对氨基苯砷酸及其氧化物的色谱研究

为探讨对氨基苯砷酸(PABAA)及其氧化物的色谱行为，用紫外分光光度计分析了PABAA及其氧化物的光谱特征后．在十八烷基键合相硅腔柱上，以甲醇-缓冲液作流动相，研究了二容量因子随流动相离子强度、柱温、甲醇含量变化的规律。用季铵盐作离子对试剂，反相离子对色谱法分离PABAA时，分离机理接近离子对机理，在适当条件下．所试验的化合物都可有所保留。对保留值作出贡献的有固定相排阻作用、分配作用，以及居次要地位的PABAA与同定相表面剩余硅醇基的相互作用。排阻作用及分配作用的相对重要性与流动相中甲醇和离子对试剂浓度有关．血清降解试验提示影响PABAA及其氧化物稳定性的因素与酶促催化作用有关。     

鼻炎灵丸质量标准的研究

目的:建立鼻炎灵丸的鉴别及含量测定方法.方法:采用簿层色谱( TLC)法对方中白芷、川贝母进行定性鉴别,采用高效液相色谱(HPLC)法测定辛夷中木兰脂素的含量.结果:TLC的斑点清晰、分离度较好,阴性无干扰;木兰脂素在0.100 24～1.253 00 μg线性关系良好,平均回收率为102.4％,RSD为1.7％(n=6).结论:所建标准可用于鼻炎灵丸的质量控制.     

UHPLC-Q-Orbitrap HRMS鉴定丹灯通脑软胶囊中多种化学成分

目的 应用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC-Q-Orbitrap HRMS）对丹灯通脑胶囊中的化学成分进行快速分析鉴别。方法 采用ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,分离各个化学成分,质谱采用全扫描模式,正负离子同时扫描检测色谱流出物。根据质谱提供的化合物精准分子量、多级碎片离子信息,结合相关参考文献和数据库信息,同时与对照品的相对保留时间和质谱数据进行比对,定性鉴定化合物。结果 共鉴定出59种化学成分,主要包括黄酮类、醌类、有机酸类等化学成分,并对其药材来源进行了归属。结论 利用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS建立的鉴别方法,能够准确、系统、快速地鉴定丹灯通脑胶囊中的多种化学成分,为研究丹灯通脑胶囊药效物质基础及其质量标准提供依据和参考。     

利用小鼠胚胎干细胞贴壁制备拟胚体的新方法研究

目的为改进拟胚体制备过程中分化不同步等问题,探讨建立小鼠胚胎干细胞贴壁制备拟胚体的新方法。方法沈阳军区总医院心内科于2004年10月至2006年1月对小鼠进行研究,当小鼠胚胎干细胞R1生长至70%～80%亚融合时,将其消化成单细胞,以1×106的细胞数接种到直径100mm组织培养皿中,用含低浓度白血病抑制因子(LIF)1μg/L的胚胎干细胞培养液连续贴壁培养3d后,收集贴壁细胞团继续悬浮培养。对悬浮培养的拟胚体及其冰冻切片行形态学观察,对悬浮及贴壁分化的拟胚体行甲胎蛋白(AFP)、血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)及神经丝蛋白68KD(NF-68)免疫荧光染色。结果形态学观察用本法得到的拟胚体大小均一,分化同步,能展示从简单拟胚体到成熟囊性拟胚体的典型发育过程。免疫荧光染色显示,AFP、PECAM-1及NF-68三种标志物表达均为阳性。结论与传统方法相比,该法操作简便、拟胚体形成率高、分化阶段同步,具有分化为3个胚层来源细胞的能力,可作为胚胎早期发育和胚胎干细胞分化等研究的理想工具。     

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的肾康注射液在大鼠体内代谢产物的鉴定及代谢途径分析

目的 采用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS技术鉴定肾康注射液（Shenkang Injection,SKI）在大鼠体内的代谢产物,并提出可能的代谢途径。方法 SD大鼠经尾iv SKI后,收集其血浆、尿液和粪便样本。以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,Waters BEH C₁₈柱进行色谱分离;使用Q Exactive HRMS和加热电喷雾离子源（HESI）进行正、负离子模式下的质谱扫描分析。根据“提取-化合物筛选-鉴定-验证”的大鼠体内代谢产物的鉴定策略对质谱数据进行分析。结果 在大鼠血浆、尿液和粪便中共鉴定出121种外源化合物,包括29种原型化合物和92种代谢产物。这些代谢产物主要经历的生物转化有羟基化、还原和去饱和等I相代谢反应,以及甲基化、乙酰化、磺酸化、葡萄糖醛酸化、甘氨酸结合、半胱氨酸结合和牛磺酸结合等II相代谢反应。结论 为SKI的体内药理学和作用机制的进一步研究提供了物质基础,所提出的鉴定策略为中药的体内药效物质研究提供了一种系统、全面、可靠的方法。     

抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒性能分析

目的分析抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒,考察其对试剂盒储存稳定性、抑菌效果的影响,并对试剂性能进行评价。方法通过37℃储存稳定性试验、加菌试验考察检测试剂储存稳定性和抑菌效果,并对检测试剂线性范围、精密度进行统计分析,与对照试剂比较相关性,分析其准确性。结果抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒储存稳定性良好,37℃储存21d,检测质控品偏差小于5%;37℃放置10d,对Escherichia coli、Staphylococcus aureus、Bacillus subtilis表现良好抑菌作用。试剂盒在0～1 800μmol/L具有良好线性,Y=0.992 3 X-2.722 7,R~2=0.999 0,批内精密度和天间精密度CV均小于5%。与对照试剂比较,回归方程为Y=0.988 4 X+0.944 1,R~2=0.998 6,显现良好的相关性,测定结果准确可靠。结论抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂,试剂具有良好的储存稳定性和抑菌作用,且试剂盒主要性能指标良好。     

IL-17A基因-121G/A多态性与中国北方汉族人群早发冠心病的关系

目的探讨IL-17A基因-121G/A（IL-17A）单核苷酸多态性与中国北方汉族人群早发冠心病（CAD）发病的相关关系。方法采用聚合酶链反应—重测序法检测经冠状动脉造影证实的520例早发CAD患者和480例非CAD对照者IL-17A基因-121G/A单核苷酸多态位点的基因型和等位基因分布情况。结果 IL-17A基因-121G/A单核苷酸多态三种基因型（GG型、GA型和AA型）在早发CAD患者中的分布频率分别为86.9%、12.2%和0.9%,在对照者分别为81.2%、17.8%和1.0%,两组间的基因型分布皆符合Hardy-W e inberg平衡定律,IL-17A基因-121G/A单核苷酸多态的GG基因型和G等位基因分布频率在两者间存在统计学差异（OR=0.68;95%可信区间为0.49-0.94;P=0.02）。按性别进行亚组分析,IL-17A基因-121G/A单核苷酸多态的GG基因型和G等位基因频率在男性CAD和对照者之间存在统计学差异（OR=1.56;95%可信区间为1.04-2.28;P=0.02）。Logistic回归分析显示,IL-17A基因-121G/A多态性是CAD发病的独立危险因素（P〈0.05）。结论中国北方汉族人群中存在IL-17A基因-121G/A单核苷酸多态性。IL-17A基因-121G/A单核苷酸多态性与早发CAD的发病存在相关关系,G等位基因携带者发生CAD的危险性增加。     

纸色谱-紫外分光光度法测定脂质体中酮洛芬的含量

报道了酮洛芬脂质体的含量测定方法 ,即通过纸色谱法分离药物与脂质体膜材后 ,采用紫外分光光度法测定主药含量 .酮洛芬在 3～ 8mg/mL范围内与吸收度成线性关系 (r =0 9998) ;日内相对标准偏差在 0 46 %以内 (n =5 ) ,日间相对标准偏差在 1 6 %以内 (n =5 ) ;平均回收率为99 6 % (RSD =0 97% ) .     

ATP生物发光法预测白血病药敏的临床应用

本研究了31例白血病病人体外ATP生物发光法药敏试验和临床疗效的关系。24例体外敏感，20例体内敏感．敏感度83．3%，7例体外不敏感．6例体内亦无效，特异度85．7%。总符合率83.9%。体内外试验的配对资料一致性，检验表明，两有非常显的一致性(P<0．01)。阳性符合组与阴性符合组在体外试验药物敏感性上有显的差异。以上结果表明．ATP生物发光法药敏试验在预测白血病药敏方面具有简便、快速、敏感的优点，与临床有很好的符合性。