细脚拟青霉多糖抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的:探讨细脚拟青霉多糖(PtPs)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的活性。方法:通过CCK-8试剂盒检测PtPs对HepG2.2.15的细胞毒性。以无或低毒浓度的PtPs作用于HepG2.2.15细胞,采用ELISA法检测细胞内和培养上清的HBsAg,HBeAg水平;采用荧光定量PCR法检测细胞内和培养上清中HBV DNA的水平。结果:随着PtPs浓度的增加细胞内的HBeAg和上清中的HBeAg、HBV DNA的水平显著下降。PtPs对细胞内和上清中HBeAg的抑制率高度相关,r=0.994,P<0.01。PtPs作用24 h后细胞内和上清中的HBeAg的治疗指数分别为5.63和3.30。结论:PtPs在体外对HBeAg和HBV DNA的合成与分泌有抑制作用。     

CB-171半自动生化分析仪常见故障及排除

我科于1996年购置澳大利亚TRACE公司产品CB－171半自动生化分析仪。在两年的使用过程中,发现了一些问题及处理办法。观介绍如下,以便使用本仪器的同行参考。1蒸馏水空白四光度偏高1．1表现为开机后,仪器提示两次吸入蒸馏水后,多个波长的蒸馏水空白吸光度值偏高,不在仪器可接受的范围内。荧屏上,在这些波长下面分别显示“NO”。仪器不能进人测试状态。1．2原因为流动比色地中有污物沉积,主要为蛋白沉积。处理办法是用“84”消毒液与水按1：2比例混合,再加少许Triton－X－100配的清洁液’‘’浸泡比色池5。in,然后再用蒸馏水冲…     

Duchenne型肌营养不良1例诊断体会

Duchenne型肌营养不良(DMD)亦称假肥大型肌营养不良症,是一类X连锁隐性致死性遗传疾病,是肌营养不良蛋白基因突变引起的肌营养不良蛋白功能缺失或不足,导致肌肉无力,运动迟缓,行走丧失,呼吸障碍和心肌病等[1]。现报道1例DMD诊断过程。     

不育男性精浆中免疫球蛋白与精子参数的相关分析

目的 检测不育男性患者精浆中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和精子活力与密度,分析各参数之间的相关性,探讨其与男性不育的关系.方法 96例不育症患者分为弱精子症组、少精子症组和无精子症3组,以31例精液质量正常的已生育男性作为参照对象.利用免疫比浊法和精子质量图文分析系统分别检测精浆中IgA、IgG、IgM和精子活力与密度.结果 少精子症和无精子症患者精浆中IgM含量与正常组和弱精子症组比较显著减低(P＜0.01,P＜0.05);精浆中IgA、IgG和IgM之间两两相关(P＜0.01),IgM含量与精子密度显著相关(P＜0.05);不育症组与正常组比较,IgA、IgG和IgM相互之间的相关性减低.结论 精浆中三种免疫球蛋白含量的失衡及IgM含量减少可能是导致男性不育的原因之一,该结果可为男性不育的研究提供参考.     

宜昌夷陵地区11656例0~6岁婴幼儿25-羟维生素D水平检测分析

目的为了研究宜昌市夷陵区0~6岁儿童维生素D营养状况及其与年龄、性别、季节之间的关系,以便为夷陵区儿童合理补充维生素D提供科学依据。方法对2017年1月至2018年7月来夷陵区妇幼保健院体检的0~6岁11656例儿童,采用荧光免疫层析方法进行末梢血25-(OH)D 3水平检测。结果该区11656例儿童末梢血25-(OH)D 3水平为(29.35±7.59)ng/mL,其中维生素D缺乏组566例(4.86%),维生素D不足组6579例(56.44%),维生素D充足组4511例(38.70%)。1岁以内婴儿组维生素D水平明显高于幼儿组和学龄前组,3岁以后儿童维生素D水平明显下降,各年龄组间差异有统计学意义(χ2=145.846,P<0.05)。不同季节儿童维生素D水平春季最高,冬季最低(χ2=504.007,P<0.05)。不同性别间儿童维生素D水平差异并无统计学意义(t=0.841,P>0.05)。结论我区0~6岁儿童维生素D水平大部分处于不足的状态,应增加该区儿童维生素D的摄入量,尤其加强学龄前组儿童维生素D的补充及冬季户外活动。     

