木犀草素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

目的观察木犀草素(Luteolin)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响,并通过转录组学探讨其分子机制。方法体外培养人卵巢癌细胞,设立空白对照组、Luteolin组(10、20、40μmol·L^-1),给予药物干预48 h。CCK-8法检测细胞增殖抑制率;EdU实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Hochest33342染色观察细胞的形态学变化;转录组测序分析空白对照组与40μmol·L^-1Luteolin组干预48 h的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);根据转录组测序结果,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1 mRNA的表达。结果与空白对照组比较,Luteolin组细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组EdU阳性细胞率均显著降低(P<0.05);Luteolin组G0/G1期细胞比例均显著降低(P<0.05),S期细胞比例均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组Hochest33342染色存在细胞凋亡现象;通过转录组测序分析,筛选获得1476个DEGs,挖掘到包括CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1调控细胞增殖与凋亡的DEGs;与空白对照组比较,Luteolin组的CDKN1A、GADD45A、ATF4、DDIT3 mRNA表达水平上调(P<0.05),CDC20、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1 mRNA表达水平下调(P<0.05)。结论 Luteolin可抑制SKOV3细胞的增殖及诱导其凋亡,其机制可能涉及CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1多基因的调控。     

复方大七气汤联合顺铂对上皮性卵巢癌的作用

目的:研究复方大七气汤联合顺铂对上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的作用及其相关机制,为上皮性卵巢癌的临床治疗提供新思路。方法:用人上皮性卵巢癌SKOV3细胞株构建60只裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为6组,每组10只,分别为模型组(生理盐水),复方大七气汤低剂量组(15.16g/kg)、中剂量组(30.33g/kg)、高剂量组(60.66g/kg),顺铂组(3mg/kg),联合组(复方大七气汤30.33g/kg+顺铂3mg/kg),连续给药14天,每隔两天测量瘤体积,治疗结束后剥取瘤体称重。采用TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR和Western-blot检测肿瘤组织中信号转导子与转录激活子3(STAT3)、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA的表达。结果:与模型组相比,治疗组瘤体积、瘤重均显著减小,联合组瘤体积和瘤重均显著小于其余各组。治疗组STAT3与Bcl-2mRNA及蛋白表达均显著下调,Bax mRNA表达均显著上升,联合组STAT3、Bcl-2 mRNA及蛋白表达最低,Bax mRNA及蛋白表达最高。结论:复方大七气汤对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤具有抑制作用,能促进细胞凋亡,其机制可能与减少STAT3表达,上调Bax表达、下调Bcl-2表达有关。