类胰岛素生长因子结合蛋白-4〔IGFBP-4）及其蛋白水解酶作用与妊娠的研究进展

人体内存在看完整的类胰岛素生长因子(IGFs)系统，它们在许多不同组织的不同发育阶段具有广泛的合成代谢和促有丝分裂的作用。IGFs和IGFBPs是胎儿生长发育的重要调节因素之一，随着妊娠周期的延长，孕妇血清中的IGFBP—4蛋白水解酶含量逐渐增加，导致大量的IGFBP—4被裂解，从而释放大量的游离IGFs，作用于母亲和胎儿的组织，促进了胎儿的生长发育。     

黄芩汤通过Nrf2信号通路对Caco-2细胞抗氧化应激作用的机制

目的：以Caco-2细胞为载体,结合基因干扰(RNAi)技术,通过体外实验进一步验证黄芩汤基于核因子E2相关因子2(Nrf2)通路发挥的抗氧化应激作用。方法：将处于对数生长期的Caco-2细胞,经siRNA转染,构建siRNA Caco-2细胞;将正常Caco-2细胞和siRNA Caco-2细胞与不同浓度的黄芩汤共同孵育后,提取RNA和蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、接头蛋白Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)及Nrf2 mRNA和蛋白的表达;同时,采用比色法和探针法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的表达水平。结果：与空白组比较,仅有黄芩汤400 mg·L^-1组与萝卜硫素(SFN)组可降低正常Caco-2细胞内ROS、MDA含量(P<0.01);而黄芩汤各剂量组与SFN组细胞内SOD与GSH-Px...     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的影响及肠黏膜屏障的保护作用机制

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的药效,并探究黄芩汤在UC中是否能调节肠道菌群,发挥屏障保护作用。方法：雄性Balb/c小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、黄芩汤高(20 g·kg^-1)、中(10 g·kg^-1)、低(5 g·kg^-1)剂量组、菌群干扰组、菌群干扰模型组、菌群干扰黄芩汤组(黄芩汤,20 g·kg^-1)。灌胃抗生素(杆菌肽200 mg·kg^-1、万古霉素200 mg·kg^-1)8 d构建菌群干扰模型,自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d构建UC模型,黄芩汤给药治疗7 d。实验结束后处死小鼠,取血、结肠及粪便,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中紧...     

超声引导下神经阻滞预防性镇痛在肩关节镜手术中的临床效果观察

目的 探讨神经阻滞预防性镇痛对肩关节镜手术中的血流动力学和镇痛的临床效果。方法 选取60例接受在侧卧牵引位下行择期单侧肩关节镜手术患者为研究对象,随机分为单纯全身麻醉组(GA组,n=30)和神经阻滞复合全身麻醉组(NA组,n=30)。记录患者入室(T₀)、切皮时(T₁)、手术开始10 min(T₂)、手术开始30 min(T₃)、手术开始1 h(T₄)、出室(T₅)时间段的心率(HR)和平均动脉压(MAP);记录手术中输液量、尿量、出血量及冲洗液中肾上腺素使用量,术中及术后阿片类药物的用量及其他麻醉药物的使用情况;记录手术时长、麻醉时长、拔管时间、恢复室恢复时间(PACU恢复时间)、术后并发症、住院天数;记录拔管后5 min、术后1 h、术后4 h、术后8 h、术后16 h、术后24 h的疼痛视觉模拟评分(VAS)。结果 NA组患者在T₁、T₂、T₃、T₄、T_...     

医院成本核算流程及难点

目前各个医疗机构越来越重视成本核算工作,通过有针对性地加强成本管理,从医院总成本、科室成本入手,系统分析成本结构,进行成本内部结构分析、成本动态分析、量本利分析达到有计划地进行成本控制,减少不必要的人财物和时间的浪费,真正做到用最小的经济投入达到最大的社会效益。本组文章属于北京协和医院的成本核算工作结晶,该院利用一年的时间较为系统地开展了医院成本核算工作、个中经验不可不看。     

