中草药体外抗阴道毛滴虫的实验研究

本文用蛇床子、苦参、苍耳子、黄柏及仙鹤草嫩茎叶等中草药混合加工提纯的黄色晶体粉和混合渗出液进行了体外抗阴道毛滴虫的实验研究。 材料与方法 1 虫种 阴道毛滴虫A、B分另来源于经灭滴灵多次治疗和初次诊断的患者阴道分泌物,分别接种于预先加入无菌兔血清1～2ml和抗菌素的无菌肝浸汤培养基中,每管8ml,置36±0.5℃孵箱内     

卒中后认知功能特点和相关影响因素分析

目的：探讨卒中后认知功能特点及相关交互影响因素。方法：纳入住院治疗的脑卒中患者287例。使用简明精神状态量表(MMSE)进行认知功能筛查评定,同时使用自制问卷、改良Barthel指数(MBI)、中文版日常家居及社区活动能力量表(IADL)、焦虑/抑郁自评量表(SAS/SDS)对患者的个人情况、日常生活活动能力(ADL)等因素进行评估;最后分别以MMSE、ADL、SAS/SDS评分为因变量进行多元线性逐步回归分析。结果：287例患者中38.0%的卒中患者有不同程度的认知功能障碍。多元线性逐步回归显示高学历与卒中患者认知功能障碍呈负相关（P<0.05）,高龄、言语功能障碍、单侧忽略以及右侧大脑损伤与卒中患者认知功能障碍呈正相关（均P<0.05）;认知功能与患者抑郁、焦虑状态无相关性,但延迟回忆和语言功能与抑郁相关（均P<0.05）;ADL与认知功能呈正相关（P<0.05）,定向能力与日常生活活动能力呈正相关（P<0.05）。结论：卒中患者认知功能受损较常见,认知功能障碍与患者的年龄、受教育水平、疾病因素等多元因素相关,并影响患者的心理状态和日常生活活动能力;认知功能的各亚类中定向能力状态与患者的日常生活活动能力密切相关。     

人体钩虫在幼兔体内的分布和发育

我们于1983～1984年用人体两种钩虫感染不用免疫抑制剂处理的正常幼兔,观察其在幼兔体内的分布和发育。 材料和方法 一、钩虫第3期幼虫取十二指肠钩虫和美洲钩虫单一感染者的粪便,用碳砂培养法培养9～12d,分离钩虫幼虫,鉴定虫种后备用。     

结肠小袋纤毛虫病一例报告

<正> 结肠小袋纤毛虫病主要分布在热带和亚热带,在我国仅有散发性病例报导。作者在1984年底发现1例,现报告于下。患者,男,50岁,四川蓬安人。干部。患者近15年来,经常解不成形大便,稍有饮食不当就出现腹泻,一般2～3次/日,伴有右下腹隐痛不适,但无脓血便,每当此时服用黄连素片,腹泻即可停止。曾先后到华西医科大学及第二军医大等医院检查,粪便中见白细胞0～1个/高倍,红细胞0～2个/高倍,未查见寄生虫卵或包囊。乙状结肠镜检查除见“肛柱部粘膜稍红充血”外,余未见异常,均未得出明确诊断。于1984年12月来我室检查,粪便中查见少量蛔虫卵,低倍镜下每视野     

不同种株利什曼原虫的比较蛋白质组学分析

目的观察不同种株利什曼原虫前鞭毛体蛋白质表达状况。方法制备杜氏利什曼原虫四川SC6株、杜氏利什曼原虫四川SC10株和硕大利什曼原虫5ASKH株前鞭毛体总蛋白,以pH范围3-10的预制胶条进行双向电泳(2-D),考马斯亮蓝染色,PDQust软件分析凝胶,主要差异蛋白点用电喷雾质谱法进行鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫四川SC6株、杜氏利什曼原虫四川SC10株和硕大利什曼原虫5ASKH株前鞭毛体总蛋白均获近700个蛋白点,不同种株利什曼原虫前鞭毛体蛋白质2-D图谱中,14蛋白点呈恒定差异表达,从中鉴定出10个功能明确的蛋白质,分别具有下列生物功能:糖代谢与磷脂合成(烯醇酶、变旋酶、NADP依耐乙醇脱氢酶、乙醇胺磷酸胞苷酸转移酶),压力反应(细胞内过氧化物酶、锥虫还原蛋白过氧化物酶),细胞膜/细胞骨架(α-微管蛋白、β-微管蛋白),核酸代谢(琥珀酰辅酶A连接酶(GDP形成)、内源性RNA酶L-PSP(pb5)),细胞周期与增殖(延伸因子2)。结论不同种株利什曼原虫前鞭毛体蛋白质的表达存在不同,为理解不同种株利什曼原虫的毒力、免疫原性和代谢特征提供了新的视角。     

阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因真核表达载体的构建与鉴定

目的构建并鉴定阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因的真核表达载体。方法Trizol试剂提取阴道毛滴虫株基因组总RNA,RT-PCR扩增粘附蛋白65-3基因,定向克隆入pMD-18T线性质粒,重组子经双酶切、PCR鉴定及测序分析。鉴定正确的重组质粒pMD-18T-ap65-3和peDNA3．1（．＋）空质粒径BamHI和XhoI限制性内切酶双酶切后,凝胶电泳纯化回收目的片段,将粘附蛋白65-3基因亚克隆入peDNA3．1（＋）载体并进行筛选和鉴定。结果成功克隆出阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因,序列分析发现该基因的开放阅读框长为1704bp,与GenBank上公布的粘附蛋白65-3基因序列比较,同源性高达99．6％,经PCR鉴定,限制性酶切鉴定及测序鉴定,正确构建出重组质粒peDNA3．1-ap65-3。结论成功克隆出粘附蛋白65-3基因并构建出真核表达质粒pcDNA3．1-ap65-3,为进一步研究该基因的功能及滴虫的致病机制奠定实验基础。     

不同种（株）利什曼原虫毒力相关基因的表达差异

目的 观察不同种（株）利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的毒力相关基因表达情况。 方法 制备杜氏利什曼原虫、婴儿利什曼原虫、热带利什曼原虫、硕大利什曼原虫和墨西哥利什曼原虫等5种7株利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的总RNA,采用半定量RT-PCR法,以α-微管蛋白基因和3-磷酸甘油醛脱氢酶基因（GAPDH）作为阳性对照,根据GenBank公布的GDP甘露糖焦磷酸酶基因（GDPMP）、A2抗原相关蛋白基因（A2rel）、脂磷酸多糖合成蛋白1基因（LPG1）、脂磷酸多糖合成蛋白2基因（LPG2）、动基体膜蛋白11基因（KMP-11）、胱氨酸蛋白酶C基因（CPC）、亲水性酰化表面蛋白B1基因（HASPB1）、胱氨酸蛋白酶2基因（CPB2）、胱氨酸蛋白酶B2.8基因（CPB2.8）和热激蛋白100基因（CLP b）等毒力相关基因的核苷酸序列,设计特异性引物进行RT-PCR扩增,分析以上各基因在各种（株）前鞭毛体和无鞭毛体中的表达情况。 结果 各毒力基因在不同种（株）利什曼原虫的前鞭毛体和无鞭毛体中的表达明显不同,HASPB1基因在7个种（株）利什曼原虫的无鞭毛体和杜氏利什曼原虫前鞭毛体中均表达,GDPMP、LPG1、LPG2、CPB2.8、CPB2、A2rel和CLP基因分别在特定种（株）的前鞭毛体和/或无鞭毛体中表达,CPC基因仅在杜氏利什曼原虫SC10株和硕大利什曼原虫无鞭毛体内表达,KMP-11基因在7个种（株）利什曼原虫前鞭毛体或无鞭毛体内均不表达。 结论 毒力相关基因的表达存在种特异性和期特异性。     

1例重度粪类圆线虫病患者的病原学检测及处理

本文对1例重度粪类圆线虫病患者进行病原学检测,分析流行病学和感染的影响因素,提出具体预防控制措施,为临床粪类圆线虫病的诊断及防治提供帮助。     

旋毛虫新生蚴免疫研究概况

<正> 随着寄生虫免疫学的进展,对旋毛虫肌肉期幼虫及成虫的免疫研究的不断深入,开展对新生蚴的免疫研究已成为寄生虫学者广泛关注的课题。在1970年Dennis 建立体外培养成虫获得了大量新生蚴的方法以来的近十多年里,大量的研究表明,新生蚴在宿主体内诱导对旋毛虫的免疫反应中起了重要的作用。Murrell 认为对新生蚴的免疫比对肠期成虫的免疫更为重要。本文就新生蚴的免疫研究综述如下。     

人生存素基因的克隆、表达与抗血清制备

目的克隆表达重组人生存素,制备其抗血清并检测其免疫识别活性。方法用RT-PCR方法从培养的人白血病细胞株HL-60中克隆人生存素cDNA,克隆到原核表达载体pET32a(+),重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,目的蛋白经Ni-NTA树脂亲和纯化后免疫小鼠制备抗血清,ELISA检测抗血清的效价,Western blot和免疫细胞化学法鉴定抗血清的特异性。结果所克隆生存素cDNA序列与Genbank中序列完全一致,将其读码框插入原核表达载体pET32a(+)诱导表达后,SDS-PAGE电泳分析证实重组蛋白为分子量约37KD的融合蛋白,表达量占总菌体的30%,纯化后融合蛋白的纯度为95%,所制备的鼠抗血清的效价达1:1600,Western blotting证实其有较好的特异性,可以检测肿瘤细胞生存素的表达。结论我们已克隆并表达了人生存素基因,所制备的抗人生存素血清可用于相关肿瘤检测。