参苓白术散对溃疡性结肠炎小鼠紧密连接及MLCK/MLC通路的影响

目的:观察参苓白术散对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织Occludin、P65、MLCK、MLC2、P-MLC蛋白表达的影响。方法:将60只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶阳性对照组及参苓白术散高、中、低剂量组,每组各10只。造模成功后,正常对照组和模型组按20 mL/kg给予生理盐水;柳氮磺吡啶组按0.52 g/kg给予柳氮磺吡啶水溶液;参苓白术散高、中、低剂量组分别按31.2、15.6、7.8 g/kg剂量给药。1次/d,共14 d。给药后HE染色观察结肠组织病理情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠结肠组织Occludin、P65、MLCK、MLC2、P-MLC蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠结肠组织受损严重,Occludin蛋白表达显著降低(P0.05),P65、MLCK、P-MLC蛋白表达显著升高(P0.01)。与模型组比较,参苓白术散高剂量组Occludin蛋白表达显著升高,P65、MLCK、P-MLC蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01)。结论:参苓白术散可改善UC小鼠一般情况,减轻结肠黏膜炎症,其机制可能是通过抑制MLCK/MLC通路的激活来调控肠道紧密连接蛋白,从而维持肠黏膜的正常通透性,进而修复肠黏膜损伤。     

补中益气汤含药血清对caco-2细胞SGLT1、P38MAPK通路及NHE3表达影响的研究北大核心CSCD

目的探讨补中益气汤含药血清对人结肠腺癌细胞(caco-2细胞)钠葡萄糖共转运体蛋白1(SGLT1)、P38MAPK通路及钠-氢交换体3(NHE3)蛋白及基因表达的影响。方法根据血清药理学方法制备补中益气汤含药血清,将caco-2细胞分为正常组、根皮苷组、根皮苷+补中益气汤含药血清组和根皮苷+空白大鼠血清组。检测各组SGLT1蛋白和基因、P38MAPK/Ezrin通路蛋白和NHE3蛋白的表达。结果与根皮苷组比较,根皮苷+补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1蛋白表达有所上调(P <0.05),且呈浓度依赖关系;根皮苷+15%补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1mRNA,NHE3蛋白及P38MAPK/Ezrin通路磷酸化蛋白表达均有所增加,与根皮苷组比较差异有显著性(P <0.05);根皮苷+补中益气汤含药血清组的SGLT1mRNA及NHE3、P-P38MAPK、P-Ezrin蛋白表达均高于根皮苷+15%空白血清组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论补中益气汤含药血清可上调caco-2细胞SGLT1的基因和蛋白表达、增加NHE3蛋白表达,这可能与其促进P38MAPK和Ezrin磷酸化有关。     

虎金方通过SIRT1/AMPK 通路对代谢相关脂肪性肝病小鼠肝脏脂质合成的影响

目的探讨虎金方对代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）模型小鼠的治疗作用及脂质合成的相关机制。 方法将50 只C57BL/6 雄性小鼠随机分为正常组、模型组及虎金方高、中、低剂量组（21.24、10.62、 5.31 g·kg-1）。正常组小鼠给予维持饲料,其余各组均给予高脂饲料,连续饲养14 周以复制MAFLD 动物模 型。从第15 周开始,正常组和模型组小鼠按10 mL·kg-1 给予0.9%生理盐水灌胃,虎金方各剂量组分别给予相 应剂量的浓煎药液灌胃（10 mL·kg-1）,每日1 次,连续给药8 周。末次给药后,禁食不禁水24 h,测定体质量 后进行解剖,测定肝脏湿质量,计算肝脏系数;采用RT-PCR 及Western Blot 法检测肝脏组织中沉默信息调节 因子1（SIRT1）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、甾醇调节元件结合蛋白（SREBP）、脂肪酸合成酶（FAS） mRNA 及蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠的体质量、肝湿质量及肝脏系数均显著增加（P＜ 0.001）;肝脏SIRT1 mRNA 及蛋白表达明显下调（P＜0.01,P＜0.001）,AMPK、SREBP、FAS mRNA 及蛋白表 达均明显上调（P＜0.01,P＜0.001）。与模型组比较,虎金方高剂量组小鼠的体质量、肝湿质量及肝脏系数均 明显降低（P＜0.05, P＜0.001）, 肝脏SIRT1 mRNA 及蛋白表达明显上调（P＜0.01, P＜0.001）, AMPK、 SREBP、FAS mRNA 及蛋白表达均明显下调（P＜0.05,P＜0.001）。结论虎金方可能通过调节SIRT1/AMPK 通路,促进肝脏脂质代谢,抑制肝脏脂质合成,从而缓解MAFLD 的进展。     

