刘平基于“肝藏魂”理论辨治肝硬化失眠经验

总结刘平教授基于"肝藏魂"理论辨治肝硬化失眠的临床经验。认为肝硬化失眠的基本病机是肝阴血虚损,魂不守舍;基本治法为滋阴养血,兼顾清热;方用一贯煎加减。并举验案1则。     

栀子苷对大鼠肝损伤及血清、肝脏、粪便中胆汁酸的影响

目的 探讨不同剂量栀子苷对大鼠肝脏的毒性,以及对其血清、肝组织及粪便中胆汁酸的影响。方法 60只SD大鼠,雌雄各半,按体质量随机分成空白组及栀子苷（50,100,200,400 mg·kg^-1）组,共5组,每组12只,每天灌胃给药1次,连续7 d,于第8天收集大鼠血清、肝组织和盲肠内容物。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）,门冬氨酸氨基转移酶（AST）,碱性磷酸酶（ALP）活性,白蛋白（ALB）,总胆红素（TBIL）,总胆汁酸（TBA）,肌酐（Crea）,尿素（Urea）含量,肝脏组织切片分别作苏木素-伊红（HE）染色,免疫组化检测细胞角蛋白7（CK7）,细胞角蛋白19（CK19）蛋白表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）测定肝组织CK7,CK19蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）,胆固醇27α-羟化酶（CYP27A1）,胆固醇12α-羟化酶（CYP8B1） mRNA表达情况,采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS）测定血清、肝脏及盲肠内容物中18种胆汁酸含量。结果 与空白组比较,各剂量栀子苷组TBIL水平显著升高（P<0.01）;400 mg·kg^-1栀子苷组ALT,AST活性和TBA含量明显升高（P<0.05,P<0.01）;HE染色表明,与空白组比较,栀子苷200,400 mg·kg^-1组肝组织的汇管区有胆管反应,胆管周围有炎症细胞的浸润,尤以栀子苷400 mg·kg^-1毒性明显。栀子苷400 mg·kg^-1栀子苷组肝组织中CK7,CK19表达较空白组明显增加（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,400 mg·kg^-1栀子苷组肝组织中甘氨熊脱氧胆酸（GUDCA）,甘氨猪去氧胆酸（GHDCA）含量明显下降（P<0.05,P<0.01）,牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）,猪去氧胆酸（HDCA）,胆酸（CA）,鹅去氧胆酸（CDCA）含量显著升高（P<0.01）,甘氨胆酸（GCA）,甘氨鹅去氧胆酸（GCDCA）,甘氨脱氧胆酸（GDCA）,甘氨石胆酸（GLCA）,牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）,GUDCA,GHDCA,熊去氧胆酸（UDCA）,牛磺石胆酸（TLCA）的含量占比降低,TCDCA,HDCA,CA,CDCA,脱氧胆酸（DCA）的占比增加;血清中GHDCA,石胆酸（LCA）含量显著下降（P<0.01）,牛磺猪去氧胆酸（THDCA）,牛磺胆酸（TCA）,GCA,TCDCA,UDCA,CA,CDCA,DCA含量明显增加（P<0.05,P<0.01）,CA/DCA显著升高（P<0.01）,且CA与CDCA含量占比分别上升19.60%和4.63%;与空白组比较,400 mg·kg^-1栀子苷组盲肠内容物中所有的胆汁酸含量均下降,其中GCA,UDCA,HDCA,GCDCA,GDCA,TLCA,GLCA,CDCA,DCA,LCA含量明显下降（P<0.05,P<0.01）。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,400 mg·kg^-1栀子苷组肝组织中CYP7A1,CYP27A1 mRNA表达明显增加（P<0.05,P<0.01）。结论 400 mg·kg^-1栀子苷灌胃,可导致大鼠明显的肝损伤,其肝脏、血清与粪便中胆汁酸发生显著改变,且同一种胆汁酸在肝脏、血清与粪便中的变化不尽相同。然而,由栀子苷所导致的肝损伤与体内胆汁酸变化间的因果关系尚不清楚,仍有待后续进一步研究给予阐明。     

