欧亚旋覆花总黄酮对糖基化终末产物诱导L929细胞衰老及RAGE表达的影响

目的探讨欧亚旋覆花总黄酮(IBFTF)对糖基化终末产物(AGEs)诱导小鼠皮肤成纤维细胞株L929衰老的保护作用,和AGEs特异性受体(RAGE)的表达机制。方法采用0.100 g/L AGEs培养液刺激离体培养的L929细胞48 h制备衰老模型,药物组分别给予不同质量浓度IBFTF(0.1、0.2、0.4 g/L)继续作用6 h,阳性对照组给予0.1 g/L氨基胍半硫酸盐(AG)继续作用6 h,对照组给予完全培养液。检测胞内β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数量和细胞周期比例等衰老指标;检测胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平等氧化应激指标。采用细胞免疫荧光检测RAGE荧光强度,Western blotting和q RT-PCR分别检测RAGE蛋白和m RNA表达情况。结果 IBFTF可显著抑制AGEs诱导的L929细胞衰老并降低RAGE的蛋白和m RNA表达水平;不同质量浓度IBFTF作用于衰老的L929细胞后,可显著提高细胞内SOD活性,显著降低MDA和ROS水平,具有浓度依赖性。结论 IBFTF对AGEs诱导衰老的L929细胞有保护作用,其机制可能是通过抑制RAGE表达来实现的。     

欧亚旋覆花总黄酮对L929细胞衰老和自噬的影响

目的通过检测L929细胞中的衰老及自噬水平,探讨欧亚旋覆花总黄酮(IBFTF)对L929细胞衰老和自噬的影响,以更好地开发IBFTF的药用价值。方法分别使用0、5、10、20、40 g/L D-半乳糖作用于L929细胞,探究D-半乳糖诱导L929细胞衰老的最适浓度,分别使用浓度为25、50、100 mg/L IBFTF作用于衰老L929细胞探究IBFTF对L929细胞衰老和自噬的影响,通过MTT检测不同浓度D-半乳糖对L929细胞活力的影响,β-半乳糖苷酶染色检测不同浓度的D-半乳糖对L929细胞衰老进程的影响,荧光显微镜检测IBFTF对衰老L929细胞内活性氧生成的影响,通过吖啶橙染色和免疫荧光探究IBFTF对衰老L929细胞中溶酶体数量和LC3蛋白的表达,用Western-Blot检测细胞自噬相关蛋白水平。结果 IBFTF呈剂量依赖性延缓衰老L929细胞的衰老进程,在延缓衰老过程中L929细胞自噬水平也呈现剂量依赖性增高。结论 IBFTF延缓衰老L929细胞衰老的过程可能与自噬水平的上调有关。