土木香内酯对人骨肉瘤143B细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨土木香内酯（alantolactone,ALT）对人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法：用不同浓度（0、4、6、8、10 μmol/L）的ALT处理人骨肉瘤143B细胞后,用结晶紫染色法和MTT实验检测细胞的增殖能力,用划痕愈合实验、Transwell 小室法、Hoechst33258 染色法分别检测细胞的迁移、侵袭和凋亡水平,用qPCR及Western blotting（WB）分别检测细胞中E-cadherin 和N-cadherin、caspase-3、cleaved-caspase-3（c-caspase-3）、PARP和cleaved-PARP（c-PARP）mRNA和蛋白表达水平。用荧光素酶报告基因实验检测T细胞淋巴因子或淋巴增强因子（T cell lymphocyte factor/lymphoid enhancer factor,TCF/LEF）转录活性,qPCR及WB检测β-catenin 及MMP-7、c-Myc mRNA和蛋白表达水平。结果：ALT能够抑制骨肉瘤143B 细胞的增殖、迁移和侵袭,同时促进细胞凋亡（P<0.05 或P<0.01）。经8、10 μmol/L ALT处理后,143B细胞中PARP mRNA和蛋白水平显著上调,c-caspase-3 和c-PARP 蛋白水平表达增加（均P<0.05）;E-cadherin mRNA 和蛋白水平表达上调、N-cadherin mRNA 和蛋白表达水平下调,同时TCF/LEF 转录活性明显下降（P<0.05 或P<0.01）,β-catenin、MMP-7 和c-Myc mRNA和蛋白表达水平显著下调（P<0.05 或P<0.01）。结论：ALT通过抑制Wnt/β-catenin 信号通路的活性从而抑制人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡。     

小豆蔻明对人骨肉瘤细胞的抑制作用及机制

目的分析确认小豆蔻明对人骨肉瘤细胞的抑制作用及相关机制。方法分别用0、4、12和16μmol·L^-1小豆蔻明和体积分数0.08%的二甲基亚砜(DMSO)处理骨肉瘤细胞,结晶紫染色和四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖; Hoechst染色和流式细胞术(flow cytometry,FCM)法检测细胞凋亡;划痕愈合和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭; Western blot检测增殖、凋亡、迁移和侵袭相关蛋白以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的变化。结果小豆蔻明抑制骨肉瘤细胞的增殖迁移和侵袭;抑制其增殖相关蛋白PCNA、迁移和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和波形蛋白、凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达;促进其凋亡标志蛋白caspase 3和cleaved-caspase 3的表达;抑制Wnt/β-catenin信号关键分子β-catenin以及其下游靶分子cyclin D1和c-Myc的表达。结论小豆蔻明可抑制骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,促进其凋亡,其机制可能与干扰Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。