探讨补阳还五汤通过AMPK/ULK1线粒体自噬通路抑制细胞焦亡治疗糖尿病周围神经病变

目的 观察补阳还五汤通过腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/UNC-51样激酶1（ULK1）线粒体自噬通路抑制细胞焦亡治疗糖尿病周围神经病变（DPN）的作用机制。方法 动物实验采用雄性SPF级SD雄性大鼠（6~7周）60只,按体质量进行编号,计算机产生随机数字法随机分为4组,分别为正常组、模型组、α-硫辛酸组（60 mg·kg^-1）、补阳还五汤组（15 g·kg^-1）,每组15只。通过注射链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病模型。造模成功后α-硫辛酸组和补阳还五汤组分别给与相应药物,正常组和模型组给予生理盐水。给药12周结束后检测感觉神经传导速度（SNCV）和机械性痛阈（PWT）。免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测背根神经节（DRG）中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、磷酸化UNC-51样激酶1（p-ULK1）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、选择性自噬受体（p62/SQSTM1）、Beclin1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达。免疫荧光检测gasdermin D的N端（N-GSDMD）表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖显著升高（P<0.01）,SNCV、PWT显著降低（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1显著降低（P<0.01）,p62、NLRP3、N-GSDMD/GSDMD、IL-1β、剪切的（cleaved） Caspase-1/Caspase-1显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各用药组SNCV、PWT显著升高（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1明显升高（P<0.05,P<0.01）,p62、N-GSDMD/GSDMD、cleaved Caspase-1/Caspase-1、NLRP3、IL-1β明显降低（P<0.05,P<0.01）;与α-硫辛酸组比较,补阳还五汤组SNCV、PWT明显升高（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-ULK1/ULK1明显升高（P<0.05）,NLRP3、N-GSDMD/GSDMD明显降低（P<0.05）。结论 补阳还五汤通过AMPK/ULK1通路调节线粒体自噬抑制细胞焦亡,防治DPN,其治疗效果较α-硫辛酸可能更好。     

从氧化应激角度探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变大鼠的治疗作用

目的 基于氧化应激探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠的神经保护作用机制和方中黄芪用量。方法 90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、α-硫辛酸干预组、补阳还五汤高黄芪剂量组（中药高剂量组）、补阳还五汤中黄芪剂量组（中药中剂量组）、补阳还五汤低黄芪剂量组（中药低剂量组）。除正常组外,其余各组大鼠均用高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病。各药物干预组分别持续给药12周。含量依次为α-硫辛酸60 mg·kg^-1·d^-1、中药高剂量组15 g·kg^-1·d^-1、中药中剂量组8.75 g·kg^-1·d^-1、中药低剂量组5.625 g·kg^-1·d^-1。给药结束后检测机械性痛阈（PWT）和神经传导速度（SNCV）;检测谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）。取L4-5背根神经节（DRG）,电镜观察各组神经元线粒体形态结构;检测呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性,和线粒体膜电位,免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/核因子E₂相关因子2（Nrf2）通路中主要蛋白：磷酸化单磷酸腺苷活化蛋白激酶（p-AMPK）、磷酸化核因子E₂相关因子2（p-Nrf2）、血红素氧合酶-1（HO-1）、醌NADH脱氢酶1（NQO1）的表达。结果 与正常组比较,模型组空腹血糖升高（P<0.01）,SNCV、PWT、GSH含量均降低（P<0.01）,MDA含量升高（P<0.01）;线粒体损伤明显,多数呈空泡样改变;呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性和线粒体膜电位均显著降低（P<0.01）;p-AMPK、p-Nrf2、HO-1、NQO1降低（P<0.01）。与模型组比较,α-硫辛酸组及中药高剂量组SNCV、PWT、GSH上升,MDA降低（P<0.05,P<0.01）,线粒体结构损伤减轻;呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性和线粒体膜电位均显著升高（P<0.01）,p-AMPK、p-Nrf2、HO-1、NQO1明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 补阳还五汤通过AMPK/Nrf2通路调节氧化应激,治疗DPN。其治疗作用与黄芪的用量有一定联系,其中补阳还五汤高黄芪剂量组抑制氧化应激的作用较补阳还五汤中黄芪剂量组和补阳还五汤低黄芪剂量组更明显。     

中医药治疗慢性心力衰竭的网络药理学研究进展

近年来网络药理学的出现为阐释中医药治疗慢性心力衰竭的作用机制提供了新的方法,相关研究也不断涌现。从网络药理学的主要研究方法、常用工具、中药活性成分及单药防治慢性心力衰竭的网络药理学研究、中药复方防治慢性心力衰竭的网络药理学研究以及网络药理学所面临的问题与挑战几方面进行综述,总结目前研究进展,并为今后的相关研究提供参考。     

基于SIRT1/p53介导的细胞凋亡途径探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变的治疗作用及方中黄芪用量

目的:通过观察补阳还五汤调节沉默信息调节因子2相关酶1 (SIRT1)/p53通路发挥对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的神经保护作用,探讨其治疗DPN的机制和方中黄芪用量.方法:90只SD大鼠随机分为正常组,模型组,DPN加含120 g黄芪的补阳还五汤组(BYHW120组),DPN加含60 g黄芪的补阳还五汤组(BY...     

补阳还五汤对糖尿病大鼠周围神经线粒体运输的作用

目的：基于线粒体运输探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变(DPN)的防治作用机制。方法：SD大鼠用高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病。45只糖尿病大鼠随机分为DPN组、α-硫辛酸组、补阳还五汤组,每组15只,另设15只标准喂养大鼠为正常组。α-硫辛酸组、补阳还五汤组分别给与α-硫辛酸60 mg·kg^-1·d^-1、补阳还五汤15 g·kg^-1·d^-1灌胃治疗12周。给药结束后检测机械性痛阈(PWT)和运动神经传导速度(MNCV),取双侧坐骨神经及双侧L4-5的背根神经节。用50 mmol·L^-1葡萄糖和250μmol·L^-1棕榈酸钠干预NSC34细胞建立细胞损伤模型,随机分为空白组(10%空白血清)、DPN组(10%空白血清)、α-硫辛酸组(10%α-硫辛酸含药血清)、补阳还五汤组(10%补阳还五汤含药血清)、补阳还五汤加Compound C(CC)组(10%补阳还五汤含药血清+10μmol·L^-1 CC),分别干预2...