康莱特联合顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的:研究康莱特对骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用及其相关机制,探寻骨肉瘤的中西医结合化疗方案。方法:免疫组化及RT-PCR方法检测不同浓度康莱特作用下骨肉瘤细胞的Fas表达,并将康莱特与顺铂单独及联合应用于骨肉瘤细胞,采用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,倒置相差显微镜、荧光显微镜及电镜下观察凋亡细胞超微结构改变。结果:康莱特可上调骨肉瘤细胞的Fas表达并诱导凋亡,康莱特浓度达到10μL/mL时,细胞抑制率不再明显改变,但与1μg/mL顺铂合用将使细胞抑制率进一步提升,P=0·000。细胞超微结构观察及凋亡率测定也显示,康莱特与顺铂联用可诱导更多骨肉瘤细胞凋亡。结论:康莱特可通过上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡,康莱特与亚毒性剂量顺铂合用可高效杀伤骨肉瘤细胞。     

电针调节转运蛋白改善MCAO大鼠脑内葡萄糖代谢和空间学习记忆的机制研究

目的 探讨电针对大脑中动脉闭塞（MCAO）模型大鼠脑内葡萄糖代谢和空间学习记忆的影响及相关机制。方法 40只 SD 大鼠随机数字表法分为假手术组、模型组、电针组、非穴组,每组 10 只。采用线栓塞法建立 MCAO 模型大鼠,电针组给予电针百会和神庭穴,20min每次,每天1次,治疗7d,非穴组电针非穴,余同电针组,假手术组和模型组给予同等时间的抓取和固定。观察各组大鼠神经功能评分,水迷宫空间探索实验和定向巡航实验结果,TTC检测脑梗死体积,PET-CT检测海马区葡萄糖代谢,蛋白质印迹检测转运蛋白1（GLUT1）和转运蛋白3（GLUT3）的表达水平。结果 与模型组比较,电针组大鼠第5、第7d神经功能评分显著降低[（1.553±0.511）分比（2.047±0.453）分,（1.303±0.469）比（1.958±0.260）分,均P＜0.05];第3、4、5、6d逃避潜伏期明显缩短 [（58.653±10.545）秒比（86.183±15.861）秒、（45.163±11.758）秒比（73.889±14.853）秒、（36.480±11.267）秒比（63.234±13.873）秒,（25.413±8.725）秒比（50.768±11.567）秒,P 均＜0.05];穿越平台次数增加[（2.930±0.949）次比（1.533±0.525）次,P＜0.05];左侧海马区葡萄糖摄取量增加[（86.745±25.127）%比（80.282±24.000）%,P＜0.05];脑组织含水量减少[（78.271±0.600）%比（84.446±1.084）%,P＜0.05];左侧海马区GLUT1和GLUT3表达水平增加 [（73.220±10.478）%比（56.385±12.205）%、（79.176±9.824）%比（58.373±16.067）%,P 均＜0.05]。与非穴组比较,电针组大鼠第5、第7d神经功能评分显著降低[（1.553±0.511）分比（2.031±0.453）分,（1.303±0.469）分比（1.823±0.473）分,均P＜0.05];第3、4、5、6d逃避潜伏期明显缩短 [（58.653±10.545）秒比（84.478±14.359）秒、（45.163±11.758）秒比（70.780±13.932）秒、（36.480±11.267）秒比（59.940±11.015）秒,（25.413±8.725）秒比（48.965±10.438）秒,P 均＜0.05];穿越平台次数增加[（2.930±0.949）次比（1.625±0.504）次,P＜0.05];左侧海马区葡萄糖摄取量增加[（86.745±25.127）%比（81.866±25.674）%,P＜0.05];脑组织含水量减少[（78.271±0.600）次比（82.444±0.396）次,P＜0.05];左侧海马区GLUT1和GLUT3表达水平增加 [（73.220±10.478）%比（58.573±8.735）%、（79.176±9.824）%比（62.099±9.981）%,P 均＜0.05]。结论 电针百会、神庭穴可能通过调节GLUT1和GULT2的表达改善脑内葡萄糖代谢水平从而改善MCAO 模型大鼠空间学习记忆能力。     

