清热活血方药重塑类风湿关节炎骨免疫微环境的研究思路

破骨细胞在类风湿关节炎骨破坏中发挥着重要作用,骨免疫微环境中免疫细胞可以通过复杂的通信网络分泌细胞因子、趋化因子、生长因子和细胞外基质的蛋白质等调控破骨细胞,同时破骨细胞还可以反作用于免疫细胞,达到双向调节,实现空间相互作用。认为“湿、热、瘀”是类风湿关节炎的核心病机,湿热瘀阻是骨破坏的主要证候,据此提出清热活血方药可以多通道、多靶点调控类风湿关节炎炎症反应,重塑骨免疫微环境,延缓骨破坏。     

清热活血方对CIA大鼠自噬相关蛋白p62表达的影响

目的 研究清热活血方对胶原诱导关节炎(collagen type Ⅱ-induced arthritis, CIA)大鼠滑膜组织、外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)自噬相关蛋白p62的影响,进一步探讨清热活血方防治类风湿关节炎的相关机制。方法 40只SD大鼠随机分成正常组、模型组、清热活血方组、依那西普组,用免疫源性牛Ⅱ型胶原造模,造模成功后各组大鼠分别给予相应药物灌胃,连续治疗28 d后观察大鼠关节肿胀程度,检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)及白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)水平、滑膜及PBMC中p62蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠出现关节红肿,血清TNF-α、IL-1β水平上升(P<0.01),关节滑膜组织及PBMC中p62 mRNA水平上升(P<0.01),p62蛋白相对含量降低(P<0.01)。与模型组比较,清热活血方组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量降低(P<0.01),滑膜组织及PB...     

类风湿关节炎合并肺间质病变的中医证候规律研究

目的:分析类风湿关节炎合并肺间质病变(RA-ILD)患者的中医证候分布规律。方法:回顾分析2011年1月至2018年12月中国中医科学院广安门医院收治的RA-ILD住院患者162例的临床症状、实验室指标、肺功能、胸部高分辨CT(HRCT)征象与中医证候分布规律。结果:根据证候频次由高至低排序前4依次是湿热痹阻、气阴两虚兼湿热痹阻、湿热痹阻兼瘀血阻络、湿热痹阻兼肝肾不足。不同证型间性别、年龄差异无统计学意义。不同证型的患者在发热、皮疹、关节痛、口干、晨僵、胸闷、心悸、气促、乏力、胸闷、气短、喘息症状方面差异无统计学意义,在肌肉痛、眼干症状、咳嗽、咳痰症状差异均有统计学意义(均P<0.05)。各个证型患者的杵状指、肺部爆裂音差异均无统计学意义(均P>0.05),在口唇发绀症状差异有统计学意义(P<0.05),痰瘀痹阻证的口唇发绀症状突出。各个证型患者在白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCPab)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血气分析氧分压、二氧化碳分压差异均无统计学意义(均P>0.05)。各个证型间在肺通气功能、肺弥散功能的障碍程度及障碍类型差异均无统计学意义(均P>0.05)。不同证型的HRCT影像学特征差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:湿热痹阻证是类风湿关节炎合并肺间质病变患者活动期的主要证候类型,其炎症活动度高,应及早行肺功能及HRCT。     

基于网络药理学探讨四神煎治疗类风湿关节炎的作用机制

目的:基于网络药理学探讨四神煎治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的作用机制。方法:通过中药系统药理数据库和分析平台(traditional chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform, TCMSP)、中医药百科全书数据库(encyclopedia of traditional chinese medicine, ETCM)检索四神煎组方中药的主要化学成分,并结合文献进行筛选、补充;通过Pubchem有机小分子生物活性数据库检索化学成分的SMILES结构式及2D结构,经Swiss ADME数据库筛选后将符合标准的化学成分上传至Swiss Target Prediction数据库预测药物活性靶点;通过人类基因数据库(Gencards)、在线人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man, OMIM)、治疗靶标数据库(therapeutic target database, TTD)、DrugBank数据库获取RA疾病相...     

基于网络药理学研究淫羊藿抗骨质疏松的分子机制

目的基于网络药理学探讨淫羊藿可能的物质基础,并分析淫羊藿抗骨质疏松可能的分子机制。方法采用活性成分筛选、靶点预测技术,结合生物信息学手段,确定淫羊藿防治骨质疏松症的特异性靶点,并进行信号通路富集分析,以进一步分析其治疗骨质疏松症的分子机制。结果淫羊藿在TCMSP数据库中共检索到130个相应成分,根据OB和DL参数共筛选到23个入血活性成分,同时利用相关靶点预测技术,共获得101个预测靶点。通过对GEO芯片数据库的基因芯片进行二次挖掘分析,共获取124个明显的差异基因;在疾病基因相关数据库共检索到356个与骨质疏松症发生、发展密切相关的已知的相关靶点基因。利用cytoscape构建并合并活性成分及疾病的蛋白质相互作用关系网络,通过网络拓扑分析共筛选出221个关键基因;Clue GO富集分析显示,淫羊藿除与直接作用于骨质疏松症关键节点涉及的信号通路,如Wnt信号通路、TGF-β信号通路、Notch信号通路等有关,还对PI3K-Akt信号通路、VEGF信号通路、甲状腺素信号通路等同时进行调控。结论淫羊藿治疗骨质疏松症具有多成分、多靶点的特点;其主要通路不仅直接参与骨重建的细胞分化,调节成骨、破骨代谢平衡,还通过全身其他系统,如循环系统、神经系统等来干预和影响骨微环境,与目前抗骨质疏松的作用机制相符合。     

