超大剂量氨甲喋呤治疗骨肉瘤的护理

骨肉瘤恶性程度高 ,但患者多为青少年 ,部分患者化疗后还需截肢 .过去我院用氨甲喋呤治疗骨肉瘤 ,使用常规剂量范围内的 (2 5～ 5 0 ｇ) /ｄ化疗 .自 1 998年至 2 0 0 1年我科对 80例骨肉瘤患者进行了超大剂量 (9～ 1 4ｇ)、高纯度氨甲喋呤化疗 ,取得了良好的治疗效果 ,提高了手术切除率 ,提高了骨肉瘤患者的生存率 .现将护理体会总结如下 :1　临床资料本组 80例患者均为 1 998年至 2 0 0 1年收住我院的骨肉瘤患者 ,男 6 2例 ,女 1 8例 ,年龄 1 2～2 5岁 ;部位 :股骨下端 3 6例 ,胫骨上端 1 9例 ,腓骨上端 1 8例 ,肱骨上端 7例 .2　给药方…     

幽门螺杆菌根除方案的选择

幽门螺杆菌(H p)感染是一种常见的、严重的、有传染性的、可治愈的感染性疾病[1]。十二指肠溃疡(DU)常伴有以胃窦为主的胃炎,酸分泌功能亢进;胃溃疡(GU)多伴随胃底或胃体胃炎存在,酸分泌正常或偏低;胃癌多有萎缩性全胃炎,酸分泌功能减退或丧失。按照目前的观点,这三种疾病都与H P感染有关。现认为宿主在感染H p时的酸分泌状态决定了H p感染引起的临床后果。H p感染时处于较高酸分泌状态者,感染后引起的胃窦部炎症又通过刺激胃泌素释放而促使酸分泌更多,终至DU。在低酸分泌状态者H p感染引起的胃部炎症使壁细胞破坏,酸分泌进一步减低,…     

恶性肿瘤化疗多药耐药动物模型的实验研究

目的建立肿瘤多药耐药动物模型,为筛选有效逆转肿瘤多药耐药的药物及研究克服肿瘤耐药、提高化疗效果奠定基础。方法模拟恶性肿瘤细胞在人体内经化疗逐渐演化为多药耐药细胞的生理过程,利用BABL/c小鼠,腹腔接种S-180瘤细胞建成小鼠肿瘤动物模型,在低剂量阿霉素腹腔注射治疗下,经过15个周期的培育传代,获得了耐药的肿瘤细胞株S-180R。结果耐药细胞株对阿霉素的耐药性比亲本细胞株高66倍,对VP-16的耐药性高9倍;免疫细胞化学证实耐药细胞显示肿瘤多药耐药基因产物P-170糖蛋白过量表达;流式细胞仪荧光检测表明耐药细胞比亲本细胞排除药物的能力提高89倍。结论本研究成功地建立了S-180R耐药细胞株的肿瘤多药耐药动物模型,为进一步筛选有效逆转肿瘤多药耐药的药物及研究克服肿瘤耐药、提高化疗效果奠定了基础。     

DC疫苗联合CIK细胞治疗非小细胞肺癌疗效观察

目的探讨自体肿瘤抗原负载的树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效.方法采集70例非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞,加入细胞因子定向诱导成CIK及DC,培养的第5天用自体肿瘤抗原（Ag）负载DC,第8天将DC与CIK细胞共培养,14d后将联合培养的细胞（Ag-DC-CIK）分次回输给患者.治疗4周后,流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群及细胞因子水平,以评价细胞免疫功能,结合临床指标综合评价疗效,同时观察不良反应;以35例单纯的CIK细胞治疗作为对照.结果（1）培养的第14天,Ag-DC-CIK细胞的增殖达（20.6±2.16）倍,对照组仅为（12.2±2.65）倍（P〈0.05）;CD3＋CD8＋细胞及CD3＋CD56＋细胞的表达也明显高于对照组（P〈0.05）;（2）70例接受治疗的患者中CD3、CD4、CD8T细胞的百分比均较治疗前有不同程度的提高,Ag-DC-CIK组57.14%（20例）的患者CD4/CD8比例调节至正常,与对照组（42.85%,15例）相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（3）Ag-DC-CIK治疗后51.42%（18例）的患者Thl/Th2细胞因子比例恢复正常,而对照组恢复正常者仅占37.14%（13例）（P〈0.05）;（4）Ag-DC-CIK治疗组中Ⅱ、Ⅲ期患者的有效率分别为39.30%和28.60%,与对照组的相应期别（Ⅱ期26.90%,Ⅲ期22.20%）相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（5）治疗后的副反应包括寒颤、发热及兴奋失眠,无1例出现毛细血管渗漏综合征及实质脏器的损害.结论肿瘤抗原负载的DC细胞可增强CIK细胞在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效,有推广运用的价值.     