脐血单核细胞体外高效扩增NK细胞方法的研究

目的建立1种使用脐血单核细胞(UCBMC)制备较高纯度自然杀伤(NK)细胞的体外高效扩增方法,并初步鉴定扩增后的NK细胞杀伤肿瘤细胞(K562)的能力。方法 6人份脐血标本来自北京妇产医院,取20 mL/份、采用密度梯度离心法分离脐血中的UCBMC,提取后的UCBMC以1×10~6个/mL细胞在4 mL含有白细胞介素(IL)-2、IL-12、IL-15和IL-21的X-VIVO15中培养5 d,期间于d2和d3添加等体积含上述细胞因子的新鲜培养基; 800 g离心将细胞后转入含1 000 IU/ml IL-2和50 ug/mL L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的X-VIVO15培养基中继续培养至14 d,800 g离心收获细胞。无血清RPMI1640重悬后通过台盼蓝染色法做细胞计数测定细胞的扩增倍数;流式细胞仪检测NK细胞重要表面标志物(CD56和CD16等)及与杀伤功能相关的重要分子[CD158a、CD158b、CD158e/k、CD69、CD314(NKG2D)、CD94、CD335(NKp46)、CD337(NKp30)、CD62L、CD226(DNAM-1)、CD57和CD336(NKp44)]的表达情况;胞内染色结合流式细胞仪测定细胞杀伤重要效应分子Perforin和Granzyme B的表达情况,并以乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测扩增后的细胞对K562细胞的杀伤能力。结果 6份UCBMC培养14 d:活细胞总数从培养前的4×106个扩增至(3. 6—5. 5)×10~8个,扩增倍数91—137(116±13. 1); CD3-CD56+细胞(NK细胞)占比85. 6%—95. 5%(90. 2±3. 4)%;培养得到的NK细胞表面除表达CD56分子外,还表达CD16(91. 2±2. 6)%、CD158a(71. 4±4)%、CD158b(52. 1±2. 2)%、CD158e/k(50. 3±6. 9)%、CD69(95. 6±2. 8)%、CD314(NKG2D)(94. 2±1. 7)%、CD94(94. 1±2. 1)%、CD335(NKp46)(26. 6±4. 1)%、CD337(NKp30)(94. 6±1. 5)%、CD62L(12. 8±3. 4)%、和CD226(DNAM-1)(97. 6±1. 3)%,以及CD57(4. 2±0. 9)%和CD336(NKp44)(7. 1±1)%。胞内染色结果显示:90%扩增产物(细胞)内表达与NK细胞杀伤功能相关的Perforin(86. 9±2. 7)%和Granzyme B(94. 1±2. 9)%;体外细胞杀伤试验:扩增的细胞对K562在效靶比为5∶1和10∶1时对靶细胞(K562)具有明显的杀伤作用。结论成功建立了1种从UCBMC不经纯化直接制备高纯度NK细胞的方法——其培养的细胞中表达了NK细胞重要的功能性分子,对K562细胞具有杀伤能力。     

用双重荧光原位杂交技术区分外周血细胞中X、Y染色体

<正> 目前,荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)技术已成为一种解决不同细胞遗传学问题的有力工具。在国外这项技术已逐渐应用于临床细胞遗传学以快速准确地鉴别难以分析的染色体异常,特别是将其应用于间期细胞,更能体现其优点。本研究以不同的荧光素标记的X染色体特异性和Y染色体特异性探针对外周血间期核     

目标外显子组捕获测序发现INPP5E突变致Joubert综合征1例

目的:鉴定一个中国Joubert综合征家系的致病基因及位点。方法:对该Joubert综合征家系的先证者进行目标外显子组捕获测序,通过生物信息学分析找到候选的致病基因及位点,利用聚合酶链式反应(PCR)和Sanger测序进行验证。结果:在先证者的9号染色体INPP5E基因上存在2个杂合变异位点,分别为c.1524CG,p.Asp508Glu以及c.1688GA,p.Arg563His。这两个位点在家系中符合遗传共分离规律。结论:目标区域捕获测序结合Sanger测序发现INPP5E基因的c.1524CG以及c.1688GA位点为引起该Joubert综合征家系临床病变的变异位点,这是国内首次报道的由INPP5E基因突变导致的Joubert综合征病例,且c.1524CG为首次发现的新致病位点。