黄芪总苷通过调控SIRT1表达对胆汁淤积性肝纤维化小鼠的影响

目的 探究黄芪总苷对胆汁淤积性肝纤维化小鼠的影响及其作用机制。方法 采用2种胆汁淤积性肝纤维化模型,0.1%DDC喂养C57BL/6小鼠8周,第5周起灌胃给予黄芪总苷112、56 mg/kg和奥贝胆酸4周;Mdr2^-/-小鼠8周龄时灌胃给予黄芪总苷56、28 mg/kg和奥贝胆酸3周,对照组和模型组分别灌胃给予等体积蒸馏水。给药结束后检测各组小鼠肝质量与肝脏系数、血清肝功能、肝组织病理学变化和肝组织纤维化相关指标的表达。结果 与对照组比较,DDC和Mdr2^-/-模型组小鼠肝质量和肝脏系数均升高(P<0.01),血清ALT、AST、ALP活性和TBA、胆红素水平均升高(P<0.01),肝组织病理可见结构紊乱、大量炎性细胞浸润,汇管区胶原沉积,胶原阳性面积和肝组织HYP水平均增加(P<0.01),肝组织α-SMA、Col1a1、Col4a1和TGF-β1表达均升高(P<0.01),SIRT1表达降低(P<0.01)。在2种模型中,与模型组比较,黄芪总苷56 mg/kg组小鼠肝质量和肝脏系数均降低(P<0.05,...     

单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值对急性脑桥梗死早期神经功能恶化的预测意义

目的探索单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值(MHR)对急性脑桥梗死早期神经功能恶化(END)的预测意义。 方法回顾性选取803例急性脑桥梗死患者,按是否发生END分为END组及非END组。比较两组临床资料、MHR、梗死面积(IS)、梗死类型、入院NIHSS评分。分析MHR与IS、梗死类型的相关性。采用多因素Logistic分析急性脑桥梗死患者发生END的影响因素。采用ROC分析危险因素对发生END的预测价值。 结果两组患者年龄、发病至入院时间、住院时长、入院NIHSS评分及高血压比例比较差异有显著性(P＜0.05)。END组MHR、IS均高于非END组(P＜0.05),END组旁正中脑桥梗死(PPI)患者多于非END组(P＜0.05)。END组MHR与IS呈正相关(P＜0.001)。入院NIHSS评分、MHR、年龄、高血压、IS及PPI是影响脑桥梗死患者发生END的危险因素(P＜0.05)。MHR对脑桥梗死发生END有良好的预测价值。 结论MHR对急性脑桥梗死END有良好的预测价值,可为临床提供参考。     

刘平治疗乙型肝炎肝硬化食管静脉曲张1例

<正>肝硬化是各种慢性肝病发展的晚期阶段,病理上以肝脏弥漫性纤维化、再生结节和假小叶形成为特征~([1])。门静脉高压致食管胃底静脉曲张是病情发展的表现,预后不佳,进展至后期可致血管破裂出血,危及患者生命~([2])。现将吾师刘平教授治疗肝硬化食管静脉曲张病例一例,与同道分享,以供参考。1病案实录     

