重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究

目的 构建含有幽门螺杆菌尿素酶（\ureI、ureB）及霍乱毒素B亚单位（\ctB）融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法 通过生物信息学方法从\ureI、ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内佐剂序列\ctB,按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,即为BIB序列。人工合成之后,插入原核表达质粒pET28a(+)中,构建pET28a(+)/\ctB-ureI-ureB〔pET28a(+)/BIB〕重组质粒。经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定正确后,将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。BIB工程菌经乳糖诱导表达后,SDS-PAGE检测重组蛋白BIB的表达情况,并对其N端氨基酸序列和相对分子质量进行测定,Western blot对其进行抗原性鉴定。结果 原核表达质粒pET28a(+)/BIB经双酶切和测序鉴定构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量33×10^\3处有一条明显条带,其N端氨基酸序列和相对分子质量与设计序列100%一致,Western blot结果显示BIB可以与抗幽门螺杆菌悉尼株（SS1株）小鼠血清及鼠抗CTB单抗产生特异性反应。结论 成功构建了幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌,该工程菌表达的BIB蛋白抗原性良好。     

诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑制作用

目的:评估无毒诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑瘤效应,及其在肿瘤和重要器官的定植情况,并确定瘤内注射的最佳剂量.方法:建立H22皮下移植瘤BALB/c小鼠模型后称小鼠重量,测量肿瘤大小,并按随机原则分为生理盐水组、无毒诺维氏梭菌低剂量组(1.0×107/mL,0.5 mL)、中剂量组(1.0×108/mL,0.5 mL)...     

医学微生物学实验教学的改革与思考

传统的医学微生物学实验教学模式不能适应医学人才培养的需要,从改变教学理念、优化教学内容、丰富教学方法、完善考核体系等方面进行大胆改革,才能调动学生参与实验的积极性,有利于培养学生的思考能力、实践能力和创新能力。     

厌氧菌在肿瘤生物治疗中的研究进展

<正>国际癌症研究机构公布的数据显示,每年全球约800万人死于癌症,癌症已成为世界严重的公共卫生问题。我国每年新发肿瘤病例约为312万例,其中50岁以上人群恶性肿瘤发病率占全部发病的80%以上,80岁达到高峰,居民因癌症死亡率是13%〔1〕。肿瘤严重影响老年人的生活质量,威胁着老年人的健康。传统的肿瘤治疗面临着特异性不高、靶向性不强、难以对实体肿瘤的乏氧区发挥作用等方面的挑战,迫切需要新疗     

无机多聚磷酸盐在神经变性疾病中的作用、机制及潜在应用

无机多聚磷酸盐(inorganic polyphoshpate,polyP)是由磷酸根通过高能磷酸键连接而成的线状聚合物[1].在生物出现之前polyP就已经存在于地球.在早期地球的高压和干燥环境中能产生polyP,比如在类似地球早期环境的火山口存在polyP.polyP的广泛存在表明其在生物的起源和生存方面起到非常关...     

以肠道菌群为靶点的新型辅助降压模式研究进展

肠道菌群是人体内环境的重要组成部分,参与和调节机体的免疫炎性反应和代谢过程,与高血压的发生、发展存在密切联系,在高血压疾病的研究中已成为焦点。本文总结了肠道菌群与高血压的关系,从炎症和免疫反应、脑-肠-骨髓轴、代谢物等方面阐明肠道菌群对高血压的影响及可能机制,重点从盐、益生菌、多酚类有机化合物三方面探讨饮食干预影响肠道菌群、改善血压的新型辅助降压途径,以期以肠道菌群为靶点,使通过饮食、中草药防治高血压的研究越来越深入。     

破坏细菌芽孢高抵抗力的研究进展

芽孢对理化、生物因素具有极强的抵抗力,极易引起食品腐败变质,导致食源性疾病,严重影响食品生产、加工、储藏和人类健康。芽孢抵抗力取决于其结构、2,6-吡啶二羧酸钙盐(Calcium 2,6-pyridyl-dicarboxylate,DPACa)、α/β小分子酸溶性蛋白(Small acid-soluble proteins,SASP)等。目前多采用高温高压杀灭芽孢达到有效灭菌,该方法破坏芽孢的结构是切实可行的。DPA-Ca可以提高所有芽孢的抵抗力,通过破坏它能更容易达到广泛杀菌的目的。芽孢高抵抗力的本质在于其基因,通过调控基因的表达,有望高效、稳定、低条件地杀灭芽孢。     

诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑制作用

目的 评估无毒诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑瘤效应,及其在肿瘤和重要器官的定植情况,并确定瘤内注射的最佳剂量。方法 建立H22皮下移植瘤BALB/c小鼠模型后称小鼠重量、测肿瘤大小,并按随机原则分为生理盐水组、无毒诺维氏梭菌低剂量组（1.0×107 mL-1,0.5 mL）、中剂量组（1.0×108 mL-1,0.5 mL）和高剂量组（1.0×109 mL-1,0.5 mL）。每天观察小鼠的一般情况,每周3次定时测量小鼠重量,每周2次测肿瘤大小,评估细菌的抑瘤效应。采用革兰染色法、细菌培养法、PCR技术,了解肿瘤和重要器官中诺维氏梭菌的定植情况。利用HE染色、脾脏指数、胸腺指数,了解细菌干预后荷瘤鼠炎症反应、免疫功能及肿瘤转移的情况。结果 无毒诺维氏梭低、中、高剂量组抑瘤率分别为8.49%、44.59%、14.84%,高剂量组小鼠一般情况最差,中剂量组小鼠一般情况最好。肿瘤中有诺维氏梭菌定植,主要脏器无该菌定植。高剂量组和中剂量组荷瘤鼠脾脏质量明显增大,两组脾脏质量和指数与生理盐水组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。高剂量组胸腺显著缩小,但胸腺指数各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 无毒诺维氏梭菌能选择性地定植于肝癌区,中剂量（1.0×108 mL-1,0.5 mL）无毒诺维氏梭菌能有效抑制免疫正常小鼠H22皮下移植瘤,可能与抗肿瘤免疫和炎症反应有关。     

车前草对呼吸道合胞病毒体外抑制作用的研究

目的：研究车前草醇提液体外对呼吸道合胞病毒（ RSV）的作用。方法采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应（CPE）,测定细胞半数中毒浓度（TC50）、药物半数抑制浓度（IC50）和抗病毒指数（ TI）,评判车前草抗RSV作用。结果车前草体外有抗RSV作用,浓度在0．0625～8．0 g／L呈量效关系。车前草的TC50＝4．57 g／L,IC50＝0．285 g／L,TI＝16．04。车前草与利巴韦林抗RSV作用差异无统计学意义（ P＞0．05）,但比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大。结论车前草在 Hep－2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制病毒的吸附和增殖,又能直接杀死病毒。     

桑叶乙醇提取物体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的:研究桑叶体外对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:采用细胞培养技术,将51.2 g·L-1桑叶液(70%乙醇提取物)倍比稀释后与密度为1.0×104/m L Hep-2细胞作用72 h,观察细胞病变效应(CPE),通过MTT法测定半数中毒浓度(TC50)。不同浓度桑叶液、Hep-2细胞与0.01 m L 100 TCID50RSV作用1,2 h后,测定其半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为阳性对照,评判桑叶抗RSV效果。结果:桑叶质量浓度在0.01~12.8 g·L-1,对RSV的抑制率表现出量效关系,TC506.56 g·L-1,IC501.015 g·L-1,TI 6.46。桑叶体外有抗RSV作用,比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大(P<0.05)。结论:桑叶对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒。