荧光定量PCR检测急性白血病患者外周血 WT1基因表达及其临床意义

为研究WT1基因表达与临床疗效和预后的关系,探讨其在白血病微小残留病检测中的作用,用荧光定量RT-PCR方法检测55例初发白血病患者外周血及10例正常人外周血的WT1基因表达,跟踪20例急性白血病患者外周血WT1基因表达。结果显示,白血病初治组(40例ANLL、15例ALL)与正常人外周血WT1基因表达有显著差异(P<0.001)。在急性白血病患者中,WT1≤6.8×10-3组生存期长于WT1>6.8×10-3组(P=0.027);白血病患者初发时WT1呈高度表达,完全缓解后,迅速或缓慢下降至少1个对数级,复发时再次增高。跟踪检测20例急性白血病患者外周血WT1基因表达,结果7例复发,5例在临床复发前2-3月WT1的水平明显增高,至少上升0.8个对数级。结论:荧光定量RT-PCR方法检测白血病外周血WT1表达具有简便易行、准确性高、特异性好的特点。与正常人外周血比较,WT1在各类白血病外周血中呈高度表达,且表达水平与预后负相关;对外周血WT1基因表达进行定量分析,可用于微小残留病的监测。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中Par-4及WT1基因表达的变化

 目的　探讨三氧化二砷（As2O3）诱导K562细胞凋亡过程中前列腺凋亡反应因子-4（Par-4）和WT1基因表达的变化。方法　用不同浓度As2O3（2～10 μmol／L）处理K562细胞24～72 h,MTT法测定细胞增生活力,流式细胞术检测细胞凋亡,采用荧光定量RT-PCR检测Par-4和WT1基因 mRNA表达变化,Western blotting检测Par-4和WT1蛋白表达的变化。结果　不同浓度As2O3作用于K562细胞,随浓度增加能明显抑制细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。同时Par-4基因mRNA和蛋白表达逐渐增加;而WT1基因mRNA及蛋白表达逐渐下降。结论　As2O3可抑制K562细胞生长,诱导细胞凋亡,Par-4与WT1基因可能参与As2O3诱导K562细胞凋亡的调控。     

人前列腺凋亡反应因子4对K562细胞的促凋亡作用研究

前列腺凋亡反应因子4(prostate apoptosis response-4,Par-4)是Sells等[1]于1994年从前列腺肿瘤细胞中分离出来的一种促凋亡基因.国外学者发现Par-4能增强细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导剂(TRAIL)的敏感性,诱导细胞凋亡,提示Par-4在诱导白血病细胞凋亡中发挥重要作用.三氧化二砷(As2O3)不仅对急性早幼粒细胞白血病(APL)具有明显的疗效,对其他白血病细胞系HL-60、K562细胞以及某些实体瘤细胞也有明显的生长抑制和诱导凋亡作用[2].我们前期研究发现,Par-4不能直接诱导K562细胞凋亡,但是在As2O3诱导K562细胞凋亡的过程中,Par-4表达明显上调,提示Par-4参与K562细胞的凋亡调控.由于小剂量As2O3 对K562细胞的促凋亡作用较弱[3],因此我们在本实验中通过转染pIRES2-EGFP/Par-4真核表达载体,加用小剂量As2O3,进一步观察Par-4对K562细胞的促凋亡作用.     

溪黄草不同部位的红外光谱分析与评价

目的对溪黄草全草、茎、叶所含化学成分进行红外光谱分析研究。方法采用傅里叶变换红外光谱法并借助于二阶导数谱、二维相关红外光谱研究溪黄草不同部位(干燥并粉碎)红外谱图整体变化规律。结果溪黄草全草、茎、叶中的共有成分为酯类、黄酮类、木质素、芳香类和糖苷类等,但三者各主体成分的相对含有量差异较大,溪黄草茎、全草中的酯类、木质素、芳香族化合物和糖苷类物质含有量高于溪黄草叶,而溪黄草叶中的黄酮类物质含有量高于茎和全草。结论红外光谱能够快速、无损、简便地提供中药不同部位中主要化学成分的宏观信息。     

