鱼腥草注射液致类过敏反应的物质及其作用机制研究

目的:探讨鱼腥草注射液的类过敏反应特点、致类过敏反应的物质及其作用机制。方法:将比格犬随机分为4组:对照组,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸脂(吐温80)组,去吐温80鱼腥草注射液组,含0.5%吐温80鱼腥草注射液组。对照组动物静脉注射给予生理盐水;其余3组动物分别静脉注射相应的受试物;各组均注射1次。注射后即刻开始至给药后30min内,观察动物出现类似过敏反应的症状;于注射前及注射后10,30 min分别测定动物血压及呼吸频率,并经股静脉取血,分离血清。采用ELISA方法测定血清组织胺(HIS)、总补体活性(CH50)以及末端补体复合物(C5b-9)含量。结果:0.5%吐温80组及含0.5%吐温80鱼腥草注射液组的所有动物于给药后2~5 min开始出现类似过敏反应的症状,表现为耳部和口鼻皮肤红肿、挠头挠耳、甩头、恶心、添舌、烦躁不安等症状,动物步态不稳,有的动物静卧、排尿、排便,伴紫绀、呼吸加快、血压降低等,2组的阳性反应率均为100%。对照组及去吐温80鱼腥草注射液组的所有动物在注射后均未出现上述行为、皮肤、呼吸、血压等改变,阳性反应率均为0%。给药后10 min,0.5%吐温80组的CH50含量较对照组明显降低,C5b-9含量较对照组明显升高;给药后30 min,各组之间无明显差异;给药10 min及30 min,各组组胺含量无明显差异。结论:犬静脉注射0.5%吐温80和含0.5%吐温80鱼腥草注射液后,均出现强烈的类过敏反应,而去吐温80鱼腥草注射液则不诱导类过敏反应,表明鱼腥草注射液的过敏反应与其助溶剂吐温80有关。吐温80的类过敏反应与补体激活有关。     

凝胶法检测2种中药注射液中内毒素含量

目的:通过特异性及非特异性鲎试剂法对鱼腥草注射液及清开灵注射液的内毒素含量的检测,探讨特异性鲎试剂法检测中药注射剂中内毒素的可行性。方法:采用特异性和非特异性的鲎试剂,对不同批次的鱼腥草注射液、清开灵注射液进行检测。结果:特异性及非特异性的鲎试剂均可检测鱼腥草注射液,其无干扰的最小稀释倍数完全一致;用特异性鲎试剂可以检测清开灵注射液,而用非特异性鲎试剂不能检测。结论:在检测清开灵注射液内毒素含量时,用特异性鲎试剂代替非特异性鲎试剂进行检测是一种较为理想的优化方法。     

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅰ

目的:　观察广防己醇提取物(RAFE)急性以及不同剂量的RAFE对肾脏慢性毒性。方法:采用常规的急性毒性实验方法和用不同剂量的RAFE(2 5 . 0 ,12 .0 0 ,2 0 0. 0mg·kg^-1·d^-1)以及马兜铃总酸(10. 0mg·kg^-1·d^-1)给大鼠间断灌胃13周,分别于给药第4 ,8,13周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能和组织学变化。结果:RAFE的LD50 为36. 8g·kg^-1,LD50 95 %可信限为38 .8～2 .8 .9g·kg^-1;不同剂量的RAFE作用早期,大鼠肾功能改变为氮质血症、大量蛋白尿以及尿NAG酶升高。肾脏组织形态学:中、大剂量和总酸组给药早期主要表现以皮髓质交界为主的急性肾小管坏死,而后可见部分动物肾间质纤维化。结论:NAG可作为大鼠早期肾功能损伤的观测指标之一;RAFE中、大剂量间断灌胃13周均可导致大鼠肾小管功能损害。     

