择时针刺足三里穴对炎性痛症大鼠不同部位TRPV1的影响＊

目的 研究不同时间针刺足三里穴对炎性痛症大鼠不同部位中瞬态电压感受器阳离子通道香草酸受体亚型1（TRPV1）的影响。方法 使用清洁级雄性SD大鼠54只，驯养7天后，经过初选后，将确定出来的实验对象随机分为待模型复制组和空白组,然后将模型复制成功后的实验对象分为模型组和模针组，将模型组、模针组和空白组分别在特定的两个时间点（ZT8、ZT16）进行相应地处理；在第7天针刺治疗结束后，立即检测相对应时间点大鼠的痛阈，选择免疫组织化学检测法来确定提取的大鼠穴区局部皮肤、腰椎4-6的脊髓及背根神经节样本中TRPV1的情况。结果 ①在穴区皮肤：ZT8时间点，模型组皮肤组织中TRPV1含量明显多于空白组（P < 0.05）；而模针组穴区皮肤样本中TRPV₁含量明显低于模型组（P < 0.05）。相应地，在ZT16时间点，模型组皮肤样本目标中TRPV₁的表达亦明显多于空白组（P < 0.05）；而类似地，模针组穴区皮肤样本中TRPV₁的表达则少于模型组（P < 0.05）。②在脊髓中：ZT8时间点，模型组脊髓节段中TRPV₁的含量明显多于空白组中TRPV₁的表达量（P < 0.01），而与模型组比较，模针组脊髓节段样本组织中目标对象TRPV₁被上调的更为显著（P < 0.01）；在ZT16时，模型组脊髓节段中TRPV₁的含量与空白组脊髓节段中的TRPV₁相比显著增加（P < 0.01），与模型组相比，模针组脊髓节段中TRPV₁的表达量明显下调（P < 0.05）。③在背根神经节中：ZT8与ZT16两个时间点，模型组DRG样本中TRPV₁含量皆明显多于空白组（P < 0.01），而模针组DRG样本中TRPV₁的表达则低于模型组（P < 0.05）。结论 ①针刺足三里穴能够调节炎性痛症大鼠多个层面组织中TRPV₁的含量。②不同时间点针刺镇痛效应差异可能与不同时间点针刺后各个组织中TRPV₁表达的差异有关。     

择时针刺对炎性疼痛模型P2X7-/-小鼠穴区成纤维细胞p38MAPK表达的影响＊

目的 明确P2X7受体是否通过p38MAPK信号通路介导择时针刺对成纤维细胞骨架的重构。方法 选择P2X7-/-小鼠18只，根据辐射热甩尾法所测痛阈值完全随机分作空白组6只、造模组12只，12只造模动物再通过右足注射完全弗氏佐剂建立炎性疼痛模型。模型成功建立后，根据各动物所测痛阈值随机分为模型组6只、模型+针刺组6只。模针组动物捆绑固定后，在特定时间点ZT8（15：00）针刺足三里穴，每5 min捻转行针1次，每次行针1 min，频率为120 次/min。每天治疗1次，每次留针30 min，连续治疗7天。空白组和模型组在同一时间点进行相同方法的捆绑固定30 min，不针刺。采用Western Blot和RT-PCR检测小鼠穴区p38MAPK蛋白表达量和p38MAPK基因表达。结果 模型组小鼠皮肤组织中p38MAPK蛋白表达与空白组相比显著升高，有统计学意义（P < 0.01）；模针组小鼠皮肤组织中p38MAPK蛋白表达与模型组相比存在降低，有统计学意义（P < 0.05）。模型组小鼠穴位皮肤及皮下组织中p38MAPK基因表达，与空白组相比升高，有统计学意义（P < 0.05）；模针组小鼠穴位皮肤及皮下组织中p38MAPK基因表达与模型组相比降低，有统计学意义（P < 0.05）。结论 P2X7受体可能并非通过对p38MAPK的调整实现择时针刺对穴区成纤维细胞骨架重构的作用。     