凝血酶诱导非小细胞肺癌血管内皮生长因子分泌的实验

 目的 探讨凝血酶对非小细胞肺癌细胞株A549分泌血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）的促进作用及其机制。方法 采用ELISA法检测凝血酶对AS49细胞分泌VEGF的浓度以及水蛭素对其阻断作用。采用RT-PCR法检测凝血酶受体PAR-1在A549细胞中的表达。结果 凝血酶在0．5～3U／ml的浓度范围内可以明显地增加VEGF的分泌，而〈0．5U／ml时这种促进作用则不明显，水蛭素能够完全阻断凝血酶的这种促进作用。PAR-1在A549细胞中表达，而在正常的胎肺细胞（KM13-17）中并不表达。结论 在一定浓度范围内，凝血酶能有效地促进A549细胞VEGF的分泌，而这种促进作用可能与PAR-1受体的表达有关。     

鼻咽癌患者血清VEGF水平及临床意义

目的 探讨鼻咽癌患者血管内皮生长因子(VEGF)水平变化的临床意义。方法 采用双抗夹心ELISA法检测55例鼻咽癌患者血清VEGF水平，并与40例健康体检者的血清VEGF水平作对比分析。结果 鼻咽癌患者血清VEGF水平显著高于健康体检者(P=0．000)；晚期(Ⅲ期、Ⅳ期)鼻咽癌患者血清VEGF水平显著高于早期(Ⅰ期、Ⅱ期)鼻咽癌患者(P=0．003)；有淋巴结转移和远处转移的鼻咽癌患者血清VEGF水平明显高于无淋巴结转移和无远处转移的患者(P=0．015及0．003)；血清VEGF水平与鼻咽癌患者性别、年龄和组织病理学类型无明显相关。结论 血清VEGF可作为鼻咽癌早期诊断、病情进展的动态监测及预后判断的简便可靠的指标。     

早期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性循环细胞检测及其临床意义

 目的　探讨早期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性细胞检测的临床意义及其预后价值。方法　应用RT-PCR检测50例早期乳腺癌患者、24例良性乳腺病变患者及20名健康体检志愿者外周血有核细胞CK19 mRNA的表达,并根据基因标志物结果随访。结果　早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血有核细胞CK19 mRNA阳性率40.0 %（20／50）,与良性乳腺疾病患者[12.5 %（3／24）]及健康体检志愿者[5 %（1／20）]比较,差异均有统计学意义（P＝0.018,P＝0.004）;外周血有核细胞CK19 mRNA阳性率与患者年龄、月经状况、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移状况、病理分化、激素受体状况、Her-2、血清CA153、血清CEA水平异常升高无关（P＞0.05）;20例外周血有核细胞CK19 mRNA阳性的患者中有11例随访期出现转移复发（P＝0.002）,中位无瘤生存期明显缩短（P＝0.007）。结论　CK19 mRNA可以作为循环肿瘤细胞基因标志物。检测CK19 mRNA阳性循环肿瘤细胞,可能作为早期乳腺癌术后判断复发转移的辅助指标。     

DC疫苗联合CIK细胞治疗非小细胞肺癌疗效观察

背景与目的探讨自体肿瘤抗原负载的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效。     

hMAM和CK19 mRNA联合检测早期乳腺癌循环肿瘤细胞的临床价值

目的:评价hMAM和CK19 mRNA联合检测早期乳腺癌循环肿瘤细胞的临床价值.方法:采用RT-PCR检测早期乳腺癌患者CK19、hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞.结果:hMAM和CK19 mRNA联合检测早期乳腺癌患者循环肿瘤细胞阳性率(52.0%)均高于良性乳腺疾病患者(16.7%)和健康体检者(5.0%), P值分别为0.004和0.000;阳性率与癌组织HER-2过表达相关,P=0.049.联合检测的敏感度为57.5%,特异度为88.6%.26例联合检测阳性患者,13例随访期出现转移复发,P=0.001;中位无瘤生存期明显降低,P=0.000.结论:hMAM和CK19 mRNA是一组敏感度和特异度较好的诊断早期乳腺癌患者循环肿瘤细胞的基因标志,可能作为早期乳腺癌术后监测转移复发辅助指标.     

VEGFR-3胞外区基因真核表达载体的构建-与鉴定

目的构建VEGFR-3胞外区基因真核表达载体pcDNA3.1-VR-3,并在体外进行表达和鉴定。方法采用 RT-PCR技术,扩增C57BL/6小鼠胚胎VEGFR-3胞外区cDNA片段,通过基因重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pcDNA3.1-VR-3。经限制性酶切鉴定和DNA 序列测定结果证实后,将重组质粒经脂质体法转染COS-7细胞, Western blotting检测其蛋白表达。结果克隆了C57BL/6小鼠胚胎VEGFR-3胞外区cDNA片段,并构建了真核表达载体pcDNA3.1-VR-3,Western blot 证实目的基因可在COS-7细胞中表达。结论构建的真核表达载体pcDNA3.1-VR-3,可在真核细胞内正确表达,这为进一步的动物实验奠定了基础。