半夏药材中蛋白质IEF电泳图谱的研究

目的通过对半夏及其近缘植物的蛋白质电泳图谱比较,研究半夏药材的电泳鉴别方法。方法应用等电聚焦(isoe lectrofocus ing,IEF)技术,对不同产地半夏及其近缘植物块茎进行比较。结果半夏具有稳定的IEF电泳图谱,显示具有8条特征蛋白质带,并测定了其等电点(P I)值,半夏与其几种近缘植物的IEF谱有明显的区别。结论半夏IEF电泳图谱可作为半夏药材的鉴别依据,半夏特征蛋白质的P I值为半夏的鉴定和蛋白质分离纯化提供了参数。     

利用SEM图和XRD指纹图谱鉴别矿物类中药生石膏与玄精石

摘要：目的:采用性状鉴别、理化鉴别等传统方法结合扫描电子显微镜（SEM）及粉晶X-射线衍射（XRD）等现代分析技术,对矿物类中药生石膏和玄精石进行系统鉴别。方法:采集生石膏和玄精石样品,记录原药材及其粉末性状特点,进行理化鉴别,确定样品真伪及品种。在上述基础上,采集各药材样品SEM显微图,对比生石膏与玄精石各显微图之间的差异,总结两者SEM鉴别特征;同时采集各样品粉末的XRD图谱,分别计算并绘制生石膏与玄精石的XRD平均图谱,确定共有指纹峰,并对共有指纹峰相对强度数据分别进行相似度评价、聚类分析和主成分分析（PCA）,验证生石膏与玄精石的XRD共有指纹峰用于两者鉴别的可行性。结果:生石膏和玄精石碎屑的SEM特征具有差异,玄精石均呈疏松层片状堆叠,细小碎屑均成沙粒状;而生石膏呈紧密聚合的长纤维状,且细小碎屑或粉末具碎裂状纤维特征。生石膏和玄精石粉末的XRD图谱峰位相似,但玄精石各峰相对生石膏各峰略左移,相同峰位衍射峰的相对强度存在差异。相似度评价显示生石膏与玄精石明显分离,聚类分析及主成分分析均可将两者准确区分。结论:SEM和XRD技术均可准确鉴别生石膏和玄精石及其粉末,传统鉴别方法结合SEM和XRD分析技术能够为生石膏和玄精石及其粉末的快速鉴别和质量控制提供快速准确的新方法。     

刺络放血疗法治疗过敏性紫癜性肾炎的临床研究

目的：分析中西医结合用药治疗脑出血后脑积水的临床效果。方法：选取64例脑出血后脑积水患者,平均分成试验组和对照组各32例,对照给予单纯西药治疗,试验组给予中西医结合治疗,比较两组的临床疗效和神经功能缺失情况。结果：试验组患者总有效率明显高于对照组患者,P〈0.05,差异有统计学意义;两组患者治疗后的神经功能缺损评分均明显低于本组治疗前,P〈0.05,差异有统计学意义;治疗后试验组患者神经功能缺损评分明显低于对照组患者,P〈0.05,差异有统计学意义。结论：中西医结合治疗脑出血后脑积水效果明显好于单纯应用西药治疗,神经功能缺失情况也大有改善,建议临床广泛推广使用。     

冬凌草IrCYP71基因的克隆和功能

目的:克隆冬凌草二萜类化合物生物合成途径下游关键酶基因Ir CYP71,进行序列特征分析,对此基因编码的蛋白进行原核表达分析以及亚细胞定位,并对蛋白在宿主细胞表达的条件进行了优化。方法:根据转录组测序所得的Ir CYP71基因片段,克隆出全长c DNA序列;构建p ET28a(+)-Ir CYP71重组质粒,转化到Rosetta感受态细胞,小量表达和大量表达蛋白并鉴定,进行包涵体蛋白的纯化与复性,再对复性蛋白纯化鉴定分析。基于gateway克隆技术构建出PCR8/GW/TOPO-Ir CYP71载体之后与改造Pearleygate104载体重组,之后与农杆菌GV3101重组,转入烟草中瞬时表达,从而进行蛋白亚细胞定位。结果:克隆得到的Ir CYP71基因全长c DNA为1 593 bp,编码530个氨基酸,并在Gen Bank注册(登录号MG800628)。经大肠埃希菌表达系统表达的重组蛋白相对分子质量正确,在62 k Da左右,纯化后的重组蛋白总量有1 mg,蛋白纯度为85%。此蛋白亚细胞定位在细胞核。结论:对冬凌草Ir CYP71基因进行了初步验证,并对基因表达的蛋白进行原核表达和亚细胞定位,使该基因在冬凌草二萜成分的生物合成过程中的作用得到了进一步的阐述。     

