Dishevelled2基因及其蛋白在透明细胞性肾细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨透明细胞性肾细胞癌（CCRCC）组织及其癌旁组织中Dishevelled2（DVL2）基因及其蛋白的表达情况及其临床意义。方法用半定量反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和荧光实时定量PCR方法检测22例CCRCC患者的原位肾癌组织及其配对癌旁组织DVL2基因表达情况,并检测了32例总样本中Ⅲ＋Ⅳ期与I＋Ⅱ期肾癌组织中DVL2基因的表达差异;应用免疫组织化学法回顾性研究22例CCRCC患者的原位肾癌组织及其配对癌旁组织中DVL2蛋白的表达情况,同时检测了10例无正常肾组织配对的CCRCC患者肿瘤组织。结果半定量RT—PCR结果表明,在22例CCRCC样本中,DVL2mRNA在17例（77．2％）CCRCC原发灶中的表达较其配对癌旁组织上调,其结果与实时荧光定量PCR结果基本一致（仁2．535,P=0．0197）,实时荧光定量PCR结果显示,13例Ⅲ＋Ⅳ期CCRCC中8例（61．5％）肾癌组织DVL2mRNA表达高于I＋Ⅱ期。肾癌组织;免疫组织化学分析表明,DVL2蛋白定位于CCRCC细胞的胞膜及胞质,22例CCRCC中有18例（81．8％）癌组织表达强度高于癌旁组织,但32例CCRCC的DVL2蛋白表达在不同年龄、性别、肿瘤分期间差异均无统计学意义（Fisher精确概率法,均P〉0．05）。结论在mRNA及蛋白水平上,CCRCC中DVL2表达水平显著高于癌旁组织,并且Ⅲ＋Ⅳ期肿瘤患者原位癌组织中DVL2的表达量高于I＋Ⅱ期,提示DVL2可能是一个潜在的与CCRCC发生及转移相关的分子标志物。     

miRNA与前列腺癌的研究进展

前列腺癌足男性泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一。miRNA在转录后水平对基因表达进行调控,在生命活动中发挥重要作用,并可通过类似痈基因、抑癌基因或其他方式调控肿瘤的发生、发展和转归过程。最近研究表明一些miRNA在前列腺癌组织中异常表达,miRNA在前列腺癌发生、发展的分子机制中起着重要作用。本文对miRNA的特点、与细胞凋亡、雄激素信号通路间的关系以及前列腺癌预后的最新研究进展作一综述。     

miRNA-29c抑制前列腺癌细胞系LNCaP的增殖和侵袭

目的观察miRNA-29c(miR-29c)对前列腺癌细胞系LNCaP增殖和侵袭能力的影响,探讨其潜在的应用价值。方法采用qRT-PCR观察雄激素依赖性(LNCaP)与雄激素非依赖性(LNCaP-AI)前列腺癌细胞中miR-29c的表达差异;采用miR-29c抑制物(anti-miR-29c)下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,绘制LNCaP细胞生长曲线,利用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell侵袭实验分析miR-29c抑制前后LNCaP细胞的体外侵袭能力。结果 qRT-PCR显示LNCaP-AI细胞中miR-29c水平明显低于LNCaP细胞(P<0.05);下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,可明显促进LNCaP细胞体外增殖及侵袭能力(P<0.05)。结论 miR-29c的正常表达有利于抑制LNCaP细胞的体外增殖和侵袭,有望成为前列腺癌生物治疗的潜在靶点。     

代谢组学在肿瘤临床中的应用

肿瘤的早发现、早治疗及个性化诊疗方案是肿瘤治疗的发展方向,新兴的代谢组学(metabolomics)开辟了辅助肿瘤早期诊断、疗效评价及预后判断的新思路。代谢组学是一种将图像识别方法和生物信息学结合起来的分析技术,用于检测体液或组织中的代谢产物并分析其变化规律。肿瘤的发生、发展伴随着机体代谢产物的变化,代谢组学能对肿瘤引起的机体代谢变化作出整体评价,筛选出有价值的生物标志物,用于肿瘤的早期诊治。本文就代谢组学的概念和方法学,代谢组学在肿瘤早期诊断、靶向治疗及其疗效评价、患者预后评估中的作用做一综述。     

基于MOOC的高原生理学教学改革的启示与思考

高原生理学是高原医学的核心基础学科,是高原医学专业本科生的专业必修课程。高原生理学目前主要采取传统讲授式教学,教学方式相对单一,在一定程度上影响了学生的学习效果。慕课(massive open online course,MOOC)是新近涌现出的一种在线开发课程,其教育理念先进。在当前军队改革的大背景条件下,将MOOC有效结合到高原生理学课程教学中,使教学模式得到转变的同时提高教学质量和促进教学相长。这样不仅能全面提高学生的学习效果,更有助于提高高原军事医学学生的岗位任职能力,有效服务高原部队。     

