C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响

[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.[结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列.     

NEK2、ERK2和P53在乳腺癌中的表达及意义

目的 通过检测乳腺原位癌及浸润性癌组织中NIMA相关蛋白激酶Nek2、细胞外信号调节激酶ERK2和细胞周期调节因子P53的表达,探讨其在乳腺癌的意义及相关性.方法 采用免疫组织化学ElivisionTMplus两步法,研究86 例乳腺浸润性癌、10例乳腺导管原位癌、20例正常乳腺组织NEK2、ERK2和P53的表达情况.结果 Nek2在三组中的表达率分别为87.2%、50.0%和10.0%;ERK2分别为96.7%、80.0%和10.0%;P53分别为0.0%、40.0%和58.1%.Nek2与ERK2的表达呈正相关,ERK2与P53的表达呈正相关,NEK2与P53的表达呈正相关.Nek2蛋白和ERK2蛋白的表达均与患者发生肿瘤的淋巴结转移、组织学分级及临床分期呈明显正相关,而与患者的年龄,肿物大小,月经情况,组织类型无关.而P53仅与组织学分级有关.结论 ERK2相关信号传导通路和Nek2、P53相关的细胞周期调节共同参与了乳腺癌的形成过程.     

复方丹参注射液抗脂多糖诱导的兔弥漫性血管内凝血

目的: 研究复方丹参注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥漫性血管内凝血(DIC)的作用。方法: 用LPS诱导兔DIC模型。凝固法测定纤维蛋白原含量,全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和纤维蛋白原含量;全自动血细胞分析仪进行血小板计数;全自动血浆分析仪测定谷丙转氨酶(ALT)以及血尿素氮(BUN);发色底物法测定蛋白C及抗凝血酶Ⅲ的活性。观察复方丹参注射液对LPS诱导的兔DIC的拮抗作用。结果: 兔耳缘静脉持续滴注LPS,观察到:APTT和PT显著延长;血小板计数和纤维蛋白原含量明显减少;ALT和BUN显著升高;蛋白C和抗凝血酶Ⅲ的活性明显降低。给予复方丹参注射液后,APTT和PT的延长明显缩短;血小板计数和纤维蛋白原的含量均明显恢复;ALT和BUN显著下降;蛋白C及抗凝血酶Ⅲ的活性显著改善。结论: 复方丹参注射液对LPS诱导的兔DIC有良好的拮抗作用。     

T4 DNA连接酶介导的5'RACE法克隆大鼠Nor1全长cDNA

目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/LKCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5'RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5'端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5'RACE扩增出2.5kb序列后,75AEST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5'RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T₄DNA连接酶介导的5'RACE是一种效率较高的克隆mRNA5'端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。     

切开复位解剖钛板内固定治疗跟骨骨折150例分析

目的:分析探讨采用切开复位解剖钛板内固定法治疗跟骨骨折的临床疗效和术后护理方法。方法:选取2009年9月-2011年9月本院共收诊的150例跟骨骨折患者,采用切开复位解剖钛板内固定治疗并分析其效果。结果:按Maryland标准评价术后足部功能:157患足中优94足,良48足,中13足,差2足,优良率为90.45%。术后5足在切口拐角处皮缘缺血发黑,1例发生慢性疼痛。结论:采用切开复位解剖钛板内固定治疗跟骨骨折,临床疗效好,患者恢复快,值得推广应用。     

胎儿肾动脉与大脑中动脉阻力比值对妊娠期肝内胆汁淤积症导致胎儿缺氧的诊断价值研究

目的探讨胎儿肾动脉与大脑中动脉阻力比值对妊娠期肝内胆汁淤积症导致胎儿缺氧的诊断价值。方法选取2017年1月~2018年5月期间本院收治的76例妊娠期肝内胆汁淤积症产妇,根据胎心监护和超声诊断结果分为胎儿宫内缺氧组(38例)、非宫内缺氧组(38例);另选择同期在本院产检的38例健康产妇作为对照组。三组产妇均采用彩色多普勒超声检查,探查大脑中动脉(MCA)和肾动脉(RA)的血流频谱,对比三组RA及MCA阻力指数(RI)和搏动指数(PI)和(S/D),并比较两组RA/MCA阻力比值。结果胎儿宫内缺氧组和非宫内缺氧组RA S/D值、RI值、PI值均显著高于对照组,MCA S/D值、RI值、PI值均显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P 0.05)。胎儿宫内缺氧组RA S/D值、RI值、PI值均显著高于非宫内缺氧组,MCA S/D值、RI值、PI值均显著低于非宫内缺氧组,差异均具有统计学意义(P 0.05)。胎儿宫内缺氧组和非宫内缺氧组S/D_(RA/MCA)、RI_(RA/MCA)及PI_(RA/MCA)均显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。胎儿宫内缺氧组S/D_(RA/MCA), RI_(RA/MCA)、及PI_(RA/MCA)均显著高于非宫内缺氧组,差异均具有统计学意义(P 0.05)。结论妊娠期肝内胆汁淤积症导致宫内缺氧胎儿肾动脉与大脑中动脉阻力比值存在明显升高表现,可为该病临床诊断与监测提供一定参考依据。     