中医药防治类风湿关节炎机制研究热点述评

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以关节滑膜炎症为主的慢性自身免疫疾病,致残率高,其发生发展机制涉及遗传、免疫机制、信号通路、细胞因子、环境等多方面因素。中医药防治RA具有确切疗效,本文对近年来中医药防治RA基础研究进行梳理总结,围绕RA病证结合动物模型及细胞模型,中医药调节免疫紊乱、中医药调控炎症反应、中医药调控肠道微生物菌群、中医药调控表观遗传等方面,聚焦研究热点,把握未来研究方向,以期为RA的中医药防治及机制研究提供新思路。     

清热活血方对胶原诱导关节炎大鼠miR-140、TLR4、NF-κB的影响

目的 探讨清热活血方对胶原诱导关节炎(collagen type Ⅱ-induced arthritis, CIA)大鼠miR-140/Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响。方法 6周龄SPF级大鼠24只,随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(0.2 mg/kg)、清热活血方组(34 g/kg),每组6只,通过对大鼠尾根部注射Ⅱ型胶原乳剂构建类风湿关节炎动物模型,连续给药6周。连续监测大鼠关节肿胀程度,Elisa法测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6含量白细胞介素6(interleukin 6,IL-6),TRAP染色观察破骨细胞(osteoclast,OC)数量,Western blot法检测大鼠骨组织中TLR4、NF-κB的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测大鼠骨组织中miR-140、TLR4、NF-κB的mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠...     

基于HIF-1α/CXCL12/CXCR4/VEGF信号通路探索中药复方调控CIA大鼠滑膜血管新生的机制

目的 探究清热活血方调控胶原诱导关节炎大鼠缺氧诱导的滑膜血管新生作用机制。方法 24只清洁级SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、清热活血方组、甲氨蝶呤组。注射牛Ⅱ型胶原乳剂造模,造模成功后各组大鼠分别给予相应药物灌胃,治疗过程中间隔测量大鼠体质量、足趾容积,进行关节炎指数评分,用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-18、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、趋化因子配体[chemokine (C-X-C motif) ligand,CXCL]12水平,Western blot法检测滑膜组织低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α、趋化因子受体[chemokine (C-X-C motif) receptor,CXCR]4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达量。结果 与正常组相比,模型组大鼠关节红肿变形明显,关节炎指数明显增加;同时血清中TNF-α、IL-18和CXCL12水平升高(P<0.01),滑膜组织HIF...     

基于网络药理学探讨桂枝芍药知母汤治疗骨性关节炎的分子机制

目的:基于网络药理学技术探讨中药复方桂枝芍药知母汤治疗骨性关节炎的作用及分子机制。方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台对桂枝芍药知母汤可能的活性成分和靶点进行筛选和预测,检索TTD、DrugBank、OMIM、GAD、PharmGKB等数据库与骨性关节炎相关的作用靶点,结合生物信息学手段,经大规模数据分析,得到桂枝芍药知母汤和骨性关节炎相关基因构成的分子网络及信号通路,采用ClueGo信号通路富集分析其可能的分子机制,用Cytoscape软件构建"成分-靶点-疾病"可视化交互网络图。最后,对分析结果进行解析。结果:在中药系统药理学数据库和分析平台中检索出桂枝芍药知母汤1016个相关成分,根据OB和DL参数筛选出172个入血活性成分并预测出160个可能的靶点;同时在上述疾病基因相关数据库检索出168个与骨性关节炎发生、发展密切相关的已知靶点,应用网络拓扑分析筛选出183个关键基因,ClueGO富集分析结果显示,桂枝芍药知母汤作用于骨性关节炎的关键节点涉及的信号通路主要被富集在关节软骨生长、修复和代谢、细胞增殖、分化、凋亡和抵抗氧化应激、炎症等99条信号通路。结论:桂枝芍药知母汤通过多靶点、多途径、相互协调、相互影响来治疗OA,主要体现在促进关节软骨生长、修复和代谢、参与细胞增殖、分化、凋亡和抵抗氧化应激、抗炎和调节全身其他免疫系统来干预关节软骨-骨的动态平衡,充分体现了中药复方在治疗疾病的整体性和系统性特点。基于网络药理学研究桂枝芍药知母汤治疗骨性关节炎的分子机制对于阐明其科学内涵具有重要意义,为后期实验研究提供依据,也为研究中药复方治病注重配伍、多层次、多靶点等特点提供新思路。     

姜泉症-证结合论治活动期银屑病关节炎经验

活动期银屑病关节炎以皮损及关节炎为主要临床表现。姜泉认为血热内盛,泛溢肌肤,湿热胶结,痹阻关节是活动期银屑病反复发作缠绵难愈的根本原因,可根据皮损、关节炎之轻重采用症-证结合辨治。皮损为甚者,当先治之,以热入营血为核心,易裹挟湿热,故于犀角地黄汤凉血之中合苦参、蛇莓之类清热燥湿。关节肿痛者,以湿热痹阻为核心,掺挟血热,方用二妙散加土茯苓、萆薢清利湿热,配合牡丹皮、赤芍之类清血中伏热,可使血凉而湿热俱清,守方缓缓图之,病乃渐愈。