黄芪提取物对冷冻保存原代人胎肝细胞的保护作用

目的:观察黄芪提取物(AE)对原代人胎肝细胞经冻存复苏后活性变化的影响,以探索改善人肝细胞冻存效果的新方法。方法:采用二步灌注法分离人胎肝细胞,细胞分别加入由不同浓度AE配制的五种冻存保护剂(Ⅰ:10%DMSO;Ⅱ:5%DMSO 2 mg/L AE;Ⅲ:5%DMSO 20 mg/L AE;Ⅳ:5%DMSO 60 mg/L AE;Ⅴ:5%DMSO 100 mg/L AE),冷冻保存1个月。1个月后快速复苏,进行细胞活率、形态学及基本功能检测。结果:人胎肝细胞在经不同保护剂冻存复苏后,其活率、形态学及功能表现有所不同,其中Ⅳ、Ⅴ组复苏后细胞的存活率和24 h贴壁率,与Ⅰ组无显著差异(P>0.05),但显著高于Ⅱ、Ⅲ处理组(P<0.05);Ⅳ组复苏后细胞的白蛋白与天门冬氨酸转氨酶浓度测定、氯化铵转化实验结果显著优于其它各组(P<0.05)。结论:AE可对原代人胎肝细胞冷冻保存有保护作用,其中60 mg/L是最佳浓度;AE与二甲基亚砜联合使用降低了冻存保护剂DMSO的浓度,表明两者有协同作用。     

缺血预处理对高原大鼠肝脏缺血/再灌注损伤早期的影响

目的:了解在高原缺血预处理(IPC)对肝脏缺血/再灌注损伤(I/R)早期保护作用及其机制.方法:SD大鼠45只随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组.各组恢复血流后分别于1,3,6 h取血液标本,检测血清ALT(nkat/L)、丙二醛(MDA,mmol/L)、NO(μmol/L)的含量.结果:缺血预处理组NO的水平明显高于缺血再灌注组(1 h:95.8±10.1 vs 64.2±6.8,P＜0.01;3 h:91.2±9.7 vs 69.5±7.2,P＜0.01;6 h:77.4±8.6 vs 63.7±6.1,P＜0.01),低于假手术组;而ALT(1 h:2257.1±201.7 vs 2912.2±398.4,P＜0.01;3 h:2465.5±243.4 vs 3637.4±441.8,P＜0.01;2545.5±223.4 vs 4027.5±496.8,P＜0.01)、MDA(1 h:25.1±4.3 vs 38.7±7.6,P＜0.01;3 h:27.5±5.4 vs 45.3±8.8,P＜0.01;34.2±6.7 vs 53.2±10.5,P＜0.01)明显低于缺血再灌注组,高于假手术组.结论:在高原缺氧环境下,缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有明显保护作用,其机制可能与缺血与预处理抑制肝脏脂质过氧化物的产生,提高内源性NO的产生,改善肝脏的微循环有关.     

腹腔镜胆总管探查内置双“J”管一期缝合治疗老年人胆囊结石合并胆总管结石临床疗效分析

目的探讨腹腔镜下行胆总管探查双“J”管置入一期缝合治疗老年人胆囊结石合并胆总管多发结石的应用价值。方法回顾性分析2014年12月至2018年11月收治的胆囊结石合并胆总管结石行腹腔镜胆总管探查术(LCBDE)一期缝合的102例老年患者临床资料,根据是否内置双“J”管分为双“J”管组49例,非双“J”管组53例。比较两组患者的相关临床指标。结果两组手术时间差异无统计学意义(P>0.05),与双“J”管组比较,非双“J”管组术后腹腔引流时间、住院时间明显延长、胆漏明显增加(均P<0.05)。结论腹腔镜胆总管探查内置双“J”管一期缝合治疗老年人胆囊结石合并胆总管结石,明显降低胆漏发生率,可作为老年人胆囊结石合并胆总管结石优先选择的术式。     