肺淋巴瘤样肉芽肿的临床病理与分析二例报告

目的探讨肺淋巴瘤样肉芽肿病(PLG)的临床病理表现和治疗预后,提高对淋巴瘤样肉芽肿病(LyG)的认识。方法回顾我院收治的经开胸肺活检确诊的2例PLG患者的临床病理资料,分析其临床病理特点和治疗经验。结果 PLG为多系统疾病,主要累及肺部,其次是皮肤和中枢神经系统。X线是发现本病的主要手段,病理是确诊的主要依据。部分患者经化、放疗病情缓解。结论 PLG是一种少见的原发于肺的淋巴组织增生性疾病,是一种与免疫缺陷和EB病毒感染有关的富含T细胞的B细胞淋巴瘤。临床表现复杂,总的预后差,Ⅲ级的患者需联合化疗。     

颌骨骨岛的影像学分析

目的 运用锥形束计算机断层扫描(CBCT),对上下颌骨的骨岛进行影像学分析,为临床提高对骨岛的认识提供指导.方法 选取2013年1月至2017年1月在德阳市口腔医院进行CBCT检查的患者,寻找骨岛,用CBCT对骨岛进行影像学分析,分析骨岛大小、年龄、骨岛好发部位和骨岛与牙齿、骨皮质的关系,采用x2检验、秩相关及t检验对...     

重组蛇毒纤溶因子rFⅡ偶联到聚氨酯表面及其纤溶活性评价

目的：通过聚氨酯表面偶联重组蛇毒纤溶因子rF Ⅱ来提高其纤溶活性。方法：在聚氨酯（PU）表面上涂覆含羧基硬段的聚氨酯溶液（PU1）制备羧基化表面聚氨酯（CPU）,并用次甲基蓝吸附法测定表面羧基含量;在CPU表面上用EDC接枝双端氨基聚乙二醇（PEG）,并用滴定法测定该表面的PEG接枝量;在CPU-PEG表面用EDC偶联重组蛇毒纤溶因子（rF Ⅱ）,并用放射性同位素法测定该表面的rF Ⅱ偶联量,最后用试管定量法评价样品的纤溶活性。结果：CPU表面羧基含量为6.9μmol/cm^2,CPU-PEG2k和CPU-PEG4k表面PEG含量分别为0.162和0.180μmol/cm^2,CPU-PEG2k-^125Ⅰ-rFⅡ和CPU-PEG4k^125Ⅰ-rFⅡ表面rF Ⅱ含量分别为13.6和38.9ng/cm^2,与对照样品相比都有很大的提高。纤溶活性评价表明,所有偶联rF Ⅱ样品的纤溶活性都有提高,抗血栓性能得到有效改善。结论：具有PEG间隔臂偶联rF Ⅱ的样品其纤溶活性比没有PEG间隔臂的样品更优,采用PEG4k间隔臂偶联rF Ⅱ样品的纤溶活性为最高。     

小分子RNA与结直肠癌关系的研究进展

小分子RNA（microRNA,miRNA）是一类内源性非编码单链小RNA,通过与靶序列特异性相互作用,在转录后调节基因表达,miRNA可调节约30％的人类蛋白编码基因,参与增殖、分化、凋亡等多种调控［1］。结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是最常见的恶性肿瘤之一,我国CRC发病率呈逐年上升趋势,目前居所有肿瘤发病率的第五位（在经济发达的地区,CRC甚至跃居第二,仅次于肺癌）,且发病年龄亦有年轻化趋势［2］。越来越多的研究表明,特异性miRNA的异常表达在CRC的发生、发展,侵袭及转移中发挥重要作用。本文就miRNA与CRC的研究进展做一综述。