化学法提取贮存骨髓涂片DNA检测Fms样酪氨酸激酶3基因突变预测急性髓系白血病患者预后

目的 探讨用化学法(苯酚:氯仿:异戊醇法)从贮存的骨髓涂片中提取微量DNA检测Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)突变情况,分析其对急性髓系白血病(AML)预后的预测价值.方法 采用化学法从58例-20℃贮存1~5年的骨髓涂片(AML 48例和非恶性血液病10例)中提取微量DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测患者FLT3-ITD突变情况.结果 48例初治AML患者中6例(12.5%)检测到FLT3-ITD,10例非恶性血液病患者中均未检测到FLT3-ITD.FLT3-ITD阳性AML患者初次诱导完全缓解(CR)率较FLT3-ITD阴性者低[0(0/6)比77.78%(21/27),P=0.001],总生存时间短(x2=7.274,P=0.007).肝、脾大和FLT3突变是影响AML患者初次化疗CR的危险因素(OR=7.2,P=0.12;OR=36.3,P=0.10).FLT3-ITD是初治AML患者不良预后的危险因素(RR=9.088,P=0.029).结论 使用化学法提取贮存的AML患者骨髓涂片微量DNA可在临床中应用,是进行回顾性分子生物学研究的重要实验方法.从骨髓涂片中提取微量DNA检测FLT3-ITD可用于预测AML预后.     

药物代谢酶基因多态性与白血病治疗反应及预后相关性的研究新进展

药物代谢酶参与许多常见化学致癌物和药物的代谢活化或解毒过程.由于存在基因多态性,药物代谢酶活性具有个体及种族差异.有关药物代谢酶基因多态性对白血病治疗反应及预后影响的研究,目前正日益吸引越来越多人的关注.从分子水平研究基因的多态性与药物治疗效应多样性之间的关系,研究不同个体的基因多态性对药物治疗效应以及预后的影响,以此在治疗前可以提前预测疗效和预后,并指导合理用药.本文选择有关药物代谢酶基因多态性与白血病药物治疗反应及预后有关的最近主要研究文献进行综述.     

在贮存骨髓涂片中提取DNA进行白血病患者FMS样酪氨酸激酶3基因突变检测的可行性

 目的　研究在贮存骨髓涂片中提取微量DNA的可行性,探索贮存骨髓涂片中提取微量DNA检测FMS样酪氨酸激酶3-内部串联重复突变（FLT3-ITD） 的应用价值。方法　选取79份-20 ℃保存1～5年的急性白血病（AL）骨髓涂片,分别用Chelex-100法、Chelex-100联合苯酚∶氯仿∶异戊醇法、苯酚∶氯仿∶异戊醇法提取微量DNA,同时以10例非恶性血液病患者骨髓涂片作为对照。并采用聚合酶链反应（PCR）技术扩增FLT3-ITD,扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测两组患者的FLT3-ITD。结果　苯酚∶氯仿∶异戊醇法能成功提取贮存骨髓涂片微量DNA,Chelex-100法、Chelex-100联合苯酚∶氯仿∶异戊醇法未能提取到DNA（χ2＝190.722,P＝0.000）。结论　使用苯酚∶氯仿∶异戊醇法可在贮存骨髓涂片中提取微量DNA,可用于进行回顾性分子生物学研究,而Chelex-100法、Chelex-100联合苯酚∶氯仿∶异戊醇法不能提取贮存骨髓涂片微量DNA。