列缺穴治疗虚寒型肺痿探析

通过收集整理文献,分析《灵枢·经脉》中有关列缺穴的记载及《金匮要略》中关于虚寒肺痿的条文,进而从列缺所主虚证与虚寒肺痿主症相关性、"治痿者独取阳明""久病入络"三方面进行辨析。提出宜辰、巳时灸列缺治疗虚寒肺痿的观点。列缺所主虚证之症候"欠,小便遗数",与虚寒肺痿"吐涎沫、必遗尿,小便数"之症密切相关。列缺治疗虚寒肺痿理论依据可靠,但目前尚未见列缺治疗肺痿的报道。朔本追源,辨明二者相关性,探讨列缺治疗虚寒肺痿理论依据,以期对临床治疗虚寒肺痿有所裨益。     

不同时间点针刺对穴区HSP27、MAP4的影响＊

目的 探讨不同时间点针刺对穴区成纤维细胞骨架重构的调控机理，为择时针灸镇痛提供理论依据。方法 在ZT12（19:00）和ZT16（23:00）两个时间点对大鼠进行造模和分组处理。采用右侧足垫部皮内注射完全弗氏佐剂建立佐剂性关节炎模型。治疗组每天针刺治疗1次，连续治疗7天。运用免疫印迹法检测大鼠穴位局部热休克蛋白27（HSP27）、微管相关蛋白4（MAP4）的表达量。结果 ①相同时间点、不同组之间的比较：在ZT12时间点，与空白组比较，模型组大鼠穴区MAP4、HSP27表达量明显增加（P < 0.05），与模型组比较，针刺组HSP27表达量明显降低（P < 0.05），MAP4表达量差异无统计学意义（P > 0.05）；在ZT16时间点，与空白组比较，模型组HSP27表达量明显增加（P < 0.05），MAP4表达量比较无差异（P > 0.05）。②不同时间点、相同组间比较：与ZT12空白组、针刺组比较，ZT16时间点HSP27、MAP4蛋白表达量明显增加（HSP27，P < 0.01；MAP4，P < 0.05）。③ZT16时间点针刺对HSP27、MAP4蛋白表达量的调整幅度均大于ZT12时间点。结论 ZT12与ZT16时间点针刺对穴区成纤维细胞骨架重构的不同调控效应，可能与这两个时间点针刺对骨架蛋白表达相关信号分子HSP27、MAP4的调整作用不同有关，从而具有不同的镇痛效应。     

P2X7受体在择时电针调整小鼠自发活动近日节律中的影响研究＊

目的 观察择时电针对野生型（WT）小鼠和P2X7基因敲除型（P2X7 KO）小鼠自发活动的影响，探讨P2X7受体在择时电针调整自发活动近日节律中的作用。方法 WT小鼠36只，P2X7 KO小鼠36只，两类小鼠各自分为CT8、CT16两个时间点处理，每个时间点又分为空白组（Con组）、假穴组（SA组）、电针组（EA组），共计12组，每组6只。采用Achoff导引方法，电针组于暗置第11天电针“百会”穴和“长强”穴，假穴组于暗置第11天电针腹部非经非穴点，空白组不做处理，运用Clocklab、Matlab分析电针对小鼠自发活动近日节律的影响及相位转移值的大小。结果 ①在CT8时，WT电针组小鼠自发活动相位前置（P < 0.01），P2X7 KO电针组小鼠自发活动相位前置（P < 0.05或P < 0.01）；②在CT16时，WT电针组小鼠自发活动相位后置（P < 0.05或P < 0.01），P2X7 KO电针组小鼠自发活动相位后置（P < 0.05）；③在CT8时电针组中，与P2X7 KO小鼠比较，WT小鼠自发活动相位前置明显（P < 0.05）。结论 P2X7可能参与了CT8时电针对自发活动昼夜节律的影响，这可能是择时电针治疗近日节律紊乱的科学基础之一。