胃粘膜下囊肿1例报告

男,63岁。因反复上腹部饱胀半年就诊。进食后症状明显,无腹痛、返酸、暖气,无呕血、黑便。查体：慢性病容,锁骨上淋巴结未触及;心肺正常;腹部平软,肝脾肋下未触及,剑突下压之不适,无压痛及包块。血常规、大便常规及肝功能检验正常,B超示肝、胆、胰、牌无异常。胃镜示胃底血管模糊,粘膜充血,后壁见有直径1．5cm半球形隆起,表面光滑,质软;食道贲门、胃体、胃角、胃窦、幽门及十二指肠球部正常。诊断：胃底息肉。病理报告胃底浅表性胃炎。后又查超声内镜（EUS-30）示：胃底后壁新生物扫描呈无回声区直径1．45mm,位于粘膜下及…     

荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测白血病WT1 基因表达及动态监测的研究

Wilm瘤基因(WT1)在白血病细胞中高表达提示其可作为一种广谱的白血病标志,但早期由于定性或半定量RT PCR技术的局限性使其在微小残留病 (MRD)诊断中的价值难以得到一致认可。为此我们采用实时荧光定量 (FQ) RT PCR技术,检测了不同类型白血病患者WT1基因的表达;并对部分急性     

佛波酯诱导K562细胞分化过程中WT1基因表达及其异构体比例变化的研究

目的 分析佛波酯（TPA）诱导K562细胞分化过程中WT1基因及其四种异构体表达水平及比例变化，探讨WT1基因不同异构体与细胞分化的关系。方法采用TPA诱导K562细胞分化，以硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验及细胞免疫表型CD9检测判断细胞分化程度；实时荧光定量RT—PCR技术检测K562细胞被诱导分化过程中总WT1基因表达水平，并计算出WT1（＋／＋）、WT1（＋／-）、WT1（-／＋）、WT1（-／-）四种异构体在细胞分化过程中的比例变化。结果 TPA诱导K562细胞分化过程中NBT阳性率及CD9表达阳性率均有显著增加（P〈0．05）。WT1相对表达水平由分化前（4．67±1．11）×10^-3，降到（1．67±0．45）×10^-3（P〈0．05），随后回升，96h达（4．64±1．53）×10^-1；四种异构体比例变化不-致，WT1（＋／＋）比例由0h的（39．65±19．46）％降至96h的（15．25±7．27）％，而WT1（-／-）异构体由0h的（15．38±11．34）％上升至96h的（37．60±11．90）％，另外两种异构体比例变化无显著性差异。结论 TPA诱导K562细胞分化过程中总WT1表达水平24h内迅速下降，随后回升。分化前异构体以WT1（＋／＋）为主，而分化后以WT1（-／-）为主，提示WT1基因可能通过调节四种异构体的比例而发挥抑制分化或促进分化的作用。     

胃印戒细胞癌25例内镜、病理及临床分析

胃印戒细胞癌自内镜、病理检查普及以来已较为常见。本院１９９５年１月～２０００年１月经内镜、病理诊断的各型胃癌１４０例 ,其中胃印戒细胞癌２５例 (１７．９ % )。作者对胃印戒细胞癌的内镜、病理及临床特点进行分析 ,以提高对该病的认识。１临床资料１．１一般资料男１０例 ,女１５例 ,男女之比为１ :１．５。年龄２９～７２岁 ,平均４７．９岁 ,４０岁以下１３例 (５２ % )。１．２临床表现腹胀 (１５／２５) ,上腹痛 (１８／２５) ,消瘦及贫血(８／２５) ,嗳气 (１２／２５) ,呕血及黑便 (４／２５) ,腹块 (２／２５) ,２例以不明…