刺萼参的染色体组型分析

本文报道刺萼参体细胞染色体数目2n=16,核型公式K(2n)=16=14m+2Sm,染色体相对长度组成为2n=16=10M2+6M1,核型不对称系数AS     

胶束电动毛细管色谱法测定半夏等药材中苯甲酸的含量

目的建立胶束电动毛细管电泳色谱法(MECC)测定半夏及其同科其它品种药材中苯甲酸的含量的方法。方法用MECC法对样品进行分析。毛细管柱内径75μm,长62.5 cm;运行电压25 kV,检测波长200 nm,分离温度35℃;緩冲液为30 mmol.L-1,SDS-30 mmol.L-1硼酸-15%甲醇(pH值9.5);压力进样,进样时间3 s。结果苯甲酸在0.044~2.2mg/m l浓度范围内具有良好的线形关系(r=0.9994),平均回收率为96.7%(RSD=2.4%,n=6),对半夏及其同科属其它品种共14个样品中的苯甲酸含量进行了测定。结论该方法快速、简便、并且较为准确,可供评价半夏等品种质量时参考。     

纪念《右江医学》创刊二十周年

<正> 光阴荏苒,岁月流逝。《右江医学》已走过了20年的历程。她对推广基层医学科技成果,提高防治疾病水平,促进本地区卫生事业的发展,推动与兄弟省、市、自治区之间医药卫生工作经验的交流,都作出了应有的贡献。值创刊纪念活动之际,我谨代表本刊编辑委员会向所有的关心、爱护和支持《右江医学》的各级领导、各有关部门,广大的作者、读者,致以衷心的感谢和亲切的问候!     

半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402生长抑制作用的研究

目的:观察并比较半夏类药材的不同提取物对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用。方法:应用MTT技术,检测半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用。并观察了不同提取物抑制作用的量效关系。结果:所有乙酸乙酯提取的部位都有比较好地抑制Bel-7402细胞增殖的作用(P<0.01);乙醇提取部位有一定抑制作用(P<0.05);而所有石油醚提取部位都无明显作用。此外,乙酸乙酯和乙醇提取部分对肝癌Bel-7402细胞生长抑制作用,存在着显著的量效关系,其中以亳州掌叶半夏最为明显。结论:半夏乙酸乙酯和乙醇提取物有抑制体外培养肝癌细胞增殖的作用,呈现出显著的量效关系。     

16个产地地乌药材的系统鉴定及质量评价

目的:构建地乌药材基原物种系统鉴定体系,并对全国16个产地的地乌药材进行综合品质评价,为地乌药材产地选择及临床用药安全奠定基础。方法:使用传统鉴别方法结合DNA条形码核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)序列分子鉴定技术快速鉴别地乌药材真伪,并基于HPLC-UV对地乌药材中5个有效成分进行含量测定,采用Welch Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.01%三氟乙酸溶液(30∶70),检测波长210 nm,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1。结果:传统鉴别及DNA条形码快速鉴别技术均能准确鉴别地乌药材真伪。BLAST比对分析发现,16个产地地乌药材均与林荫银莲花Anemone flaccida具有最大相似度;基于多指标成分含量测定表明湖北恩施板桥镇的地乌药材中5个三萜皂苷类成分含量之和最高(10.59%),其次为贵州毕节赫章(6.28%)和湖北长阳都镇湾(5.64%)。结论:DNA条形码技术可作为地乌药材传统鉴定技术的有效补充,该鉴别体系可保障地乌药材基原准确及临床用药安全。HPLC多指标成分综合评价及聚类分析结果表明在本研究所涉及的产地中,湖北恩施、长阳、五峰,贵州毕节和重庆金佛山的地乌药材质量较优,可作为地乌药材的重要产地。     

矿物药阳起石XRD Fourier指纹图谱研究

目的：建立矿物药阳起石的X射线衍射（X-Ray Diffraction,XRD） Fourier指纹图谱,为阳起石药材的鉴定提供新方法。方法：采用粉末XRD技术对矿物药阳起石进行分析,测定其XRD Fourier指纹图谱;以指纹图谱为对照,根据不同样品XRD图谱中各特征峰相对强度,以夹角余弦法和相关系数法计算各样品XRD图谱的相似度,并做聚类分析。结果：获得10批正品、3批掺杂阳起石药材和2批伪品的XRD图谱,其中10批正品图谱几何拓扑特征基本一致;利用该10批正品阳起石样品XRD图谱得到由18个共有特征峰组成的阳起石XRD指纹图谱;相似度分析显示,15批样品中,不同正品样品XRD图谱共有峰相似度均较高（>0.98）,掺杂样品相似度略低（0.85-0.97）,伪品样品相似度最低（<0.2）,三者相似度具有明显差异,可加以区分;聚类分析结果与相似度分析结果一致。结论：X射线衍射指纹图谱分析方法专属性强,准确可靠,可实现对矿物药阳起石的鉴别和质量评价。