,根据MADS-box保守区的序列设计简并性引物。利用3′-RACE的方法获得了2个新的水稻花发育相关MADS-box基因,分别命名为FDRMADS3和FDRMADS4;并利用5′-RACE的方法获得了该2个基因完整的cDNA序列,包括完整的编码区,5′-UTR和3′-UTR.它们编码的蛋白质都具有典型的MADS-box结构域和半保守的K区,其与水稻中其他家族成员的MADS-box结构域同源性高达90%以上,这说明它们都是典型的MADS-box基因. 相似文献
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从水稻基因文库中筛选到一个与人类待定肿瘤抑制基因QM同源的基因,命名为OSQM2.该基因片断长为3.1kb,编码一个具有184个氨基酸的高度碱性的蛋白质,与其他已知QM基因相比,该基因具有一个非常特殊的启动子,包含许多在植物中已发现的与抗逆有关的顺式作用因子,如:“G盒”,“DRE盒”,“MYC盒”等,故而该基因有可能是一个新的受环境胁迫因子诱导的基因,Southern杂交表明它以单拷贝形式存在于基因组中。 相似文献
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根据U2nRNA基因的保守性和结构特点设计引物,通过PCR法扩增U2snRNA连锁基因间区的DNA片段并进行顺序分析,证实在水稻中至少存在一组U2snRNA连锁基因。对水稻总DNA的PCR分析结果表明,水稻中可能还存在其他形式的连锁基因。PCR方法可以有效地应用于结构保守基因的连锁分析中。 相似文献
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普通野生稻中NBS同源序列的克隆和分析 总被引:9,自引:0,他引:9
已知的植物抗病基因大多数具有核苷结合位点(NBS)和富含亮氨酸重复(LRR)。根据NBS的保守区设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR),从普通野生稻基因组中克隆了4个不同的NBS同源序列(OSNBA1-OSNBA4)。同源性比较显示它们均与非TIR类的NBS序列相似,其中,OSNBA1与双子叶植物拟南芥的RPS2基因更接近;OSNBA2-OSNBA4与单子叶植物水稻的XA1、RPR1基因更相似。 相似文献
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淀粉胶电泳用于蛋白质成分的分析,分辨力十分高.自1955年Smithies用来分析人血清蛋白成分以来,对于各种动物血液及其他组织液蛋白成分的分析,包括个体种属间的差异,正常、病理下的比较,发育变异时的变化等诸方面,应用已十分广泛.从1956年开始,陆续有人报导淀粉胶电泳应用于昆虫血淋巴的研究结果.Chen发现果蝇(Drosophila)幼虫血淋巴含有7种蛋白质成分,库蚊(Culex)为4种.Barlow报导了落叶松锯蜂(Pristiphora erichsoni Htg)的预蛹为4种蛋白质成分,家蝇(Musca demosica L.)幼虫为 相似文献
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扩展青霉碱性脂肪酶cDNA的克隆和表达 总被引:2,自引:0,他引:2
采用TRIzol试剂一步法所抽提的总RNA的D(260)/D(280)值为1.82,甲醛变性电泳呈现真核微生物所特有的28S rRNA和18S rRNA条带。根据扩展青霉所产碱性脂肪酶(Lip PE)N末端20个氨基酸残基序列和真核生物mRNA3‘端具有poly(A)等所提供的生物信息,采用RT-PCR技术和3‘-RACE法扩增了Lip PE成熟肽编码区和3‘非编码区的cDNA,直接将该PCR产物克隆至pUCm-T载体中。序列分析表明,该碱性脂肪酶含有258个氨基酸,其中保守的五肽序列为Gly-His-Ser-Leu-Gly。进一步采用Clot Tech公司的SMART^TM PCR cDNA文库构建试剂盒,扩增、克隆和测定了自转录起始点至编码区的cDNA片段,从而完成了Lip EP完整cDNA的分析测定。最后将编码完整脂肪酶蛋白的cDNA克隆至pGEX-5X-3表达载体中,在大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测结果表明,所表达的GST-Lip EP融合蛋白分子质量约为53ku;免疫印迹(Western Blotting)技术证明了所克隆的cDNA确为编码扩展青霉WMC20718脂肪酶的基因。 相似文献
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植物叶绿体基因组全结构的阐明,已充分揭示该遗传体系兼有原核生物和真核生物基因组的特征。在叶绿体基因中,除存在一些内含子结构外,还具有像rpl12这样复杂的分割式基因。同时,不同基因的转录速度也存在着显著的差异。这些都意味着叶绿体基因在转录后必然有着复杂的剪接加工过程。RNA结合蛋白是一类在RNA加工中起重要作用的蛋白。Li等首次从烟草叶绿体中分离到与RNA转录直接相关的RNA结合蛋白,并且证明它们是由细胞核编码,在细胞质中合成后再输入到叶绿体中去的。至今,已从烟草、菠菜以及拟南芥菜等植物中发现了约10种核编码的叶绿体RNA结合蛋白,它们有类似的构造特征。我们从水稻cDNA文库中首次筛选到一个RNA结合蛋白(cp28)的基因,其相应的肽链由264个氨基酸组成。和其他叶绿体RNA结合蛋白相仿,它也包含有两个RNA结合结构域(称为consensus sequence-type RNA-binding domain,即CS-RBD),其中各含有一个由8个氨基酸组成的高度保守的一致顺序(ribonucleoprotein consensus sequence,即RNP-CS)。N端区域的传送肽(穿膜信号肽)由60个氨基酸组成,其后是一段负电荷十分集中的酸性肽段,但传送肽和酸性肽段的氨基酸顺序与其他植物的RNA结合蛋白的同源性很低。根据全长肽链的同源性比较,我们还分析了水稻cp28 相似文献
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与小麦高分子量谷蛋白基因探针杂交的阳性克隆分离及基因在重组子上的定位 总被引:1,自引:0,他引:1
将经San 3A部分酶切后的小麦总DNA片段克隆到λCharon40载体上构建了小麦基因文库.以两个人工合成的同源于小麦高分子量(HMW)谷蛋白基因的片段对此基因库进行筛选,获得了两个阳性克隆,推测其中一个包含了HMW谷蛋白全部的基因顺序.两个克隆的部分限制性内切酶位点已被确定.在Southern杂交中,用位于基因编码区内的寡核苷酸片段作探针,将阳性部分定位在一定的酶切片段上. 相似文献