基于PKCθ/STAT3信号通路探讨虎杖苷抑制溃疡性结肠炎小鼠Th17细胞的效应

目的 探讨虎杖苷对小鼠溃疡性结肠炎（UC）的治疗作用,并通过其调控蛋白激酶Cθ（PKCθ）/信号转导与转录激活因子3（STAT3）通路信号对辅助性T细胞17（Th17）细胞效应的抑制作用探讨其治疗UC的作用机制。方法 32只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、虎杖苷组（0.045 g·kg^-1）及柳氮磺吡啶组（0.5 g·kg^-1）。采用3%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液给与小鼠自由饮水构建UC模型,虎杖苷和柳氮磺吡啶组于造模前0.5 h灌胃给药,连续7 d,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。末次给药后取结肠组织,苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化,流式细胞术检测结肠黏膜固有层中Th17比例,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素-17A（IL-17A）的表达。磁珠分选提取C57BL/6小鼠脾脏CD4⁺T细胞进行体外培养,加入细胞刺激合剂刺激并随机分为正常组、模型组、虎杖苷低、高剂量组。流式细胞术检测虎杖苷对Th17效应的影响及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化PKCθ和STAT3的蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降、疾病活动指数（DAI）评分显著升高（P<0.01）,结肠黏膜上皮破损并可见黏膜及黏膜下层炎细胞浸润明显,结肠黏膜固有层中Th17的比例显著升高（P<0.01）,血清IL-17A的含量显著增加（P<0.01）;与模型组比较,虎杖苷和柳氮磺吡啶组体质量及DAI评分均有显著的改善（P<0.01）,结肠组织损伤程度明显改善,结肠黏膜固有层中Th17的比例显著下降（P<0.01）,血清中IL-17A的含量显著下降（P<0.01）。体外实验显示,与正常组比较,模型组Th17细胞比例显著增加（P<0.01）,PKCθ和STAT3的磷酸化水平显著升高（P<0.01）;与模型组比较,虎杖苷组Th17细胞比例显著下降（P<0.01）,PKCθ和STAT3的磷酸化水平显著降低（P<0.01）。结论 虎杖苷能够抑制PKCθ以及STAT3的磷酸化表达,进而抑制Th17细胞分泌IL-17A,改善肠黏膜炎性病理,对UC起治疗作用。     

驴食草酚调控ERK1/2和p38 MAPK信号通路防治溃疡性结肠炎的研究

目的 基于ERK1/2和p38 MAPK信号通路探讨驴食草酚对溃疡性结肠炎小鼠的干预作用。方法 将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、驴食草酚组和柳氮磺吡啶组,每组8只。模型组、驴食草酚组和柳氮磺吡啶组小鼠均采用饮水中添加3%葡聚糖硫酸钠溶液方法构建溃疡性结肠炎模型,连续7 d。从实验第1天起,驴食草酚组给予驴食草酚10 mg/kg灌胃,柳氮磺吡啶组给予柳氮磺吡啶0.5 g/kg灌胃,正常组和模型组灌喂等量生理盐水,均连续7 d。干预期间观察各组小鼠体重、粪便性状及便血情况,计算疾病活动指数(DAI)。末次灌胃后处死小鼠,测量结肠长度,HE染色观察结肠组织病理形态,酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素(IL)-17A含量,流式细胞术检测结肠组织中中性粒细胞比例,Western blot法检测结肠组织中ERK1/2、p-ERK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达情况。结果 模型组小鼠体重明显低于正常组(P<0.05),DAI明显高于正常组(P<0.05),结肠长度明显短于正常组(P<0.05),驴食草酚组和柳氮磺吡啶组各指标均较模型组明显改...     

从“肺与大肠相表里”探究鼠李糖乳杆菌对过敏性哮喘小鼠ERK1/2和p38 MAPK通路的影响

目的 基于“肺与大肠相表里”理论探讨鼠李糖乳杆菌对过敏性哮喘小鼠细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路及相关免疫细胞的影响。方法 将18只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、鼠李糖乳杆菌组,每组6只。采用卵白蛋白(OVA)致敏加激发方法构建小鼠过敏性哮喘模型,鼠李糖乳杆菌组于雾化激发前给予鼠李糖乳杆菌灌胃,连续7 d,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。末次灌胃后取各组小鼠肺组织和结肠组织,HE染色进行组织病理观察;ELISA法检测血清OVA特异性IgE含量,流式细胞术检测肺组织中2型固有淋巴样细胞(ILC2)比例,Western blot法检测肺组织中p-ERK1/2和p-p38 MAPK表达情况。结果 与对照组比较,模型组小鼠支气管及血管周围存在明显炎症细胞浸润,部分肺泡结构消失;结肠腺体排列紊乱,隐窝和杯状细胞明显减少,黏膜及黏膜下层炎性细胞浸润;血清OVA特异性IgE含量、肺组织中ILC2比例、肺组织中p-ERK1/2及p-p38 MAPK相对表达量均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,鼠李糖乳杆菌组...