清开灵和生脉注射液联合用药对油酸型急性肺损伤家兔的治疗作用

目的:观察静脉注射清开灵、生脉注射液(生脉)及其联合用药对油酸型急性肺损伤(ALI)家兔的影响。方法:家兔随机分为11组:对照组,油酸组,治疗组分别包括清开灵和生脉以及清开灵+生脉小、中、大剂量组。iv油酸(0.05mL·kg^-1)复制家兔ALI模型后,立即iv上述药液,观察给予油酸前及以后30,60,120min时的呼吸频率和幅度,于各时间点测定动脉血气含量;实验后处死家兔取肺组织,测定肺组织LDH,CAT,MDA的含量及观察病理变化。结果:与油酸组比较,清开灵、生脉及清开灵+生脉的小、大剂量组的呼吸幅度均显著升高;清开灵+生脉小剂量组PaO₂显著升高(P<0.05),清开灵、生脉及清开灵+生脉小剂量组的PaCO₂均显著降低(P<0.05);清开灵、生脉各剂量组的MDA均显著降低,清开灵+生脉小剂量组的MDA显著降低、CAT显著增加;清开灵、生脉及清开灵+生脉小剂量组可以减轻油酸引起的病理改变。结论:清开灵+生脉小剂量对油酸型肺损伤家兔的疗效优于同剂量下的单独用药。     

清开灵和甲基强的松龙注射液联合用药对油酸型急性肺损伤家兔的治疗作用

目的:观察静脉注射清开灵、甲基强的松龙(MP)注射液及其联合用药对油酸型急性肺损伤(ALI)家兔的影响。方法:家兔随机分为11组:对照组,油酸组,治疗组分别包括清开灵和MP注射液以及清开灵+MP注射液小、中、大剂量组。iv油酸(0.05mL·kg^-1)复制家兔ALI模型后,立即iv上述药液,观察给予油酸前及以后30,60,120min时的呼吸频率和幅度,于各时间点测定动脉血气含量;实验后处死家兔取肺组织,测定肺组织LDH,CAT和MDA的含量,及观察病理变化。结果:与油酸组比较,清开灵和MP注射液小、中、大剂量组的呼吸幅度显著升高、呼吸频率显著降低(P<0.05);治疗30min时,清开灵+MP注射液小、大剂量组的PaO₂显著升高(P<0.05),120min时,清开灵、MP及清开灵+MP注射液小、中和大剂量组的PaCO₂显著降低(P<0.05);清开灵、MP注射液中、大剂量组的LDH显著升高、CAT和MDA显著降低(P<0.05);清开灵+MP小、中剂量组可以减轻由油酸引起的病理改变。结论:清开灵+MP小剂量对油酸型肺损伤家兔的疗效优于同剂量下 的单独用药;而清开灵或MP大剂量单独给药的疗效优于同剂量下的联合用药。     

周乐年教授治疗泄泻临床经验总结

对周乐年教授治疗泄泻的临证经验进行总结,归纳出周老对该病病因病机的看法,认为脾肾虚寒是泄泻的主要病机,肝郁气滞是泄泻发生的重要条件,痰热食瘀亦是发病的重要因素;从病因病机出发,阐释其临床辨证的精要,提出以益气健脾、温阳调中或疏肝理气、抑肝扶脾或化痰清热、和中止泻为治疗大法,或者诸法合用,总结其遣方用药的规律,尤其是临床治疗泄泻用方用药的特色,并附以验案,以期为临床泄泻的辨治提供参考。     

动态浊度法检测5种中药注射液的内毒素含量

目的:通过特异性及非特异性鲎试剂(TAL)动态浊度法对5种中药注射液的内毒素含量进行检测,探讨该方法对中药注射液检测的适用性。方法:采用特异性及非特异性动态浊度试剂盒,对不同批次的鱼腥草注射液、双黄连注射液、清开灵注射液、葛根素注射液、香丹注射液进行检测。结果:无色的中药注射剂如鱼腥草注射剂、葛根素注射剂对检测干扰较少,非特异性及特异性动态比浊法对其无显著影响;对非单一成分,颜色较深的中药注射液,如清开灵、香丹、双黄连注射液,采用动态比浊法进行检测,干扰大,检测结果不稳定;清开灵注射剂采用特异性试剂盒进行检测能有效的消除干扰,但香丹、双黄连注射液仍不能消除干扰。结论:用特异性或非特异性动态浊度法可以检测鱼腥草和葛根素注射液中的内毒素含量,采用特异性动态浊度法可以检测清开灵注射液中内毒素含量,双黄连和香丹注射液的检测结果不稳定。     