不同前列腺组织中雄激素受体的表达研究

目的:研究雄激素受体(AR)在正常前列腺、良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)组织中的表达,探讨AR与BPH和PCa的关系。方法:采用实时定量PCR、免疫荧光和组织蛋白电泳方法,分析15例正常前列腺、20例BPH与40例PCa标本中AR的表达情况。结果:实时定量PCR和组织蛋白电泳检测BPH组织与正常前列腺组织中AR的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。但免疫荧光检测发现BPH组织中AR蛋白表达量增高。3种方法检测PCa组织中AR表达量较正常前列腺组织和BPH组织增高(P<0.05)。高分化PCa的AR表达比低分化PCa高(P<0.05)。随着临床分期的增高,AR的表达降低(P<0.05),激素非依赖性前列腺癌(HRPC)组织中AR表达最低。结论:AR在PCa组织中的表达较正常前列腺和BPH组织中增高,AR的表达与PCa的分级、分期相关。     

MAZ在前列腺癌中的表达及其生物学功能

目的:探讨MAZ在局限性和转移性前列腺癌(PCa)中的表达以及沉默MAZ基因对PCa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:生物信息学分析(Oncomine数据库)MAZ在PCa以及转移性PCa中的表达情况。采用qRT-PCR检测MAZ在前列腺细胞系中的表达情况。用RNA干扰技术在PCa细胞系中沉默MAZ基因,观察PCa细胞在增殖、平板克隆形成、细胞周期、侵袭和迁移能力方面的变化。结果:MAZ在PCa中表达明显升高并且与PCa的转移明显相关。MAZ在LNCaP-AD细胞中表达最高,oligo715siRNA沉默MAZ基因效率最高,有效沉默MAZ基因后,LNCaP-AD细胞的增殖和克隆形成率明显受到抑制,细胞处于S期的细胞数明显减少,细胞的迁移和侵袭能力明显减弱,以上实验和对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:MAZ与PCa的发生和转移临床相关,并且在PCa细胞的增殖、迁移及侵袭中起到了重要作用,提示MAZ可能参与调控PCa发生发展,有望成为PCa治疗的新靶点。     

以胜任力为导向的"特殊环境医学"课程内容体系的构建

目的　以学员岗位胜任力为导向构建新开课程"特殊环境医学"的课程内容体系。方法　结合军校学员特点,分析中国医师岗位胜任力需求,利用科学的方法进行课程内容体系构建。本研究采用德尔菲法和层次分析法构建特殊环境医学课程内容体系。遴选的专家意见用Kendall’s W协调系数表示,用卡方检验进行统计分析。各级条目层级和权重采用层次分析法,一致性比率（CR）作统计检验。通过检验（CR<0.1）方可纳入体系内。结果　遴选的专家权威性、积极性高,专家意见一致性好,并形成了5条Ⅰ级条目、15条Ⅱ级条目、54条Ⅲ级条目的教材内容体系和13个知识模块用于实际授课,以及1种综合研讨课。结论　以中国医师岗位胜任力的需求为指导,通过定性和定量相结合的研究方法,构建了特殊环境医学教学课程内容体系。     

SNT1与RET之间相互作用的酵母双杂交研究

目的:研究sucl-binding neurotrophic target(SNT1)与RET之间的相互作用,寻找RET受体下游的结合蛋白,以深入认识RET下游信号转导机制.方法:将RET胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将SNT1、SNT1PTB及SNT1△PTB与B42AD蛋白融合作为激活域蛋白,共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测以及氨基酸营养缺陷生长实验分析它们之间的相互作用.结果:SNT1及SNT1PTB与RET之间在酵母中存在结合,而SNT1△PTB不与RET结合.结论:证实RET与SNT1之间具有相互作用,SNT1的PTB结构域在介导此相互作用的过程中非常重要.     

microRNA-148a对前列腺癌细胞系LNCaP神经内分泌分化的影响

目的探讨microRNA(miRNA)-148a对前列腺癌细胞系LNCaP神经内分泌分化的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证miRNA-148a在雄激素依赖性与雄激素非依赖性前列腺癌细胞系中的差异表达。采用miRNA-148a及其抑制物(anti-miRNA-148a)改变LNCaP细胞中miRNA-148a的表达量,观察LNCaP细胞神经内分泌分化的差异程度,并检测神经内分泌分化标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)的差异表达。结果 LNCaP-AI细胞中的miRNA-148a相对表达量显著低于LNCaP细胞(P<0.05)。下调miRNA-148a在LNCaP细胞中的表达量,可明显促进LNCaP细胞神经内分泌分化。结论 miRNA-148a可以抑制LNCaP细胞的神经内分泌分化,可能成为前列腺癌生物治疗的新靶点。