丹参酮诱导HL—60细胞分化及凋亡的流式细胞术分析

应用体外细胞培养及流式细胞仪技术，分析了丹参酮作用前后HL－60细胞的细胞周期分布、细胞增殖指数、p53、c－myc、c－fos及bc1－2基因产物的表达变化，并以全反式维甲酸为对照。结果表明：0．5μg．ml－1的丹参酮作用后，HL－60细胞趋向粒细胞系统分化，有部分细胞发生凋亡（11．8％），丹参酮通过阻止HL－60细胞进入S期而抑制其DNA合成，其作用的分子机制与c－fos基因的表达增高、c－myc基因及bc1－2基因的表达降低有关，诱导分化与细胞凋亡的关系尚有待进一步探讨。     

丹参酮对人肝癌细胞某些表型的逆转作用

目的观察丹参酮促人肝癌细胞株在体外向正常方向分化的效果。方法体外培养的人肝癌细胞（ＳＭＭＣ┐７７２１）经０．５μｇ／ｍｌ丹参酮处理４天后，作光电镜观察，ＢｒｄＵ掺入试验，ＰＣＮＡ免疫组化及ＦＣＭ检测。结果在镜下，细胞形态趋向良性分化，细胞生长明显被抑制；ＢｒｄＵ标记率和ＰＣＮＡ阳性率均明显低于对照组；流式细胞仪检测显示丹参酮处理组的细胞被阻止于Ｇ０／Ｇ１期，而Ｓ期细胞数量明显减少，ｃ┐ｍｙｃ癌基因蛋白表达降低，ｃ┐ｆｏｓ癌基因蛋白表达明显增加。结论丹参酮可诱导人肝癌细胞某些表型的逆转，可能是一种有前途的分化诱导剂。     

Brdu和PCNA标记观察丹参酮对癌细胞增殖的影响

为了解丹参酮的抗癌作用并探索其机理，用丹参酮处理人肝癌细胞株和白血病细胞株，Ｂｒｄｕ掺入标记和ＰＣＮＡ免疫组化染色检测癌细胞增殖动力学指标。结果：丹参酮处理人肝癌细胞和白血病细胞株后，Ｂｒｄｕ标记率分别为８．９５％，１９．０１％，均显著低于对照组（２８．０％，２５．５７％，Ｐ＜０．０１）；ＰＣＮＡ阳性率分别为５７．０％，３０．３２％，均显著低于对照组（７４．３％，４７．０５％，Ｐ＜０．０１）。结果表明，Ｂｒｄｕ标记和ＰＣＮＡ检测在研究肿瘤细胞增殖及影响因素等方面有重要应用价值，丹参酮抑制癌细胞增殖与抑制癌细胞ＤＮＡ合成、ＰＣＮＡ表达及ＤＮＡ多聚酶δ活性等有关。     

A PRELIMINARY STUDY OF THE ANTI-CANCER EFFECT OF TANSHINONE ON HEPATIC CANCER AND ITS MECHANISM OF ACTION IN MICE

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丹参酮ⅡA诱导HL-60细胞凋亡

目的：在以往对丹参酮ＩＡ诱导分化和抗癌作用研究的基础上，进一步研究丹参酮ＩＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，以探讨其抗癌作用机理。方法：应用体外细胞培养技术，以１～１０μｇ／ｍｌ丹参酮ＩＡ作用于培养的ＨＬ－６０细胞５天后，进行光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪的观察和分析。结果：丹参酮ⅡＡ作用后，ＨＬ－６０细胞的生长受到明显抑制，其半数抑制浓度ＩＣ５０约为１０μｇ／ｍｌ光镜、电镜观察到细胞呈现凋亡特征，琼脂糖凝胶电泳显示细胞ＤＮＡ呈梯状降解，流式细胞仪分析表明，１０μｇ／ｍｌ丹参酮ⅡＡ作用后，ＨＬ－６０细胞凋亡率达２８．８％，细胞被阻止于Ｇ０／Ｇ１期，Ｓ期细胞明显减少（Ｐ＜０．０１），其ｂｃｌ－２基因的表达显著降低，而ｐ５３基因的表达增强（Ｐ＜０．０１）。结论：丹参酮ⅡＡ可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，这可能为丹参酮ⅡＡ抗癌抑癌的重要机理之一，诱导分化与诱导凋亡之间的关系有待进一步探讨。     

P^53基因及其产物的研究进展

Ｐ￣５３基因及其产物的研究进展华西医科大学（成都市６１００４４）黄韧敏综述黄光琦审阅肿瘤的发生是一个多基因、多步骤作用的过程，是正常细胞基因组发生多种损伤的过程，在此过程中，癌基因的激活与肿瘤抑制基因的缺失或失活共同参与癌变。近年来，肿瘤抑制基因已成...     

丹参酮ⅡA诱导HL—60细胞凋亡

在以往对丹参酮ⅡＡ诱导分化和抗癌作用研究的基础上，进一步研究丹参酮ⅡＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，以探讨其抗癌作用机理。方法：应用体外细胞培养技术，以１－１０μｇ／ｍｌ丹参酮ⅡＡ作用于培养的ＨＬ８０细胞５天后，进行光镜，电镜，琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪的观察和分析。     

丹参酮ⅡA对HL—60细胞系体外诱导分化作用的研究

从细胞形态和细胞增殖动力学研究发现０．５μｇ／ｍｌ丹参酮ⅡＡ可诱导５８％的ＨＬ－６０细胞向中性粒细胞分化，其中，中晚幼粒４６％，什状及分叶核１２％；细胞生长被明显抑制；Ｂｒｄｕ标记率及ＰＣＮＡ阳性率分别为１９．７％和３０．３％均明显低于对照组，而与维甲酸组无差异；     

肿瘤抑制基因p53及Rb在鼻咽癌中的表达

为观察ｐ５３基因和Ｒｂ基因与鼻咽癌发生的关系，应用聚合酶链反应－单链构型多态分析技术（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术），检测３３例鼻咽癌组织、４例鼻咽部炎性组织及３例正常鼻咽部组织中ｐ５３基因第７，８外显子的突变。结果显示，在３３例鼻咽癌中有７例存在ｐ５３基因第８外显子的突变，突变率为２１．２％。在第７外显子中未检测出突变发生。应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，对Ｒｂ基因在鼻咽癌中存在状态进行研究。结果表明，在１３例鼻咽癌组织中有１１例鼻咽癌组织有Ｒｂ基因的缺失或明显减弱，提示ｐ５３基因突变及Ｒｂ基因的缺失而导致的基因失活与鼻咽癌的发生有密切关系。     

细胞RNA原位杂交在细胞诱导分化中的应用

应用细胞ＲＮＡ原位杂交方法，结合生物素标记及检测系统，研究维甲酸诱导人宫颈癌细胞分化前后基因表达的改变，结果显示：人宫颈癌细胞经全反式维甲酸诱导后，ｃ－ｍｙｃ、Ｈａ－ｒａｓ ＲＮＡ表达明显降低。本文认为，ＲＮＡ细胞原位杂交方法简便易行（不需提取ｍＲＮＡ），且快速、灵敏、结果可靠，为研究细胞诱导分化前后基因表达变化的良好方法。