人IL-6 mRNA的实时定量检测法

目的：建立TaqMan-MGB技术实时定量检测人IL-6 mRNA的方法，并用于检测人外周血单个核细胞在牛膝多糖诱导下IL-6 mRNA的表达。方法：（1）抽取人外周静脉血，EDTA抗凝，用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞，用Trizol裂解液提取总RNA，将总RNA逆转录为cDNA，PCR扩增IL-6后纯化PCR产物，与pMD 18-T载体进行连接，转化宿主菌DH-5α。提取重组质粒DNA，作为实时荧光定量检测的标准品。建立TaqMan-MGB技术实时定量检测IL-6 mRNA的方法。（2）终浓度分别为0、100、200、400、800和1 600 mg/L的牛膝多糖作用于人外周血单个核细胞，定量检测IL-6 mRNA的表达。结果：（1）酶切分析、PCR扩增以及测序结果均证实IL-6 cDNA成功重组到pMD 18-T载体上。（2）TaqMan-MGB技术检测IL-6 mRNA线性范围广；灵敏度高；特异性好；重复性好。（3）牛膝多糖作用于人外周血单个核细胞后IL-6 mRNA表达增高。结论：TaqMan-MGB技术能较为精确地定量IL-6 mRNA。     

细脚拟青霉多糖PTPS-1的结构特征和抗肿瘤活性的初步研究

目的分析鉴定细脚拟青霉多糖PTPS-1的理化性质和结构特征,并观察其抗肿瘤活性。方法采用DEAE-纤维素及Sephadex G-100柱色谱分离纯化得到PTPS-1;利用HPLC、GC、IR、部分酸水解及NMR分析PTPS-1的相对分子质量、组成和结构特征;采用CCK-8检测观察PTPS-1对小鼠脾细胞和PTPS-1刺激培养的小鼠腹腔巨噬细胞上清对Sp2/0细胞的增殖活性。结果PTPS-1的纯度为98.977%,平均相对分子质量为1.84×104,由甘露糖和半乳糖组成,二者摩尔比为1.3∶1,糖链结构中主链含有α-(1→6)、α-(1→2)和β-(1→3)连接的糖苷键,支链含有Gal-(1→3)连接。PTPS-1可明显促进小鼠脾细胞的增殖(P<0.01),PTPS-1刺激培养的小鼠腹腔巨噬细胞上清能抑制Sp2/0细胞的增殖(P<0.01)。结论PTPS-1是从细脚拟青霉中分离出的具有免疫调节和抗肿瘤活性的中性杂多糖。     

粒细胞缺乏症的外周血常规及骨髓象特点分析

目的：探讨粒细胞缺乏症的外周血常规及骨髓象的特点。方法：对67例粒细胞缺乏症患者的外周血常规进行分析,根据白细胞、血红蛋白浓度及血小板数量的变化将粒缺分为A、B、C、D 4类,并对骨髓象特点进行总结。结果：粒细胞缺乏症的外周血常规中,A类36例（53．73％）,B类16例（23．98％）,C类8例（11．94％）,D类7例（10．45％）;骨髓象为成熟障碍型48例（71．64％）、再生障碍型19例（28．36％）。结论：加强粒细胞缺乏症患者的外周血常规及骨髓象的监测,并注意血红蛋白及血小板的变化,有助于粒细胞缺乏症的诊断与治疗。     

细脚拟青霉多糖体外抗肿瘤作用及其机制的实验研究

目的：通过观察细脚拟青霉多糖的体外抗肿瘤活性，初步探讨其作用机制。方法:采用水提，乙醇沉淀，DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析分离纯化多糖PTPS-I；以PTPS-I 和经PTPS-I刺激培养的人外周血单个核细胞(MNC)的条件培养基(PTPS-I-MNC-CM)作用于体外培养的红白血病细胞K562、喉癌细胞Hep2和肝癌细胞SMMC-7721，观察PTPS-I 和PTPS-I-MNC-CM对其增殖活性的影响；用cell counting kit-8 (CCK-8)检测MNC 的增殖活性；以荧光定量PCR检测MNC 中TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果:PTPS-I-MNC-CM能抑制K562，Hep2和SMMC-7721细胞的增殖(均为P＜0.01)；PTPS-I不能抑制肿瘤细胞的增殖(P＞0.05)，没有显现直接的细胞毒作用。PTPS-I能促进MNC的增殖(P＜0.01)和增强TNF-α 和 IL-6 mRNA的表达(P＜0.05，P＜0.01)。结论:PTPS-I具有免疫调节活性，通过免疫调节发挥抗肿瘤作用。     

重症监护病房呼吸机相关性肺炎的病原菌及耐药性

目的探讨重症监护病房（ICU）呼吸机相关性肺炎（VAP）的病原菌及其耐药性,为临床诊断与治疗提供参考依据。方法对ICU VAP患者进行病案调查;并对患者的痰及下呼吸道分泌物进行常规细菌培养,用琼脂扩散法进行药物敏感试验并统计分析。结果ICU 184例VAP患者均患有严重的基础疾病;机械通气的插管方式为经口气管插管、经鼻气管插管和气管切开等;VAP病原菌以G-菌为主占79.9%,其中铜绿假单胞菌41株,居首位占22.3%;肺炎克雷伯菌30株,居第2占16.3%;G＋菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）12株,占总株数的6.5%;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）5株,占2.7%;耐药监测结果显示,G-菌均出现较强的耐药性。结论加强对VAP病原菌的监测与控制,才能提高VAP的诊断与治疗水平。