虫草菌丝脂溶性部位的GC-MS分析

目的研究虫草菌丝中的脂溶性成分。方法采用石油醚提取虫草菌丝中的脂溶性成分,通过10%硫酸-甲醇对提取物进行甲酯化,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对虫草菌丝脂溶性成分进行分离与鉴定。使用VF-Waxms型毛细管色谱柱(60 m×0.25μm,0.25μm)进行分离,载气为高纯度氦气,进样温度220℃,流速1 mL·min~(-1);电离方式EI离子源,离子源温度200℃,接口温度230℃,溶剂延时3 min,m/z 30～600。采用建立的GC-MS方法对6批次虫草菌丝脂溶性部位中13种脂肪酸进行定量测定。结果从虫草菌丝中初步鉴定49种脂溶性成分,包括17种脂肪酸类、8种酮类、5种烷烃类、3种酰胺类、2种醇类、3种醚类、7种非脂肪羧酸酯类以及4种其他类化合物。其中脂肪酸类成分在虫草菌丝脂溶性成分中所占的比例高达89.40%,占绝对优势。完成了6批次虫草菌丝13种主要脂肪酸(占所有脂肪酸类成分的97.08%)的含量测定,总量在25.44～41.47 mg·g~(-1)之间。其中油酸、亚油酸与亚麻酸等不饱和脂肪酸含量较高,在18.06～29.98 mg·g~(-1)之间。结论采用GC-MS法完成虫草菌丝脂溶性部位化学成分的鉴定以及主要脂肪酸类成分的含量测定,为虫草菌丝开发利用及质量控制提供一定参考。     

“病-方（效）-证”的研究实践与创新发展（二）——一贯煎治疗肝硬化的方证病理学基础探析

基于肝炎后肝硬化气虚血瘀的核心病机及肝肾阴虚、湿热内蕴的主要证候病机,采用不同功效中医古典方剂进行肝硬化多模型的疗效比较研究,明确滋肾养肝的一贯煎对肝细胞损伤为主的肝硬化模型有突出的作用。临床研究证实,一贯煎可显著改善失代偿期乙肝肝硬化肝肾阴虚为主证患者的Child-Pugh评分;深入研究表明,一贯煎治疗肝硬化主要机制在于改善肝实质细胞衰减,调控干细胞分化促进肝再生,改善肝组织缺氧状态,抑制肝窦内皮细胞损伤,血管新生以及改善炎症微环境等。基于“病-方（效）-证”相关理论,认为肝硬化肝肾阴虚证的关键病理学基础与肝实质细胞衰减、肝再生障碍、肝组织缺氧、肝窦内皮损伤和血管新生,以及与巨噬细胞为主的炎症微环境病变有关。提示着力加强方证病理生物学基础研究可能成为中医药治疗慢性难治性疾病的突破口。     

双虎清肝颗粒中4种成分在大鼠血浆中体内药动学研究

目的 考察双虎清肝颗粒中马钱苷酸、獐牙菜苷、虎杖苷、甘草苷在大鼠血浆中的体内药动学。方法 10只大鼠随机分为2组,分别灌胃给予10.5、21.0 g生药/kg药物溶液,于0、5、15、30、45、60、120、240、360、480、600、1 440 min采血,UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法测定4种成分血药浓度,计算主要药动学参数。结果 双虎清肝颗粒不同剂量组中各成分C_max依次为獐牙菜苷>甘草苷>马钱苷酸>虎杖苷,T_max依次为獐牙菜苷>马钱苷酸>甘草苷>虎杖苷,AUC_0～t、AUC_0～∞依次为獐牙菜苷>马钱苷酸>甘草苷>虎杖苷。结论 本实验可为双虎清肝颗粒临床应用和效应物质基础研究提供参考。     

基于特征图谱和网络药理学的葛根芩连汤树脂醇提物质量标志物(Q-marker)预测

葛根芩连汤树脂醇提物可显著缓解伊立替康所致的肠毒性,但其整体质量和临床用药标准有待进一步研究。该文旨在建立葛根芩连汤树脂醇提物HPLC特征图谱,联合网络药理学预测作用靶点和信号通路的方法,预测出药效相关性的核心化合物,分析预测葛根芩连汤树脂洗脱物缓解伊立替康的潜在的质量标志物(Q-marker)。根据质量标志物“五原则”的特有性、可测性和溯源性,结合网络药理学技术可表征葛根芩连汤树脂醇提物的整体功效,初步预测葛根素、小檗碱、黄芩苷、黄芩素4个成分为葛根芩连汤树脂醇提物潜在的Q-marker,为葛根芩连汤树脂醇提物的质量控制和临床作用机制提供依据和参考。