不同冻存液改善人胎肝细胞冻存质量比较

目的：通过对不同冻存液冻存人胎肝细胞进行比较,探索一种效果较好的冻存液以改善冻存肝细胞质量.方法：实验于2004-08/11在南方医科大学珠江医院中心实验室完成.采用二步灌注法分离人胎肝细胞,将分离后的胎肝细胞分别以3组不同冻存液（HAMF-12,RPMI-1640,DMEM）在液氮中冷冻保存4周.4周后快速复苏胎肝细胞,进行存活率、形态学及尿素、白蛋白、谷草转氨酶分泌量检测.结果：①HAMF-12组生存率为（86.0&;#177;2.4）%,明显优于RPMI-1640组（81.9&;#177;6.5）%和DMEM组（82.1&;#177;4.6）%.②HAMF-12组肝细胞极性恢复快,肝细胞生长旺盛,细胞膜完整,胞浆内有丰富颗粒,核仁清楚,少数细胞内出现空泡,与对照组肝细胞形态相似.③用HAMF-12组液冻存人胎肝细胞复苏后,尿素、白蛋白、谷草转氨酶分泌量优于RPMI-1640组和DMEM组.结论：①在其他冻存条件相同下,HAMF-12冻存液显著提高了人胎肝细胞冻存质量,优于RPMI-1640液、DMEM液.②复苏后HAMF-12组肝细胞形态学光镜下观察与刚分离的肝细胞无明显差异,进行原代培养后肝细胞极性恢复较好.     

急性胰腺炎合并肝损害114例临床分析

目的分析急性胰腺炎合并肝损害的特点,探讨其发病机制。方法对我院1998年1月至2011年2月以来收治的176例急性胰腺炎（AP）患者的临床资料进行回顾性分析。结果 176例AP中合并肝损害患者114例,占64.8%,其中轻型胰腺炎（MAP）占60.6%（94/155）,重型胰腺炎（SAP）占95.2%（20/21）,SAP发生肝损害较MAP高,且损害的程度较MAP重,差异具有统计学意义,SAP肝功能恢复时间较长。结论急性胰腺炎易合并肝功能损害,其损害程度与胰腺炎的病情轻重有关,其机制可能与胆道压力、氧自由基水平、细胞因子等有关。     

56例左半结肠癌并急性肠梗阻临床分析

目的探讨左半结肠癌致急性肠梗阻不同的手术方式。方法回顾分析我院1999年至2009年收治56例左半结肠癌致急性肠梗阻不同手术方式的治疗效果。结果先行结肠造口,3周左右待患者全身情况改善后再行肿瘤根治性手术5例,Ⅰ期切除吻合近端结肠造口术9例,均恢复良好。Ⅰ期切除吻合术中采取阑尾切除术后置管注入大量生理盐水灌洗清洁肠道42例,2例发生吻合口瘘,其中1例因多器官衰竭死亡;1例发生肺部感染,1例切口感染,其余均治疗痊愈。结论左半结肠癌致急性肠梗阻Ⅰ期手术切除吻合术是安全、可靠的。     

免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞及初步鉴定

目的:应用免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞,观察其分选效果,建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,在自制培养基下贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,锥虫蓝拒染实验计数MACS分选前后细胞活力.流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;流式细胞仪分析培养细胞CD29、CD44、CD34和HLA-DR表达情况.结果:通过MACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml hMAPCs,分选后的hMAPCs细胞生长良好,最长传代到第20代.分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;流式细胞仪分析获取的CD45-、GlyA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪检测hMAPCs中CD29阳性表达细胞比率为99.2%,CD44阳性细胞比率为98.3%,CD34阳性细胞比率为1.2%,HLA-DR阳性细胞比率为5.3%.结论:CD45、GlyA免疫微磁珠负分选可从骨髓中分离高纯度的hMAPCs;分选后hMAPCs在自行研制的培养基中有较强的增殖能力.     

高原背驮式原位肝移植1例报告

目的：初步探讨高原背驮式原位肝移植手术方法及其围手术期处理。方法：对1例肝炎后肝硬化失代偿期病人实施同种异体背驮式原位肝移植手术及其术后处理。结果：术中无肝期时间72min。术中出血1750ml。自体血回输1500ml，术后加强监护和抗炎、抗排斥、抗病毒、抗凝、保肝、利胆、支持等治疗后恢复良好。结论：术中减少出血，尽可能采取自体血回输，缩短无肝期，以及术后加强监护和及时处理。可降低术后并发症的发生。