补中益气汤含药血清对caco-2细胞SGLT1、P38MAPK通路及NHE3表达影响的研究

目的探讨补中益气汤含药血清对人结肠腺癌细胞(caco-2细胞)钠葡萄糖共转运体蛋白1(SGLT1)、P38MAPK通路及钠-氢交换体3(NHE3)蛋白及基因表达的影响。方法根据血清药理学方法制备补中益气汤含药血清,将caco-2细胞分为正常组、根皮苷组、根皮苷+补中益气汤含药血清组和根皮苷+空白大鼠血清组。检测各组SGLT1蛋白和基因、P38MAPK/Ezrin通路蛋白和NHE3蛋白的表达。结果与根皮苷组比较,根皮苷+补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1蛋白表达有所上调(P 0.05),且呈浓度依赖关系;根皮苷+15%补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1mRNA,NHE3蛋白及P38MAPK/Ezrin通路磷酸化蛋白表达均有所增加,与根皮苷组比较差异有显著性(P 0.05);根皮苷+补中益气汤含药血清组的SGLT1mRNA及NHE3、P-P38MAPK、P-Ezrin蛋白表达均高于根皮苷+15%空白血清组,差异有统计学意义(P 0.05)。结论补中益气汤含药血清可上调caco-2细胞SGLT1的基因和蛋白表达、增加NHE3蛋白表达,这可能与其促进P38MAPK和Ezrin磷酸化有关。     

虎金方对小鼠非酒精性脂肪肝的作用及对SIRT1/PPARα通路的影响

目的探讨虎金方对高脂饮食(HFD)导致的非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型小鼠的治疗作用及相关作用机制。方法将50只雄性SPF级C57/BL6J小鼠随机分为正常组,模型组,虎金方高、中、低剂量组。模型复制成功后,正常组和模型组小鼠按10 mL·kg^-1给予0.9%生理盐水灌胃;虎金方各组分别按高、中、低(21.24、10.62、5.31 g·kg^-1)剂量给予虎金方浓煎药液灌胃,每日1次,共4周。模型复制及给药期间每周称量小鼠体质量,并观察一般状况。给药结束后收集血液用于检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG),并取整块肝脏,称质量并肉眼观察其外观大小、质地及颜色。一部分做成病理切片,用于HE染色,剩余肝脏组织用于以Western Blot法检测沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、活化过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)蛋白的表达。结果与正常组比,模型组最终体质量明显增加(P<0.001);肝脏体积增大,呈黄色,质量增加明显(P<0.001);血清TC、TG上升明显(P<0.05,P<0.001);肝小叶结构被破坏,肝细胞肿胀变形;SIRT1、PGC-1α、PPAR-α蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.001)。给药后,与模型组比,虎金方高剂量组最终体质量下降明显(P<0.05),肝湿质量降低(P<0.001),TG明显下降(P<0.001),SIRT1、PGC-1α、PPAR-α蛋白表达均明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论虎金方有治疗小鼠非酒精性脂肪肝的作用,其作用机制可能与其调节SIRT1/PPAR-α通路,减轻肝脏脂质沉积有关。     

介孔生物活性玻璃研究进展

生物活性玻璃(BG)因其具有良好的成骨性能及生物活性,已成为骨组织工程领域的研究热点,但其仍然存在细胞黏附性差、载药量小等不足。介孔生物活性玻璃(MBG)是在生物活性玻璃和介孔二氧化硅(MS)基础上研制的新型材料,其内部存在大量的纳米级孔道,并具有更大的比表面积、更好的生物相容性及生物活性,因而在骨组织工程领域具有极大的应用前景。本文就介孔生物活性玻璃的制备及其实验研究进展作一综述,以期为相关研究提供理论基础与实验参考。     

巨噬细胞维持骨稳态及促进骨修复的作用机制概述

骨代谢受免疫系统的精确调控,在众多骨疾病中都能观察到骨质的明显破坏,如RA、骨质疏松症、骨折、颗粒诱导的骨质溶解等,这些疾病均与炎症反应有关。巨噬细胞是异质性免疫细胞,在不同的微环境中能被极化为促炎的M1型或抑炎的M2型,且表达并释放不同的细胞因子,这对于骨的生理及病理状态都十分重要。最近的研究表明,巨噬细胞定居于骨组织并与骨细胞相互作用,对维持骨稳态及促进骨修复起关键作用。文章对巨噬细胞在其中的作用机制作一综述。