基于P2X7R介导的神经炎症研究颅痛宁颗粒对滑石粉眶下注射致三叉神经痛大鼠模型的药效及作用机制

目的 在动物模型上确证颅痛宁颗粒治疗三叉神经痛的有效性并研究其作用机制,为颅痛宁颗粒临床应用及精准治疗提供实验室数据支持。方法 雄性SD大鼠按照基础机械痛阈值分层随机分组,分别为正常组、模型组、卡马西平组（0.06 g·kg^-1·d^-1）、颅痛宁高、低剂量组（2.70、1.35 g·kg^-1·d^-1）,每组10只。大鼠面部眶下孔区域注射30%滑石粉悬浊液0.3 mL制作大鼠三叉神经痛模型。造模后2 h,各给药组灌胃给药10 mL·kg^-1;正常组和模型组同等条件下灌胃蒸馏水,每日1次,连续10 d。Von Frey毛刷测定大鼠机械痛阈值;全自动血液体液分析仪检测大鼠血常规;苏木素-伊红（HE）染色检测三叉神经节及延髓组织病理变化;透射电镜扫描延髓组织超微结构;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中炎症因子白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、神经肽P物质（SP）及β-内啡肽（β-EP）含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测白细胞介素-1β（IL-1β）、嘌呤能受体P2X7（P2X7R）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠痛阈值显著降低（P<0.01）;中性粒细胞绝对值（NEUT#）和中性粒细胞比例（NEUT）显著升高,淋巴细胞比例（LYMPH）显著下降（P<0.01）;血清中IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α含量显著增加（P<0.01）;脑组织中SP含量显著升高,β-EP含量显著减少（P<0.01）;IL-1β、P2X7R、p-p38 MAPK蛋白相对表达明显升高（P<0.05）;大鼠延髓组织HE及电镜结果可见神经元变性,小胶质细胞轻度增生、有髓神经数量减少、明显脱髓鞘;大鼠三叉神经纤维排列紊乱,部分神经纤维空泡化,轴突肿胀,施万细胞增生,可见脱髓鞘;与模型组比较,各给药组显著提高大鼠痛阈值（P<0.05,P<0.01）;降低NEUT#、NEUT,升高LYMPH（P<0.05,P<0.01）;显著降低血清中IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α和脑组织中SP水平（P<0.01）,增加β-EP水平（P<0.01）;显著下调IL-1β、P2X7R、p-p38 MAPK蛋白表达量（P<0.05,P<0.01）;显著改善大鼠延髓组织及三叉神经病理改变。结论 颅痛宁颗粒对滑石粉眶下注射致三叉神经痛大鼠模型具有显著的治疗作用,其机制与改善P2X7R介导的神经炎症,抑制有髓神经脱髓鞘有关。     

基于精密肝切片技术的野百合碱体外肝毒性初步研究

目的:对精密肝切片技术进行实验条件的优化,并依此技术对野百合碱的体外肝毒性进行初步的研究探讨.方法:利用震荡切片机制备肝切片,通过对培养液、切片厚度、pH及不同培养温度等条件下,肝切片MTT还原能力的测定,建立肝切片培养技术,并将肝切片与野百合碱共培养,连续监测法侧定GPT,GOT,LDH,GGT酶活浓度,BCA法测定蛋白含量,观察其对肝切片MTT还原能力及以上生化指标的影响.结果:精密肝切片厚度在200μm,pH6.8,37℃,BPM培养液中肝切片MTT还原能力最强;野百合碱0.02,0.1,0.5g·L-1与肝切片共培养24h,LDH漏出率显著上升,蛋白含量显著下降;野百合碱3个剂量组与肝切片共培养6h,对MTT还原能力及生化各项指标无明显影响.结论:大鼠精密肝切片在BPM培养基的优化培养条件下,MTT还原能力可维持24h;野百合碱0.02,0.1,0.5g·L-1与肝切片共培养24h,显示出一定的肝脏毒性.