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重组人免疫缺陷病毒Ⅰ型逆转录酶的纯化及其动力学性质 总被引:3,自引:0,他引:3
目的纯化重组人免疫缺陷病毒Ⅰ型逆转录酶(HIV-1RT),筛选新的HIV-1RT抑制剂。方法在适宜的培养条件下诱导工程菌E.coliJM109(PKRT2)可高效表达重组人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)逆转录酶(RT)。应用DEAE-纤维素和磷酸纤维素离子交换柱层析法从细菌裂解液中分离、纯化重组RT。结果1升细菌培养液可得到1.1mg产物。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示所纯化的重组RT为由两个分子量分别为66kD和51kD的亚基组成的杂二聚体。酶活性测定结果表明,经纯化的重组RT具有很高的逆转录酶活性(比活力为1.4×104umg)。结论本文通过对RT反应条件的研究,优化了RT反应系统,并测定了磷甲酸钠(PFA)对重组RT的抑制效应,结果表明PFA对重组RT的抑制反应动力学机制与天然RT相同,从而进一步说明用此法纯化的重组RT可直接用于抗HIV药物的筛选与评价。 相似文献
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从黏膜免疫探讨脾虚痹证(类风湿性关节炎)发生机理 总被引:4,自引:0,他引:4
迄今为止,对于痹证病因已从导致痹证的内在因素(肾虚)、外在因素(风寒湿)、不内外因(软骨损伤)等方面进行了研究[1~3]。笔者现从黏膜免疫角度探讨脾虚对痹证发病的影响机制。 1 脾虚与痹证 脾为后天之本,气血生化之源,又主四肢肌肉。故脾虚则四肢不用。痹证虽有外因,但治疗应祛邪与扶正兼顾,尤其病久者需注意扶正。所谓“治风先治血”,血脉流畅,气旺而利于祛邪,如独活寄生汤、芎附散等均用人参、白术、茯苓、甘草等益气健脾之品。可见古人亦以补脾为治疗久痹、顽痹之大法。故又有人提出“脾虚是痹证的发病之本”[4、5]。 2 脾虚与免… 相似文献
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类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种严重危害人类健康的慢性自身免疫性疾病,其发病机制不十分明确,一直是国内外医学界关注的课题。研究表明,RA发病与CD4 T淋巴细胞有密切关系。本研究应用基闲芯片技术,对RA患者及正常人群外周血CD4~ T细胞基因差异表达进行探索,为阐明RA发病机制提供基因组学基础。1材料与方法1.1材料:按照1987年美国风湿病学会(ARA)修订的RA 相似文献
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目的 :对比观察滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠白细胞介素 1(IL 1)和白细胞介素 6 (IL 6 )活性的影响。方法 :将 5 5只雌性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、卵巢切除组、滋阴组和补阳组。于卵巢切除 1周后 ,给大鼠灌胃给药 ,连续给药 3个月。采用骨组织形态计量学方法对大鼠胫骨进行形态计量 ;分别采用小鼠胸腺细胞检测法和IL 6依赖株细胞增殖反应检测法测定IL 1和IL 6的活性。结果 :卵巢切除 3个月后 ,大鼠胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )明显降低 ,骨小梁吸收表面百分比(TRS % )和骨小梁形成表面百分比 (TFS % )皆显著增高。同时 ,IL 1和IL 6活性亦显著增高。给大鼠灌服滋补肾阴方和温补肾阳方后 ,均能使上述指标发生逆转 ,但程度有所不同 ,温补肾阳方的效果要明显优于滋补肾阴方。结论 :温补肾阳方对IL 1、IL 6活性的抑制作用明显强于滋补肾阴方 ,这是其对卵巢切除所致大鼠骨质疏松的预防作用之所以优于滋补肾阴方的机理之一。 相似文献
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脾胃为后天之本,“四季脾旺不受邪”,脾胃气虚,百病由生,可见脾虚证在疾病发生过程中占有重要位置。利血平塑造脾虚证模型是较经典的方法之一,它属于外周交感神经阻滞药,可以使体内儿茶酚胺类物质耗竭,使交感神经功能低下,副交感神经功能相对亢进,同时引起腹泻而耗气。模型出现的各种虚弱症状与临床脾虚症状十分相似,且具有条件易控制、模型较稳定之特点。 相似文献
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T形接骨板结合克氏针内固定治疗不稳定性桡骨远端骨折 总被引:2,自引:0,他引:2
桡骨远端骨折临床十分常见,占急诊骨折的17%左右〔1〕。大多数患者通过闭合复位石膏外固定治疗能取得良好疗效。但对于不稳定的粉碎性骨折,尤其是累及桡骨关节面的骨折,手法复位后用石膏托或夹板固定常不能维持复位后的位置,可出现桡骨短缩及骨折再移位,最终可导致骨折畸形愈合、腕关节功能障碍。近年来对桡骨远端粉碎性骨折多实施内固定手术治疗〔2〕。但该类骨折开放复位后,由于骨质粉碎严重,单纯应用T形钢板螺钉固定,无法为内固定物提供足够的支撑〔3〕。针对桡骨远端骨质粉碎后不易着钉的特性,作者于2004年10月~2005年6月采用T形钢板… 相似文献
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八味锡类散具有清热解毒、消肿止痛之功。常用于内有蕴热、外感时邪引起的瘟疫白喉、咽喉肿痛及溃疡性结肠炎 ( UC)等的治疗 ,用于治疗 UC时常用的方法是 po和灌肠 ,但究其两种不同途径给药治疗 UC的疗效和作用机制对比分析鲜见报道 ,本实验即从此角度出发 ,对二者进行对比实验研究。1 材料与方法1 .1 动物及分组 :新西兰家兔 8只 (中国药品生物制品检定所实验动物中心 )。清洁级健康 SD大鼠72只 (北京大学医学部实验动物科学部 ) ,雌雄各半 ,体重 ( 1 60± 1 0 ) g,随机分成正常组、灌胃模型组 (模型 组 )、灌肠模型组 (模型 组 )… 相似文献